单硫酸卡那霉素检验SOP

GMP管理文件

一、目的：建立单硫酸卡那霉素检验的标准操作规程，保证正确操作。

二、依据：《中国兽药典》（2000年版一部）。

三、适用范围：适用于单硫酸卡那霉素的检验。

四、责任者：QC检验员

五、正文：

1．质量标准：（见单硫酸卡那霉素质量标准）。

2．试剂：

2.01 0.2 ％蒽酮的硫酸溶液 2.02 氯化钡试液

2.03 盐酸 2.04 0.5mol/L硫酸溶液

3．仪器与用具

3.01 酸度计 3.02 抑菌圈测量仪

3.03 电阻炉 3.04 电子天平

3.05 电热恒温干燥箱 3.06 蒸汽消毒器

3.07 超净台 3.08 加样器

4．操作步骤：

4.1 性状

本品为白色或类白色粉末，则判定该项合格。

4.2 比旋度取本品，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中含50mg 的溶液，照旋光度测定法（详见旋光度测定法标准操作规程）测定，比旋度为+116°至+123°。

4.3. 鉴别：

4.3.1 取本品约1mg，加水2ml溶解后，加0.2％蒽酮的硫酸溶液4ml,在水浴中加热15分钟，冷却，即显蓝紫色。

4.3.2 取供试品水溶液,加氯化钡试液，即生成白色沉淀；分离，沉淀在盐酸或硝酸中均不溶解。

4.3.3 以上两项均呈正反应，则判定该项合格。

4.4 检查

4.4.1 碱度取本品1.2g，加水10ml溶解后，照PH值测定法（详见PH值测

定法标准操作规程），pH值应为7.0～9.0。则判定该项合格。

4.4.2 溶液的澄清度与颜色取本品5份，各3.4g，分别加0.5mol/L硫酸溶液10ml溶解后，溶液应澄清无色；如显浑浊，与1号浊度标准液（详见溶液颜色检查法标准操作规程）比较，均不得更浓；如显色，与黄色或黄绿色3号标准比色液（详见溶液颜色检查法标准操作规程）比较，均不得更深。则判定该项合格。

4.4.3硫酸盐取本品约0.26g,精密称定，加水100使溶解，加浓氨溶液调节PH 值至11后，精密加入氯化钡滴定液（0.1mol/L）10ml、酞紫指示液5滴，用乙二胺四醋酸二钠滴定液（0.05mol/L）滴定，注意保持滴定过程中PH值为11，滴定至紫色消裉，加入乙醇50ml,继续滴定，至蓝紫色消失，并将滴定的结果用空白试验校正，每1ml氯化钡滴定液（0.1mol/L）相当于9.606mg的硫酸盐（SO

4

），本品含硫酸盐按干燥品计算，应为15.0%～17.0%。则判定该项合格。

4.4.4干燥失重取本品，照干燥失重测定法(详见干燥失重测定法标准操作规程)，在105℃干燥至恒重，减失重量不超过3.0%，则判定该项合格。

计算公式如下:

干燥失重%=(W1－W

2)/(W1－W

)×100%

式中：W1为瓶+供试品的重量（g）； W

2

为瓶+供试品恒重的重量（g）；

W

为瓶恒重的重量（g）。

4.4.5卡那霉素B 取本品,加水水制成每1ml中含40mg的溶液,作为供试品溶液;精密量取适量,加水稀释成每1ml中含0.8mg的溶液，作为对照溶液。照薄层色谱法（详见薄层色谱检查法标准操作规程）试验，吸取上述两种溶液各1µl，分别点于同一薄层板上，以

5.5%磷酸二氢钾溶液-乙醇（70：30）为展开剂（用磷酸调节PH值至4.3±0.2）,在20～25℃展开后，晾干，喷以显色液（取茚三酮0.2g,加热水4ml溶解后，加0.16%氯化亚锡溶液5ml，混匀，滤过，4℃保存备用。临用时，取此溶液主斑点下的卡那霉素B所显斑点的颜色与对照溶液的主斑点比较，不得更深。则判定该项合格。

4.4.6 炽灼残渣不得过0.5%(详见炽灼残渣检查法标准操作规程)。则判定该项合格。

4.4.7 异常毒性（委托检验）。

4.4.8 热原（委托检验）。

4.4.9降压物质（委托检验）。

4.4 含量测定精密称取本品适量，加灭菌水制成每1ml中约含1000单位的溶液，照抗生素微生物检定法（详见抗生素微生物检定法标准操作规程）测定，1000

卡那霉素单位相当于1mg的C

18H

36

N

4

O

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计算公式如下：

P=log-1[T2+T1-S2-S1 ×I]×100%

T2+S2-T1-S1

式中P为供试品效价（标示量或估计效价的百分数）；

S2为标准品高浓度溶液所致抑菌圈直径（面积）的总和。

S1为标准品低浓度溶液所致抑菌圈直径（面积）的总和。

T2为供试品高浓度溶液所致抑菌圈直径（面积）的总和。

T1为供试品低浓度溶液所致抑菌圈直径（面积）的总和。

I为高、低浓度剂量之比的对数值，2：1时，I=0.301,4:1时，I=0.602。

结果判定：按干燥品计算，每1mg的效价不得少于760卡那霉素单位。则判定该项合格。