血凝抑制试验

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既是抗体与血凝素结合,封闭血凝素,使之不 能与红细胞结合
三、实验试剂与器材
1. 鸡红细胞 :用生理盐水配成1%红细胞悬液
2. 4单位血凝素 3. 生理盐水 4. 免疫血清 5. 微量反应板、微量移液器、灭菌塑料吸头
四、实验步骤
1. 微量反应板1块置于水平实验台上,在第1排1-10 孔 内加入25ul生理盐水,第11孔不加。第12孔加 25ul生理盐水
++++
五、结果判定
1.在各组对照均正确的情况下,按下列标准判定
血凝抑制反应强度示意图
凝集特别显著:“++++” 凝集现象次之:“+++” 凝集清楚可见:“++” 稍显凝集者:“+” “-” 红细胞均沉于孔底呈小圆点状,边缘整齐。
2.能完全抑制血凝素的最高血清稀释度即为 该血清的血凝抑制价
六、意义
1.用于检测血清中抗体含量; 2.鉴定病毒的型、亚型; 3.血凝抑制价的测定。
如表:
孔号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11(+) 12(-)
稀释度 2 4 8
16 32 64 128 256 512 1024 弃
生理盐 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 X
25

免疫血 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 x 清
2. 在第1孔内加入免疫血清25ul,混匀后吸出25ul 加入第2孔内,再混匀后吸出25ul加入第3孔内,依次 类推至第10孔时弃掉25ul。第12孔不加作阴性对照孔。
3. 在1-12孔均加入25ul的4价血凝素,混匀后、 室温静置5min 。 4. 在每孔内加入25ul1%的鸡红细胞悬液,震 荡,室温静置15-30min,每5min观察一次结果。 5. 计算血凝效价。
4HA血凝 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25

室温静置5min
1%鸡红 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25
细胞
室温ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ置15-30min,每5min观察一次结果
结果预测 -
--
-
-
++ ++++ ++++ ++++ ++++ -
血凝抑制试验
组员:申杨帆 刘永红 孙 鹏 符贵 陈泽
一、实验目的
1.掌握血凝抑制试验的原理和 操作方法
2.熟悉正确判定试验结果并对 结果进行分析。
3.熟悉血凝抑制价的测定。
二、凝抑制试验原理
病毒引起的血凝现象能被相应的抗血凝素抗体 所抑制,即抗体与病毒结合后,血凝素无法吸附 于红细胞表面的受体上,用免疫血清阻止红细胞 凝集的现象,称为血凝抑制.
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