布鲁氏菌病实验室诊断研究进展

乳 酸缓 冲液 中制 成 。Ｒ Ｔ 特异 、 Ｂ 敏感 、 廉 、 作简 价 操 便 ， 国际 贸易 中 ， 冲布 鲁 氏菌抗原 试 验是 牛 、 、 在 缓 羊 猪 种布 鲁 氏菌病 的指定 试 验 。在 我 国 ， Ｔ 也 用 于 ＲＢ 人 布鲁 氏菌病 的监 测 的初 筛 试 验 。乳 牛 ＭＲ Ｔ依 然 是 乳牛 布鲁 氏菌病 监测 的 主要方 法 。 由于凝集 性试 验是 基 于检 测针 对布 鲁 氏菌 多糖 Ｏ 链 的抗 体 ， 一 因此 会 与有类 似多 糖 Ｏ 链 的细菌 如耶 尔森 氏 菌 Ｏ ： 一 ９等
中 国 人 兽 共 患 病 学 报
Ｃｈｉ ｓ ｏｕ ｎａ ｆ Ｚｏ ｏ ｅ ｎｅ ｅ Ｊ ｒ ｌ ｏ ｏｎ ｓ ｓ ８１
文 章 编 号 ：０ ２ ６４ ２ １ ） １ ０ １ ３ １０ —２ ９ （Ｏ ０ ０ —０ ８ —０
布 鲁 氏菌病实验 室诊断研究进展
高明华 ， 张志琰 ， 李
来 源主要 是患 布鲁 氏菌 病 的羊 ， 次是 牛 及 其 它 动 其 物 。因此 加强对 动 物布鲁 氏 菌病 的检疫 监测 力度 十 分重 要 。本文就 布鲁 氏菌 病 实验室 诊 断方法 研究 进
展作 一综述 。 １ 免疫 学诊 断技 术
Hale Waihona Puke Baidu
１ １ 血 清凝集 性试 验 布 鲁 氏 菌病 传 统 检 测 方 法 ． 有血 清凝集 试验 、 乳环状 试 验 （ 全 ＭＲＴ） 和抗 人 免 疫 球 蛋 白试 验 （ ｏ ｍｂ ｓ 等 。经典血 清凝 集试 验包 括 Ｃ ｏ ’） 标准 试管 凝 集 试 验 （ ＡＴ） 平 板 凝 集 试 验 （ ＡＴ） Ｓ 和 Ｐ 等在发 达 国家 已基 本 上停 止 使 用 ， 代 方 法 是缓 冲 取
１３ 酶联 免疫 吸 附试 验 （ Ｌ Ｓ Ｅ ＩＡ 是一 种 ． Ｅ ＩＡ） ＬＳ
与 Ｃ Ｔ 效果 相 当的方 法 ， 作 更 方便 ， 可 以作 为 Ｆ 操 既 确定 检测 ， 又可 以作 为 筛选 和鉴 别 用 。但 只有 用 于 牛布鲁 氏菌 病 的 Ｅ Ｉ Ａ 是 国 际 贸 易 指 定 的 ， 种 ＬＳ 这 Ｅ Ｉ Ａ 方法不 仅用 于血 清 学诊 断 ， 可用 于乳 汁 检 ＬＳ 还 查 。用于其 他 种 布 鲁 氏 菌病 检测 的 Ｅ １ Ａ 方 法 ＬＳ 也 是研 究 的热 点 。Ｆ ｌ ｓ ｅｏ ａ等。 应 用 鼠抗 流 产 ｅｄ ｈ ｒｖ 布 鲁 氏菌脂 多糖 （ Ｐ ） Ｌ Ｓ 的单克 隆 抗 体建 立 了用 于 牛 种 布鲁 氏菌 、 羊种 布 鲁 氏 菌 和猪 种 布 鲁 氏菌 鉴 定 的 Ｅ ＩＡ， Ｌ Ｓ 该法具 有 高度 的特 异性 和敏感 性 ， 时不 与 同
小 肠结 肠炎 耶尔 森 氏菌 Ｏ ：３ Ｏ ：９及 鼠伤 寒 沙 门 、
