石墨炉原子吸收光谱测定人血中铅的含量
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当生活或生产环境不变，铅暴露基本稳定的情况下， 血铅不仅反映了近期的铅接触水平，也一定程度上作 为内暴露水平反映体内的铅负荷
采样方便、不易污染、灵敏度高，血铅常被用于反映 铅对人体危害的指标
实验器材与试剂
仪器：原子吸收分光光度计（有石墨炉原子化 器和背景校正装置）； 铅空心阴极灯；
器材：15ml、1.5 ml 离wk.baidu.com管；肝素钠抗凝真空采血管 烧杯、100ml容量瓶、移液管、胶头滴管、移 液枪（1ml及200ul)及枪头
组2：基体改进剂2 基体改进剂2作为溶剂的血铅标准液及被测血样的稀释
注：每组2份被测血样，分别来自不同的受检个体
实验结果全班共享，两组对实验结果进行整合及比较，完成结果讨 论及分析
实验报告
实验目的
实验方法：简单叙述操作步骤
实验结果 1.绘制标准曲线，计算样品含铅浓度； 2.根据国家职业卫生标准对被测者血铅浓度进行初步评
合标准曲线； 3.对样品进行检测，将吸光度值与标准曲线进
行比对，得出血液检测液浓度。
实验方法与步骤
序号
1 2 3 4 5 6 7信
号 8收 9集 10
操作步骤
干燥1 干燥2 干燥3 灰化1 灰化2 灰化3 原子化 原子化 清除 清除
温度 （°C）
60 90 120 350 650 650
2000
读 2000 数 2600
分别用基体改进剂1、基体改进剂2配置两组血铅的标准溶液， 浓度分别为0，10，,20，40，80，μg/L
Pb标准溶液浓度 （μg/L）
0
10
20
40
80
血液（μl）
100
100
100
100
100
Pb标准应用液I（μl）
0
0
0
40
80
Pb标准应用液II（μl）
0
100
200
0
0
基体改进剂 （μl）
900
800
700
860
820
实验方法与步骤
（二）被测样品制备 1.采用肝素钠抗凝真空采血管采集被测血样，混
匀后保存于4°C冰箱；
2.吸取100 μl血样分别加两种基体改进剂，稀释至 1ml，充分混匀，配成血液检测样，分别储存于 1.5 ml 离心管中备用。
实验方法与步骤
（三）样品检测
1.选定被检测元素，设置检测条件及参数； 2.对血铅标准液进行测定，得出吸光度值并拟
释至1ml，充分混匀，配成血液检测 样，分别储存于1.5 ml 离心管中备
基体改进剂 900 800 700
860
820
用
（μl）
谢
谢！
上样前需将样品充分混匀，减少测量误差
实验方法与步骤
结果分析 1.绘制血铅的标准曲线，得出标准方程式
2.样品的吸光度值减去试剂空白的吸光度值，由 标准曲线算得的浓度即为稀释血样中的铅浓度 c0（μg/L）。
3.血样中铅的浓度：c= c0 * s
注意事项
所有实验使用的器皿都用20%硝酸浸泡48h，然后依次用 去离子水和高纯水冲洗，晾干备用；
石墨炉原子吸收法----血铅
基本步骤：
干燥
灰化
氩气 （保护、清除 基体蒸汽及杂质）
原子化 （收集信号）
调整气流量、温度、持续时间对试验条件进行优化
石墨炉原子吸收法----血铅
基体改进剂 作用：保护被测物质
消除基体干扰 血铅：Triton X-100 、磷酸二氢铵
意义及应用
血液中95%的铅在红细胞中，其浓度与机体铅吸收、 分布、排出处于平衡状态
2600
持续时间 (s) 1.0 40 10 0.2 10 5.0
0.9
3.0 0.3 5.0
气体流量 (L/min)
0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.0
0.0
0.0 0.3 0.3
样品检测
注意： 样品检测前，清洗清洁池及进样管；
进样程序开始前，先对石墨管进行空烧，排除 上次检测的余样，减少干扰；
价及诊断；若要确诊，还需哪些资料的补充？ 3.讨论：加入基体改进剂对血铅的测定有什么影响？
实验试剂的配制
基体改进剂
