酶学分析方法及酶活性测定复习与练习
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
酶学分析方法及酶活性测定复习与练习
复习和练习1。酶的基本理论知识
1。酶浓度和酶反应速度之间有什么关系?
2、底物浓度和酶促反应速率之间的定量关系是什么?3.影响酶促反应速度的主要因素是什么?
4、Km和Vm的意义及其在临床酶活性测定中的应用和意义二、酶活测定的基本知识
1,酶活的概念以及如何表达酶活的单位
2,目前酶活的单位有-?3.解释酶活性的国际单位和卡达尔的概念,并比较它们之间的关系?4.酶活单位的计算:几种类型的计算公式需要理解和熟练的应用。1)通用公式
2)常用单位的计算公式(确定产品生成类别的计算公式;用于确定底物消耗的计算公式)3)**连续监测方法根据摩尔吸收率计算酶活性浓度;
**连续监测法(全自动生化仪通常用k表示)f因子值的计算及应用?
三、酶活的测定方法
1,酶活测定的基本原则是什么?
2,酶反应时间过程曲线有三个周期-,-,-
酶活性测定是在-周期内,这个周期的反应速度不受-连续监测法的影响-
4分为-直接法有哪些类型?
5,什么是酶偶联反应?写下酶偶联反应的基本模式?要测试的酶是
什么,辅助酶和指示酶?6.什么是工具酶?当酶在临床生化试验中用作工具时,哪两种指标系统通常可用于酶活性测定或代谢物浓度(底物)测定?什么是-Trinder反应?Trinder反应的主要缺点或影响因素是什么?
7,什么是同工酶?同工酶分析的共同原则是什么?同工酶检测的临床意义是什么?举个例子?
8,酶活性的测定条件和影响因素是什么?
9,从几种酶活性测定(如AMY、ALT、LD、ALP|)的实验操作,讨论了酶活性测定中应注意的问题。
10。影响血清酶的生理变化是什么?
11、酶活性测定、样品采集、处理、储存和样品试剂的比例有什么要求?四.体液酶的测定:
1。临床诊断中常用的血浆酶是什么?用于帮助诊断心肌损伤、肝病、胰腺疾病、骨骼肌、前列腺疾病等的常用血清酶是什么?常用的临床诊断酶谱是什么?2.分析和总结测定血清酶活性的方法学原理,并请总结有哪些主要反应基础3.写出AMS和ALP(化学比色法,连续监测法)和ALT、AST、GGT、LDH和CK酶测定法(连续监测法)的反应原理、主要试剂成分和功能?影响结果准确性的因素有哪些?评价低密度脂蛋白反应和
低密度脂蛋白反应试剂盒的优缺点?
4、血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶、GGT、AMS、CK、LD等酶测定的临床意义?
5,选择题:
A 1,K m指
A底物浓度b酶浓度c活化剂浓度
D温度e抑制剂浓度
D 2。根据1976年国际生化学会生化委员会的规定,酶的国际单位是指酶量b的最佳条件,它在
A的最佳条件下催化每小时生产1摩尔/升的产物。在每分钟催化生成1摩尔/升产物的酶量C、每小时催化生成1摩尔/升产物的酶量
D、每分钟催化生成1摩尔底物的酶量
E 25℃等最佳条件下,每分钟催化1摩尔底物变化所需的酶量E 3,IFCC推荐方法测定AST的辅助酶为
aG6 pdbhkcpod dldhdeh
| 以NAD(P)或NAD(P)H为指示剂体系测定酶活性的主波长应设定为:a293 Nm B 340Nm C 405Nm D 380Nm E 500Nm
D5,基于NAD还原为NADH反应的生化分析。采用的波长和吸光度变化为:a,340 nm a降低b,405 nm a升高c,500 nm a降低d,340 nm a升高
e,405 nm a降低
A 6,淀粉酶测定值的显著升高主要见于
A、溃疡穿孔b、急性胰腺炎c、甲状腺功能亢进d、糖尿病e、肾病
综合征
C 7、正常成人血清中乳酸脱氢酶同工酶电泳带的结果应与
LD1 > LD2 > LD3 > LD4 > LD5B ld1ld 5d LD3 > LD1 > LD2 > LD4 > LD5E LD4 > LD1 > LD2 > LD3 > LD5
b8一致,IFCC推荐的测定缓冲液
的方法乙二胺四乙酸三甘氨酸二乙醇胺 C 9酶促反应最佳底物浓度的测定原则:
A1 Km B2 Km C10 ~ 20Km D100K E越大B 10越好,前列腺疾病最敏感的指标是:
a碱性磷酸酶B酸性磷酸酶D D D D Amy e ast
|在199C 11全自动生化分析仪测定酶活时,通常计算K值的主要原因是
A便于B准确,C无标准物质,测定
D 12和GPT时D酶校准品不准确。底物液体中α酮戊二酸的量比丙氨酸的量少近100倍的原因是,当
A阻止酶促反应时,丙酮酸产生的过量B确保酶具有足够的底物
C以防止底物中的酸碱度低于7.4 D。它减少了α酮戊二酸和2.4二硝基苯肼之间的显色反应。过量的E α酮戊二酸可激活酶
D 13的活性。在AST测定试剂(速率法)中,不含
A天冬氨酸B NADHα-酮戊二酸D丙氨酸E Tris缓冲液C 14,最后一个附加酶在酶联反应中被称为
A偶联酶B辅酶C指示剂酶D工具酶E同工酶
D 15,碱性磷酸酶测定(King法)其底物为
铁氰化钾B苯酚血清alt测定,干扰物用抛物线标准曲线表示是丙酮酸B 2.4-二硝基苯肼c谷氨酸d a-酮戊二酸e 2.4-二硝基苯腙B 17,alt测定(r-f)终止酶促反应是
a0.4 mol/l氢氧化钠2.4二硝基苯肼c a-酮戊二酸2.4二硝基苯腙d磷酸盐缓冲液e碳酸盐缓冲液
A 18,血清ALT测定(r-f法),以下哪种情况会导致结果偏低:A用于使标准曲线恶化的丙酮酸钠
b样品严重溶血c对照管未发现混浊d水浴温度过高(高达50℃),
e血清与基质混合后未及时放入37℃水浴中保温A 19,100单位酶量等于
a6iu d 278 iu b 27.8 iu e 1667 iu c 166.7 iu
e20,根据米氏方程,什么不符合[S]和Km的关系是
a当[S]> Km时,反应速度与底物浓度无关。当[s] E,丙氨酸+α酮戊二酸→丙氨酸+谷氨酸B天门冬氨酸+α酮戊二酸→草酸+谷氨酸
C肌酸+三磷酸腺苷→磷酸肌酸+二磷酸丙酮酸+NADH →乳酸+NAD E草酸+NADH →苹果酸+NAD B 21,AST催化反应D时,V = VM/2d 的测量单位是相同的
E CK催化反应
a磷酸二钠B铁氰化钾C4-AAPdp酚