公共场所空气中细菌总数检验方法

公共场所空气中细菌总数检验方法

1 定义

撞击法（impacting method）是采用撞击式空气微生物采样器采样，通过抽气动力作用，使用空气通过狭颖或小孔而产生高整气流，使用悬浮在空气中的带菌粒子撞击到营养琼脂平板上，经37°、48h培养后，计算出每m3空气中所含的细菌菌落数的采样测定方法。

自然沉降法（natural sinking method）是指直径9cm的营养琼脂平板在采样点暴露15分钟，经37°、48h培养后计数生长的细菌菌落数的采样测定方法。

2 仪器和设备

2.1高压蒸汽灭菌器。

2.2干热灭菌器。

2.3恒温培养箱。

2.4冰箱。

2.5平皿（直径9cm）。

2.6制备培养基用一般设备：量筒，三角烧瓶，pH计或精密pH试纸等。

2.7撞击式空气微生物采样器。

3培养基

3.1营养琼脂培养基

3.1.1成分；蛋白胨

牛肉浸膏10g

氯化钠3g

琼脂15～20g

蒸馏水1000ml

3.1.2制法将上述各成分混合，加热溶解，校正pH至7.4，过滤分装，121℃20min高压灭菌。用自然沉降法测定时，倾注约15ml于灭菌平皿内，制成营养琼脂平板。撞击法参照采样器使用说明制备营养琼脂平板。

4操作步骤

4.1撞击法

4.1.1选择有代表性的位置设置采样点。将采样器消毒，按仪器使用说明进行采样。

4.1.2样品采完后，将带核辐射营养琼脂平板置36±1℃恒温箱中，培养48h，计数菌落数，并根据采样器的流量和采样时间，换算成每m3空气中的菌落数，以CFU/m3报告结果。

4.1.3选择撞击式空气微生物采样器的基本要求。

（a）对空气中细菌捕获率达95%。

（b）操作简单，携带方便，性能稳定，便于消毒。

4.2自然沉降法

4.2.1设置采样点时，应根据现场的大小，选择有代表性的位置作为空气细菌检测的采样点。通常设置5个采样点，即室内墙角对角线交点为1采样点，该交点与四墙角连线的中点为另外4个采样点。采样高度为1.2～1.5m。采样点应远离墙壁1m以上，并避开空调、门窗

等空气流通外。

4.2.2将营养琼脂平板置于采样点处，打开皿盖，暴露5分钟，盖上皿盖，翻转平板，置36±1℃恒温箱中，培养48h。

4.2.3计数每块平板上生长的菌落数，求出全部采样点的平均菌落数，以CFU/皿报告结果。

第2节化妆品生产厂房空气微生物检验

1 采样

一般厂房应设五个采样点，即室内墙对角线交叉处的中点和与中点等距的四角各点。采样高度为1.5m。

2 检测方法

2.1 自然沉降法(平板暴露法)

将营养琼脂平板(平皿直径为9cm)置于采样点,暴露5分钟(洁净厂房暴露=时间可延长)后,置37℃培养24小时,记录每个平板上的菌落数,并求出全部采样点的平均菌落数.按下列公式计算1m3的菌数:

菌数/1m3=50000N/AT

式中:N为平板计数的平均菌落数,根据采样的原理可分为滤过式、撞击式、静电式、离心式和液体冲击式等。这些采产器各有优缺点，目前国际上公认的定量采产方法是裂隙撞击式采样器，如Calssela采样器、Andersen、NBS采样器，我国研制的JWL-Ⅰ型和Ⅱ型采样器，THK-201型采样器，仿安德森2级和仿安德森6级空气微生物采样器等均属于此类。

采样时，将采样器置于采样点，按仪器使用说明进行采样，并记录当时温度、相对湿文工团及人员活动情况，经培养后，计数所生长之菌落数，再换算成每立方米空气中细菌数。

第3节化妆品生产环境物体表面微生物检测

1 光滑物体表面（如操作台面，较大机器表面）的采样

可用5×5cm的标准灭菌规格板，放在被测物体表面，根据物体表面大小，采样1～4个，用浸有无菌稀释液的棉拭子在规定板内来回均匀涂抹整个方可格各部位，并随之转动拭子，剪去手接触部位后，将棉拭子放入5ml稀释液的试管内振打80次，作适当稀释后，取1ml 注入平皿，倾注普通营养琼脂，进行活菌计数，每个稀释度至少作2个平行样，计算被检物体表面污染微生物的数量，如检验机器的沟缝等处时，将机器拆卸，直接用棉试子涂抹。

物体表面污染微生物数（cfu/cm2）=平板上菌落的平均数×稀释度×5/采样面积（cm2）

2 手的采样

被检人五指并拢，将浸有无菌稀释放液的棉拭子在双手指屈面从指根到指端来回涂抹两次，并随之转动采样棉拭子，剪去手接触部位，将棉拭子放入5ml稀释液的试管中振打80次，采样液作适当稀释后取1ml接种平板，作活菌计数。

手污染总数（cfu/只）=平板上菌落数×稀释倍数×5/2

3 包括容器

根据容器大小将适量的无菌稀释液加到容器内，盖紧盖子，振打80

次，采样液作适当稀释后接种平板。广口的上瓶或盒也可用无菌棉拭子涂抹方法采样。

容器污染总菌数（cfu/个）=平板上菌落数×稀释倍数×所加稀释液量如怀疑有某种菌污染时，取样后，按该菌的标准检

5.1 装配与包装车间空气中细菌菌落总数应≤2 500 cfu/m3。

5.2 工作台表面细菌菌落总数应≤20 cfu/cm2。

5.3 工人手表面细菌菌落总数应≤300 cfu/只手，并不得检出致病菌。

我们在测车间卫生指标的时候都是使用比较简单的方法:

直接在手上和机器上涂抹,进行比较就可以了,这样比较方便,如果真的测试的话,我想不是很经济.

你可以参照此方法,对你有帮助

公共场所卫生监测技术规范

Rules of Health Monitoring for Public Places

1 主题容内与适用范围

本规范规定了公共场所开展卫生监测的技术要求。

本规范适用于公共场所开展卫生监测的要求监测工作。

2 名词、术语

公共场所卫生监测包括发证监测，复证监测和经常性卫生监测。

发证和复证监测是指对公共场所经营单位的卫生状况进行监测，评价其卫生状况，确定是否发放卫生许可证。