血铅标准品配制
基体改进剂1
Pb标准溶液 0 10 20 40 80
100 ml溶液含0.1% Triton X-100 （WS/T 20-1996），0.1% 硝酸
浓度 （μg/L）
实验方法与步骤
基体改进剂 基体改进剂1
100 ml溶液含0.1% Triton X-100（WS/T 201996），0.1% 硝酸 基体改进剂2 100 ml溶液含0.2%磷酸二氢铵，0.3% Triton X-100，0.1% 硝酸
实验方法与步骤
血铅标准液配制（基体改进剂---血液---Pb标准液）
石墨炉原子吸收法----血铅
基本原理：
血液经硝酸处理后进入石墨炉原子化器中进行原子 化，被测元素（Pb）形成基态原子蒸气；
铅空心阴极灯辐射出的特征谱线283.3 nm通被基态原 子态吸收，生成相应吸光度值；
在一定实验条件下，其吸光度与试样中的铅浓度成正 比，据此进行血液中铅的定量分析。
试剂：血样；铅标准储备液（1.00 mg/ml）， 硝酸（G.R）；Triton X-100（G.R）； 磷酸二氢铵溶液（A.R）；高纯水。
实验方法与步骤
（一）溶液配制
铅标准应用液、基体改进剂、血铅标准液
实验方法与步骤
铅标准应用液配制（已配好）
1.00 mg/ml的铅标准储备液用1%的硝酸稀释为： 1 mg/L Pb标准应用液I， 0.1 mg/L的Pb标准应用液II。
血样采集、运输、保存及配置过程中也应避免铅污染；
操作时，避免实验器皿触碰到皮肤及桌面，以防止外源的 铅污染，影响实验结果；
正确使用移液枪，精准加样；
如果血样含铅量超出标准曲线的测定范围，可增加稀释倍 数。
实验分组及分工
全班分两个组（12人/组） 组1：基体改进剂1
基体改进剂1作为溶剂的血铅标准液及被测血样的稀释
基体改进剂2
100 ml溶液含0.2%磷酸二氢铵，0.3% 血液（μl） 100 100 100 100 100
Triton X-100，0.1% 硝酸
Pb标准应用 0 0 0 40 80
液I（μl）
检测样品配制
Pb标准应用 0 100 200 0 0
吸取100 μl血样加入基体改进剂，稀
液II（μl）
采样方便、不易污染、灵敏度高，血铅常被用于反映 铅对人体危害的指标
实验器材与试剂
仪器：原子吸收分光光度计（有石墨炉原子化 器和背景校正装置）； 铅空心阴极灯；
器材：15ml、1.5 ml 离wk.baidu.com管；肝素钠抗凝真空采血管 烧杯、100ml容量瓶、移液管、胶头滴管、移 液枪（1ml及200ul)及枪头
组2：基体改进剂2 基体改进剂2作为溶剂的血铅标准液及被测血样的稀释
注：每组2份被测血样，分别来自不同的受检个体
实验结果全班共享，两组对实验结果进行整合及比较，完成结果讨 论及分析
实验报告
实验目的
实验方法：简单叙述操作步骤
实验结果 1.绘制标准曲线，计算样品含铅浓度； 2.根据国家职业卫生标准对被测者血铅浓度进行初步评
合标准曲线； 3.对样品进行检测，将吸光度值与标准曲线进
行比对，得出血液检测液浓度。
实验方法与步骤
序号
1 2 3 4 5 6 7信
号 8收 9集 10
操作步骤
干燥1 干燥2 干燥3 灰化1 灰化2 灰化3 原子化 原子化 清除 清除
温度 （°C）
60 90 120 350 650 650
2000
读 2000 数 2600
分别用基体改进剂1、基体改进剂2配置两组血铅的标准溶液， 浓度分别为0，10，,20，40，80，μg/L
Pb标准溶液浓度 （μg/L）
0
10
20
40
80
血液（μl）
100
100
100
100
100
Pb标准应用液I（μl）
0
0
0
40
80
Pb标准应用液II（μl）
0
100
200
0
0
基体改进剂 （μl）
900
800
700
860
820
实验方法与步骤
（二）被测样品制备 1.采用肝素钠抗凝真空采血管采集被测血样，混
匀后保存于4°C冰箱；
