代谢性骨病
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B液:聚乙二醇40015ml+1ml N,N二甲基 苯甲胺
工作液:42ml A液+1ml B液 ⑷包埋:温度控制和真空控制…… ⑸切片: ⑹脱包埋剂:二甲氧基乙酸乙酯和丙酮….. ⑺染色……
(三)电镜标本的制作 (四)骨磨片的制作 (五)骨切片的染色 1 脱钙骨切片的染色 HE: Masson:成熟骨组织蓝绿色 Mallory:骨组织淡蓝色,骨细胞红色 Van Gieson:骨基质胶原纤维红色,骨细胞淡黄
色,胞核蓝黑色 Gomeri:网状纤维黑色,胶原纤维紫红色,骨组
织灰色
2 骨磨片的染色 银染:骨板黄色,哈佛管、骨陷窝及骨小管黑色 苦味酸-硫堇染色:骨基质黄褐色,骨陷窝和骨小
管暗黑色 结晶紫染色:骨陷窝、骨小管和哈佛管蓝紫色 3 非脱钙骨切片的染色 Goldner-trichrome三色法:骨组织绿色,类骨质
(二)不脱钙骨标本的制作 1用途:骨组织形态计量学;四环素、钙黄绿素
(calcein)的骨代谢动力学研究。 2优势;无明显组织变形,动态参数获取。 3主要试剂: ⑴甲基丙烯酸甲酯
(methyl methacrylate,MMA); ⑵甲基丙烯酸羟乙基酯
(hydroxyethl methacrylate,HEMA); ⑶乙二醇异丁烯酸酯
5病理机制的研究,如骨桥素 (osteopontin,OPN)与异位性骨化;
6组织工程学中的组织兼容和长期存活问题, 评价生物材料的安全性等。
二、骨标本的制作与染色 (一)骨组织标本的制作 1取材 2脱钙骨标本的制作 (1)固定:液体、时间、温度、冲洗 (2)脱钙:酸类脱钙和螯合剂脱钙 (3)脱水:正丁醇或叔丁醇 (4)透明:二甲苯、甲苯、氯仿 (5)浸透与包埋:熟蜡;蜂蜡;火棉胶等; (6)切片:
⑶包埋液配制:
①甲基丙烯酸甲酯:
A液:60ml甲酯+35ml丁酯+5ml苯丙酸甲酯+
1.2ml聚乙二醇400
B液:100mlA液+0.4g干燥过氧化苯甲酰
C液:100mlA液+0.4g干燥过氧化苯甲酰
②甲基丙烯酸羟乙基酯
A液:HEMA80ml+聚乙二醇40012ml+水 8ml+过氧化苯甲酰6g;
代谢性骨病 Metabolic bone disease
定义:指各种原因所致的以骨代谢紊乱为 主要特征的骨疾病。属代谢性疾病的范畴。 以骨重建(bone remodaling)紊乱所致的 骨转换率异常、骨痛、骨畸形和骨折为特 征。依病因和病理特征:
1 骨质疏松 (osteoporosis)
2 骨质软化 (osteomalasia)
2 单骨或多骨的发育性畸形,尤其头面部和 四肢,常伴有其他组织器官的畸形
3 骨的重建和代谢转换率多正常 4 临床诊断较容易,但机制不清 5 治疗效果差
代谢性骨病病理学
一、骨病理学和分子骨病理学
(一)传统的骨病理学
(二)近代骨病理学
1分子骨病理学技术协助诊断和鉴别诊断骨 及其附件肿瘤,用于肿瘤的分类、转移、 范围等;
(glycol methacrylate,GMA)
4机制:液态单体,经加速剂、增塑剂(或加热、 紫外线)作用后发生聚合作用,形成与骨组织硬 度相似的无色透明体。
5方法:
⑴固定:梯度乙醇;4%多聚甲醛;4°C
⑵脱水:70%乙醇,48h→95%乙醇,48h→100%异丙
醇,24h,2次→二甲苯24h
4 佝偻病和骨质软化症 5 维生素D不敏感综合症 6 甲状旁腺素不敏感综合症和过敏感综合
症
7 钙受体病综合症 8 地方性氟骨病
遗传性代谢性骨病
1 成骨不全:骨脆弱、骨畸形、蓝色巩膜、 牙齿发育不良、身材矮小;常显或常隐;
2石骨症:良性,常显;恶性,常隐。破骨 细胞功能缺陷,易误诊白血病或骨髓纤维 化。
红色,骨细胞浆黄色,核灰褐色 甲苯胺蓝染色:钙化骨蓝色,类骨质亮蓝色,骨
