动物实验基本方法

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饮食的限制 实验用动物原则上要求随时饮食，如果一些实验需要动物限制食 物或水的摄入量，应保证动物存活所需要的最低需求量。根据研究的 目的，食物的限量应经过科学的论证，其限量的标准应容易操作，如 正常摄入量的百分比或动物体重的百分比。对于水分的限量摄入，一 定要防止动物发生脱水现象，并要保持动物的膳食平衡。
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物理限制的主要原则和要求包括： 限制的工具不能作为常规的饲养工具。 工具的设计应合理，不要仅考虑实验的便利，主要考虑尽量减少动物 的不适，避免伤害。 尽量减少限制的时间，以达到实验目的为基准。 在限制过程中，如果发生损伤或严重的行为改变，应暂停或禁止限制， 并给予处理或治疗。 保证实验人员和周围人员的安全。
首先戴好防护 手套
用右手拇指和 食指抓住大鼠 尾巴中部将大 鼠提起，放在 大鼠饲养盒的 面罩上。
左手顺势按、 卡在大鼠躯干 背部，稍加压 力向头颈部滑 行。
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•豚鼠的捉持
先用左手轻轻 扣、按住豚鼠 背部。
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5、严格按程序实施实验后动物的处理，包括麻醉、止痛、 实验后的护理或用麻醉方法处死。 6、实验过程中要求保证实验动物的良好生活条件，包括 饲养环境、符合需求的饲料及细心的护理等。 7、研究人员和实验动物操作人员应接受实验动物的基本 知识和操作技能等方面的培训。 8、使用过程中要求保证周围环境和实验人员的安全。
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废弃物和尸体处理 1．动物尸体的处理 安乐处死后的动物尸体，取材完毕后，经121℃ 30min高压灭菌 处理后，集中送环保部门处理。动物生物安全三级（animal biosafety level 3, ABSL-3）实验室及以上级的实验室的感染动物 尸体需经室内和双扉两道高压灭菌，才能移出实验室。
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普通级动物：不携带主要人畜共患病病原和动物烈性传染 病的病原。
清洁级动物：除普通动物应排除的病原外，不携带对动物
危害大和对科学研究干扰大的病原。
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无特定病原体动物：除清洁级动物应排除的病原外，不携 带主要潜在感染或条件致病和对科学实验干扰大的病原。
用左手拇指和 食指迅速、准 确地捏住小鼠 的两耳后及颈 背部的皮肤， 将小鼠提起。
翻转左手掌， 以左手掌心和 中指夹小鼠背 部的皮肤，使 小鼠整个呈一 条直线。
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•大鼠的捉持
以左手拇指和 食指捏住大鼠 两耳后部的头 颈皮肤，其余 三指和手掌握 住大鼠背部皮 肤，完成抓取 固定。
无菌动物：无可检出的一切生命体。
实验动物的护理和使用原则
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1、实验动物的饲养和使用应遵守国家有关的法律和规定。 2、应明确使用实验动物的理由和目的。 3、明确实验所使用动物的种类和数量，动物的数量应满 足统计学的要求。 4、完善操作规程，避免或减轻因实验对动物造成的不适 和痛苦。包括使用适当的镇静、镇痛或麻醉方法；禁止不 必要的重复。
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手术操作 有些实验需要对动物进行手术，即打开或刺穿动物的身体，对动物的物 理或生理机能产生较大的损害，同时，实验人员也容易被血液/体液污 染或被器械、针头刺伤，存在潜在生物污染的威胁，因此必须做到： 操作一定要使用适当的镇静、镇痛或麻醉方法。 禁止不必要的重复操作。 不提倡利用一个动物进行多个手术实验，但是，为充分利用动物资源， 经动物伦理委员会许可，在可能的条件下可以实施。 严格实验操作规程，防止发生血液/体液外溅和针刺伤，避免生物污染。 手术后的动物、标本以及所用器具材料等必须按规定程序妥善处置。
动物实验技术
万筱荣
实验动物基本概念
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实验动物定义：经人工培育和人工改造,对其携带的微生物和寄生虫 实行控制、遗传背景明确或者来源清楚，而用于科学研究、教学、生 物制品或药品生产、鉴定以及其它科学实验的动物
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实验动物分类 按遗传学分类：近交系、封闭群、杂交群。 按微生物学分类：普通级动物、清洁级动物、无特定病原体动物、无 菌动物
2. 动物咽拭子的处理
用于病原分离和PCR检测的咽拭子，按照各自的要求处理后，进 行病毒分离和PCR检测，剩余的标本经121℃，30min高压消毒处理。 3. 病原分离培养物的处理 病原分离的培养物，不论是阳性还是阴性结果，均需经121℃， 30min高压消毒处理。
选择实验动物基本原则
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实验过程的行为规范
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1、物理限制 2、手术操作 3、饮食的限制 4、废弃物和尸体处理
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物理限制： 是指在实验过程中（包括检查、收集标本、给药、治疗或实验操 作等），用手或工具限制动物活动的过程。根据实验内容不同，限制 时间有差异，但要求尽量缩短限制时间。有些动物，如狗和灵长类动 物可以通过简单的训练达到目的.
实验动物的抓取、保定与给药 实验动物的采血 实验动物的编号和分组 实验动物的麻醉
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小鼠
大鼠
一、抓取、保 定与给药
豚鼠
家兔
犬
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•小鼠的捉持
用左手拇指和 食指迅速、准 确地捏住小鼠 的两耳后及颈 背部的皮肤， 将小鼠提起。
1、用右手拇指 和食指捏住小鼠 尾巴中部将小鼠 提起，放在饲养 合的面罩上。
尽量选择研究对象的功能、代谢、结构及疾病与人类相似的动物； 解剖、生理特点符合实验目的要求； 实验动物不同品种品系的特点； 选择标准化实验动物； 符合实验动物选择的一般原则；
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经济性原则；
要考虑到动物实验结果的外推； 注意有关国际规范。
动物实验基本技术
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