2.吸取100 μl血样分别加两种基体改进剂，稀释至 1ml，充分混匀，配成血液检测样，分别储存于 1.5 ml 离心管中备用。
实验方法与步骤
（三）样品检测
1.选定被检测元素，设置检测条件及参数； 2.对血铅标准液进行测定，得出吸光度值并拟
释至1ml，充分混匀，配成血液检测 样，分别储存于1.5 ml 离心管中备
基体改进剂 900 800 700
860
820
用
（μl）
谢
谢！
上样前需将样品充分混匀，减少测量误差
实验方法与步骤
结果分析 1.绘制血铅的标准曲线，得出标准方程式
2.样品的吸光度值减去试剂空白的吸光度值，由 标准曲线算得的浓度即为稀释血样中的铅浓度 c0（μg/L）。
3.血样中铅的浓度：c= c0 * s
注意事项
所有实验使用的器皿都用20%硝酸浸泡48h，然后依次用 去离子水和高纯水冲洗，晾干备用；
石墨炉原子吸收法----血铅
基本步骤：
干燥
灰化
氩气 （保护、清除 基体蒸汽及杂质）
原子化 （收集信号）
调整气流量、温度、持续时间对试验条件进行优化
石墨炉原子吸收法----血铅
基体改进剂 作用：保护被测物质
消除基体干扰 血铅：Triton X-100 、磷酸二氢铵
意义及应用
血液中95%的铅在红细胞中，其浓度与机体铅吸收、 分布、排出处于平衡状态
2600
持续时间 (s) 1.0 40 10 0.2 10 5.0
0.9
3.0 0.3 5.0
气体流量 (L/min)
0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.0
0.0
0.0 0.3 0.3
样品检测
注意： 样品检测前，清洗清洁池及进样管；
进样程序开始前，先对石墨管进行空烧，排除 上次检测的余样，减少干扰；
价及诊断；若要确诊，还需哪些资料的补充？ 3.讨论：加入基体改进剂对血铅的测定有什么影响？
实验试剂的配制
基体改进剂
血铅标准品配制
基体改进剂1
Pb标准溶液 0 10 20 40 80
100 ml溶液含0.1% Triton X-100 （WS/T 20-1996），0.1% 硝酸
浓度 （μg/L）
实验方法与步骤
基体改进剂 基体改进剂1
100 ml溶液含0.1% Triton X-100（WS/T 201996），0.1% 硝酸 基体改进剂2 100 ml溶液含0.2%磷酸二氢铵，0.3% Triton X-100，0.1% 硝酸
实验方法与步骤
血铅标准液配制（基体改进剂---血液---Pb标准液）
石墨炉原子吸收法----血铅
基本原理：
血液经硝酸处理后进入石墨炉原子化器中进行原子 化，被测元素（Pb）形成基态原子蒸气；
铅空心阴极灯辐射出的特征谱线283.3 nm通被基态原 子态吸收，生成相应吸光度值；
在一定实验条件下，其吸光度与试样中的铅浓度成正 比，据此进行血液中铅的定量分析。
试剂：血样；铅标准储备液（1.00 mg/ml）， 硝酸（G.R）；Triton X-100（G.R）； 磷酸二氢铵溶液（A.R）；高纯水。
实验方法与步骤
（一）溶液配制
铅标准应用液、基体改进剂、血铅标准液
实验方法与步骤
铅标准应用液配制（已配好）
1.00 mg/ml的铅标准储备液用1%的硝酸稀释为： 1 mg/L Pb标准应用液I， 0.1 mg/L的Pb标准应用液II。
血样采集、运输、保存及配置过程中也应避免铅污染；
操作时，避免实验器皿触碰到皮肤及桌面，以防止外源的 铅污染，影响实验结果；
正确使用移液枪，精准加样；
如果血样含铅量超出标准曲线的测定范围，可增加稀释倍 数。
实验分组及分工
全班分两个组（12人/组） 组1：基体改进剂1
基体改进剂1作为溶剂的血铅标准液及被测血样的稀释
基体改进剂2
100 ml溶液含0.2%磷酸二氢铵，0.3% 血液（μl） 100 100 100 100 100
Triton X-100，0.1% 硝酸
Pb标准应用 0 0 0 40 80
液I（μl）
检测样品配制
Pb标准应用 0 100 200 0 0
吸取100 μl血样加入基体改进剂，稀
液II（μl）