细胞深蓝色 Van Kossa:钙化骨黑色,类骨质淡紫色,骨细胞
红色
4 酶组织化学染色 酸性磷酸酶染色:着色部位蓝色 碱性磷酸酶染色 5 分子生物学方法 免疫组织化学 原位杂交 流式细胞仪 多聚酶链反应 组织芯片技术
3 骨质硬化 (osteopetrosis)
4 混合性骨病 (mixed bone diseasa)
几个概念:
1 骨构塑(modeling):或称骨塑建或骨漂移。 指骨以不同速度在不同部位出现单方向的 骨形成和骨吸收,并使骨的形态和大小发 生改变的骨生长和塑型现象。
2 骨重建(remodeling):指在骨的同一部位 少量骨质发生的一种循环性代谢过程,是 为了维持骨的相对稳定状态而进行的骨形 成与骨吸收而不改变骨的形态与大小的骨 更新和骨代谢现象。
体质性骨病(constitutional bone disease)
指一类先天性骨的生长、发育异常性疾病, 以骨构塑(bone modeling)受损导致的先天 性骨畸形为特征,一般不伴有或仅有轻度 的骨代谢紊乱。
1 病变是先天性的
2 病变为多发性和系统性
体质性骨病的临床特征:
1 先天性,多数常染色体显性或隐性遗传, 少数X性连锁遗传
2用于疾病的诊断如骨质疏松症、骨质软化 症等,尤其骨组织形态计量学,结合X线、 CT、MRI等方法;
3一般和超微病理形态观察基础上,结合分 子生物学方法,研究细胞尤其骨髓基质细 胞的基因表达变化,确定细胞的表型特征 与功能;
4用于体质性骨病和代谢性骨病的病理学分 型。如椎间盘病变、骨巨细胞瘤的来源等;
朱宪彝1981年阐述的代谢性骨病 1 原发性甲旁亢,纤维性囊性骨炎 2 肾性骨病 3 佝偻病、软骨病 4 骨质疏松 5 Paget 骨病(畸形性骨炎) 6 氟骨病 7 成骨不全(脆骨病) 8 磷酸酶缺乏Βιβλιοθήκη Baidu 9 骨硬化症(石骨病,大理石骨症)
近年来认识的代谢性骨病 1 骨质疏松症 绝经后骨质疏松 老年性骨质疏松 特发性青少年骨质疏松 男性骨质疏松 废用性骨质疏松 2 骨质硬化症 3 甲状旁腺疾病
工作液:42ml A液+1ml B液 ⑷包埋:温度控制和真空控制…… ⑸切片: ⑹脱包埋剂:二甲氧基乙酸乙酯和丙酮….. ⑺染色……
(三)电镜标本的制作 (四)骨磨片的制作 (五)骨切片的染色 1 脱钙骨切片的染色 HE: Masson:成熟骨组织蓝绿色 Mallory:骨组织淡蓝色,骨细胞红色 Van Gieson:骨基质胶原纤维红色,骨细胞淡黄
色,胞核蓝黑色 Gomeri:网状纤维黑色,胶原纤维紫红色,骨组
织灰色
2 骨磨片的染色 银染:骨板黄色,哈佛管、骨陷窝及骨小管黑色 苦味酸-硫堇染色:骨基质黄褐色,骨陷窝和骨小
管暗黑色 结晶紫染色:骨陷窝、骨小管和哈佛管蓝紫色 3 非脱钙骨切片的染色 Goldner-trichrome三色法:骨组织绿色,类骨质
(二)不脱钙骨标本的制作 1用途:骨组织形态计量学;四环素、钙黄绿素
(calcein)的骨代谢动力学研究。 2优势;无明显组织变形,动态参数获取。 3主要试剂: ⑴甲基丙烯酸甲酯
(methyl methacrylate,MMA); ⑵甲基丙烯酸羟乙基酯
(hydroxyethl methacrylate,HEMA); ⑶乙二醇异丁烯酸酯
5病理机制的研究,如骨桥素 (osteopontin,OPN)与异位性骨化;
6组织工程学中的组织兼容和长期存活问题, 评价生物材料的安全性等。
二、骨标本的制作与染色 (一)骨组织标本的制作 1取材 2脱钙骨标本的制作 (1)固定:液体、时间、温度、冲洗 (2)脱钙:酸类脱钙和螯合剂脱钙 (3)脱水:正丁醇或叔丁醇 (4)透明:二甲苯、甲苯、氯仿 (5)浸透与包埋:熟蜡;蜂蜡;火棉胶等; (6)切片:
⑶包埋液配制:
①甲基丙烯酸甲酯:
A液:60ml甲酯+35ml丁酯+5ml苯丙酸甲酯+
1.2ml聚乙二醇400