报告 ，０ ５ ０ ８年 全 国布鲁 氏菌 病新 发 病 人 分别 ２ ０ —２ ０ 为 １ １ 、９０ ３ ２ ０ 、００ ２例 ， 布鲁 氏 菌病 ８４ ６ １ １ 、１９ １ ３ ０ 人
发 生严重 ， 形势 十 分严 峻 。流行病 学调 查表 明 ， 染 感
感染 的羊 和犬 种 布鲁 氏 菌感 染 的犬 血 清 中 Ｒ 型抗 体进 行 检 测表 明 ， １ ５Ｃ Ｔ 与 ＲＢ １Ｃ Ｔ 和 ＨＳ Ｂ １一 Ｆ Ｓ一 Ｆ Ｅ
宿 主特异性 ， 布鲁 氏菌 分 为 ６个 种 １ 将 ９个 生 物 型 ， 即羊种 布 鲁 氏 菌 （ ． ｌ ｎｉ） 牛 种 布鲁 氏 菌 （ ． Ｂ ｍｅｔ ｓｓ 、 ｅ Ｂ ａ ｏｔｓ 、 种布 鲁 氏菌 （ ｂｒｕ ） 猪 Ｂ．ｓｉ） 绵 羊 附睾 种 布鲁 ｕｓ 、 氏菌 （ ｏ ｉ） 犬 种 布 鲁 氏菌 （ Ｂ．ｖｓ 、 Ｂ．ｃ ｎｓ ａ ｉ）和沙 林 鼠 种布鲁 氏菌 （ ．ｎｏｏ ｅ 。另外 ， 海 洋动 物 中分 Ｂ ｅｔｍａ ） 从 离到在致 病性 和分 子特 征上 有别 于前 ６种 的布 鲁 氏
中 图 分 类 号 ： ５１ Ｒ ６７ 文 献 标 识 码 ： Ａ
跃， 邓庆 华 ， 诺
敏
布 鲁 氏 菌病 （ ｒ ｃｌ ｓ ） 由布 鲁 氏 菌 （ ｕ Ｂ ｕｅｌ ｉ 是 ｏｓ Ｂｒ — ｃｌ ） ｅｌ 引起 的 一 种重 要 人 兽 共 患病 。根 据致 病 性 和 ａ
过对 Ｒ ５ Ｂ １免 疫 的牛 和 水 牛 、 羊 附 睾 种 布鲁 氏菌 绵
浓 度可 达 ０ ０ ～０ １ｎ ／ ． ５ ． ｇ ｍＬ。Ｎｉ ｓ ｎ等 应 用抗 ｅｅ ｌ 牛种 布 鲁 氏菌 Ｓ １ ９ ３株 ＳＬ Ｓ的 Ｏ 糖链 （ Ｓ １１． —Ｐ ＯＰ ）
共 同抗原 表位 且 不 与 蛋 白 Ａ／ 结 合 的 特 异 性单 克 Ｇ
隆抗 体建 立 了第 二代 竞 争 Ｅ Ｉ Ａ （ Ｅ ＩＡ） 该方 ＬＳ Ｃ ＬＳ ， 法通 过单 克 隆抗体 与牛 被检 血清 中 的抗体 与 Ｓ Ｌ Ｓ —Ｐ 的竞 争结 合 ， 用酶 标蛋 白 Ａ／ Ｇ显 色来 进行 检测 。方 法特 异 、 敏感 ， 并能 区分 牛种 布鲁 氏菌 Ｓ ９疫苗 株免 １
布鲁 氏 菌 抗 原 试 验 ， 虎 红 平 板 凝 集 试 验 （ Ｂ 如 Ｒ Ｔ） 等 。虎 红平 板凝 集抗 原是 用抗原 性 良好 的布鲁 氏菌 株经培 养 、 活 、 心后 用 虎 红 染 色 液 染色 ， 浮 于 灭 离 悬
氏菌和 土拉 热弗 朗西斯 氏菌反应 。检测抗 原 的最低
菌， 定为 海洋种 布鲁 氏菌 （ Ｂ．ｍａ ｌ） ｒｓ 。据 中 国 Ｃ Ｃ Ｄ
（ 布鲁 氏菌 热 盐 抽 提 物 ）Ｃ Ｔ相 比， 有 很 高 的敏 一Ｆ 具 感性 和特 异性 。由于猪 的补 体会 干扰 豚 鼠补体 的作 用 ， 致 实验 的敏 感 性 降 低 ３ ％～ ４ ， 导 ８ ０ 因而 Ｃ Ｔ Ｆ 不适 合猪 种布 鲁 氏菌病 的检 测 。