维生素e的检测方法

题目：维生素e的检测方法学院：食品与生物工程学院专业：应用化学

班级：化学1401

学号：1410070118

学生姓名：闫文卉

指导教师：张祥

二○一六年十一月

维生素e的检测方法

摘要：维生素e亦称维他命e，是一种脂溶性维生素。其水解产物为生育酚，是最主要的抗氧化剂之一，在食油、水果、蔬菜及粮食中均存在。它溶于脂肪和乙醇等有机溶剂中，不溶于水，对热、酸稳定，对碱不稳定，对氧敏感。维生素e对人体的益处十分大。由于其是脂溶性物质，不溶于水相，因此在检测过程中提取困难，在测定操作上有一定的难度。现存的测定方法之间存在一定的差异，本文采用了气相色谱法和双波长紫外分光光度法具体检测维生素e的含量，并分析其优点与不足。

关键词：维生素e 国标法紫外分光光度法检测

1、引言

维生素E（Vitamin E）是一种脂溶性维生素，其水解产物为生育酚，是最主要的抗氧化剂之一。易溶于脂肪和乙醇等有机溶剂中，不溶于水，对热、酸稳定，对碱不稳定，对氧敏感，对热不敏感，但油炸时维生素E活性明显降低。它能延缓衰老，有效减少皱纹的产生；减少细胞耗氧量，使人更有耐久力，有助减轻腿抽筋和手足僵硬的状况；抗氧化保护机体细胞免受自由基的毒害；改善脂质代谢，预防冠心病、动脉硬化；预防癌症、预防多处慢性疾病；预防炎症性皮肤病、脱发症；预防溶血性贫血、保护红血球使之不容易破裂；预防治疗甲状腺疾病，改善血液循环、保护组织、降低胆固醇、预防高血压；维生素E是一种很重要的血管扩张剂和抗凝血剂可预防与治疗静脉曲张；可防止血液的凝固，减少斑纹组织的产生；强化肝细胞膜、保护肺泡细胞，降低肺部及呼吸系统遭受感染的几率；保护皮肤免受紫外线和污染的伤害，减少疤痕与色素的沉积;加速伤口的愈合；促进性激素分泌，使男子精子活力和数量增加，使女子雌性激素浓度增高，提高生育能力，预防流产。近来还发现维生素E可抑制眼睛晶状体内的过氧化脂反应，使末稍血管扩张，改善血液循环，预防近视发生和发展。维生素E在胆酸、胰液和脂肪的存在时，在脂酶的作用下以混合微粒，在小肠上部经非饱和的被动弥散方式被肠上皮细胞吸收。各种形式的维生素E被吸收后大多由乳糜微粒携带经淋巴系统到达肝脏。肝脏中的维生素E通过乳糜微粒和极低密度脂蛋白（VLDL）的载体作用进入血浆。乳糜微粒在血循环的分解过程中，将吸收的维生素E转移进入脂蛋白循环，其他的作为乳糜微粒的残骸。α-生育酚的主要氧化产物是α-生育醌，在脱去含氢的醛基生成葡糖醛酸。葡糖醛酸可通过胆汁排泄，或进一步在肾脏中被降解产生α-生育酸从尿酸中排泄。。由于维生素 E 结构复杂，异构体繁多，准确分析测定较困难。近年来许多科学家致力于其分析测定的研究，取得了很大的进展 ,开发了很多实用高效的检测方法。本文着重介绍了气相色谱法和双波长紫外分光光度法具体检测维生素e的含量，并分析其优点与不足。

2、检测方法

2.1 气相色谱法（国标法）

2.1.1 方法原理

气相色谱法是采用气体作为流动相的一种色谱法，既可用于定性分析又可用于定量分析。供试品和内标均制成甲醇溶液，进入气相色谱仪进行色谱分离并检测维生

素E（C

31H

52

O

3

）和内标正三十二烷的吸收值，计算出其含量。

2.1.2 仪器设备及条件

气相色谱仪器

色谱柱：以硅酮（OV-17）为固定相，涂布浓度为2%，或以HP-1毛细管柱（100%二甲基聚硅氧烷）为分析柱；理论塔板数按维生素E峰计算不低于500（填充柱）或5000（毛细管柱），维生素E峰与内标物质峰的分离度应符合要求。

色谱柱和典型色谱条件：柱长30 m，柱内径0.53 mm 或0.32 mm，固定液为100%甲基聚硅氧烷。

柱温：265℃

检测器：氢火焰离子化检测器，温度300℃

进样口：温度290℃；分流进样，分流比1：20；进样量1μL

载气：氮气，流速5 mL/min。

2.1.3 试样配制备

2.1.