B液:100mlA液+0.4g干燥过氧化苯甲酰
C液:100mlA液+0.4g干燥过氧化苯甲酰
②甲基丙烯酸羟乙基酯
A液:HEMA80ml+聚乙二醇40012ml+水 8ml+过氧化苯甲酰6g;
代谢性骨病 Metabolic bone disease
定义:指各种原因所致的以骨代谢紊乱为 主要特征的骨疾病。属代谢性疾病的范畴。 以骨重建(bone remodaling)紊乱所致的 骨转换率异常、骨痛、骨畸形和骨折为特 征。依病因和病理特征:
1 骨质疏松 (osteoporosis)
2 骨质软化 (osteomalasia)
2 单骨或多骨的发育性畸形,尤其头面部和 四肢,常伴有其他组织器官的畸形
3 骨的重建和代谢转换率多正常 4 临床诊断较容易,但机制不清 5 治疗效果差
代谢性骨病病理学
一、骨病理学和分子骨病理学
(一)传统的骨病理学
(二)近代骨病理学
1分子骨病理学技术协助诊断和鉴别诊断骨 及其附件肿瘤,用于肿瘤的分类、转移、 范围等;
(glycol methacrylate,GMA)
4机制:液态单体,经加速剂、增塑剂(或加热、 紫外线)作用后发生聚合作用,形成与骨组织硬 度相似的无色透明体。
5方法:
⑴固定:梯度乙醇;4%多聚甲醛;4°C
⑵脱水:70%乙醇,48h→95%乙醇,48h→100%异丙
醇,24h,2次→二甲苯24h
4 佝偻病和骨质软化症 5 维生素D不敏感综合症 6 甲状旁腺素不敏感综合症和过敏感综合
症
7 钙受体病综合症 8 地方性氟骨病
遗传性代谢性骨病
1 成骨不全:骨脆弱、骨畸形、蓝色巩膜、 牙齿发育不良、身材矮小;常显或常隐;
2石骨症:良性,常显;恶性,常隐。破骨 细胞功能缺陷,易误诊白血病或骨髓纤维 化。
红色,骨细胞浆黄色,核灰褐色 甲苯胺蓝染色:钙化骨蓝色,类骨质亮蓝色,骨
细胞深蓝色 Van Kossa:钙化骨黑色,类骨质淡紫色,骨细胞
红色
4 酶组织化学染色 酸性磷酸酶染色:着色部位蓝色 碱性磷酸酶染色 5 分子生物学方法 免疫组织化学 原位杂交 流式细胞仪 多聚酶链反应 组织芯片技术
3 骨质硬化 (osteopetrosis)
4 混合性骨病 (mixed bone diseasa)
几个概念:
1 骨构塑(modeling):或称骨塑建或骨漂移。 指骨以不同速度在不同部位出现单方向的 骨形成和骨吸收,并使骨的形态和大小发 生改变的骨生长和塑型现象。
2 骨重建(remodeling):指在骨的同一部位 少量骨质发生的一种循环性代谢过程,是 为了维持骨的相对稳定状态而进行的骨形 成与骨吸收而不改变骨的形态与大小的骨 更新和骨代谢现象。
体质性骨病(constitutional bone disease)
指一类先天性骨的生长、发育异常性疾病, 以骨构塑(bone modeling)受损导致的先天 性骨畸形为特征,一般不伴有或仅有轻度 的骨代谢紊乱。
1 病变是先天性的
2 病变为多发性和系统性
体质性骨病的临床特征:
1 先天性,多数常染色体显性或隐性遗传, 少数X性连锁遗传
2用于疾病的诊断如骨质疏松症、骨质软化 症等,尤其骨组织形态计量学,结合X线、 CT、MRI等方法;
3一般和超微病理形态观察基础上,结合分 子生物学方法,研究细胞尤其骨髓基质细 胞的基因表达变化,确定细胞的表型特征 与功能;
4用于体质性骨病和代谢性骨病的病理学分 型。如椎间盘病变、骨巨细胞瘤的来源等;
朱宪彝1981年阐述的代谢性骨病 1 原发性甲旁亢,纤维性囊性骨炎 2 肾性骨病 3 佝偻病、软骨病 4 骨质疏松 5 Paget 骨病(畸形性骨炎) 6 氟骨病 7 成骨不全(脆骨病) 8 磷酸酶缺乏Βιβλιοθήκη Baidu 9 骨硬化症(石骨病,大理石骨症)
近年来认识的代谢性骨病 1 骨质疏松症 绝经后骨质疏松 老年性骨质疏松 特发性青少年骨质疏松 男性骨质疏松 废用性骨质疏松 2 骨质硬化症 3 甲状旁腺疾病