3.1 称取供试品

精密称取该品20mg，置棕色具塞瓶中。

2.1.

3.2 对照品溶液的制备

精密称取维生素E对照品和维生素E对照品25mg，置100mL棕色量瓶中，加异辛烷80mL，避免加热，超声处理1分钟使完全溶解，并加异辛烷至刻度，摇匀，冲氮密塞，避光，0℃以下保存。

2.1.

3.3 内标溶液的制备

2.1.

3.4 供试品溶液的制备

上述供试品精密加内标溶液10mL，密塞，振摇使溶解，即得供试品溶液。

2.1.

3.5 校正因子的测定

另取维生素E对照品20mg，精密称定，置棕色具塞中，精密加内标溶液10mL，密塞，振摇使溶解，取1~3μL注入气相色谱仪，计算校正因子。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

2.1.4 测量

分别精密吸取上述供试品溶液与对照品溶液1~3μL 注入气相色谱仪测定、计算，即得。

2.2 双波长紫外分光光度法

2.2.1 方法原理

双波长紫外分光光度法是指在单位时间内有两条波长不同的光束λ1和λ2交替照射同一个溶液,由检测器测出的吸收度是这两个波长下吸收度的差值△A。△A与被测定物质的浓度成正比。维生素 E 结构中含有苯环且具有共轭双键，该体系具有紫外吸收，因此可以利用紫外光谱法测定食品中维生素E的含量。

2.2.2仪器设备

电子天平，紫外可见分光光度仪及配套设备

2.2.3试样配置

供试品溶液：精密称取尿囊素维e乳膏 3.0g（约相当于维生素Ｅ30mg），置烧杯中，加无水乙醇25ml，置水浴上加热，充分搅拌，使维生素e 溶解，置冰浴中放冷后，滤过，滤液置100ml容量瓶中，同法提取3次，滤液并入容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，再精密量取滤液5ml，置25ml容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，作为供试品溶液。阴性对照溶液：精密称取不含维生素e的尿囊素维Ｅ乳膏约3.0g，置烧杯中,按供试品溶液的制备方法制备成阴性对照溶液。

2.2.4测定波长的选择

分别取维生素Ｅ对照品溶液与阴性对照溶液于紫外分光光度计，以无水乙醇作为空白校正，在200~400nm 波长范围扫描，维生素e对照品在285nm波长处有紫外吸收峰，但阴性对照品存在一定的干扰，而对供试品溶液的扫描发现在293nm 波长外

的吸光度值与阴性对照在285nm波长处的吸光度值相等。所以选定λ

１＝285nm，λ

２

＝293nm作为测定波长，即△Ａ＝Ａ

１－Ａ

２

。

2.2.5标准曲线的制备

精密量取维生素e对照品储备液1.0、1.5、2.0、2.5、3.0ml，分别置100ml量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，得浓度为31.96、47.94、63.92、79.9、95.88ug/ml 的维生素e对照品溶液。采用紫外－可见分光光度法在285nm波长处测定Ａ。以Ａ为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

2.2.6测定含量

2.3 荧光光谱法

维生素e分子结构含有苯环且具有相同的共轭双键体系 ,该体系离域电子易激发,因此具有荧光性,因此可根据维生素e的此种特性测定并计算出维生素e的含量。在色谱分离技术没有大规模发展起来之前,荧光法是测定维生素e的主要方法之一。荧光法测定维生素E一般要经过提取、皂化、纯化等提纯处理，除去基质中的干扰物质。

2.4液相色谱法

在食品中维生素E检测的所有方法中，液相色谱法是应用最为广泛的一种检测