免疫凝集试验
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抗球蛋白抗体
抗膜抗原的抗体 结合在红细胞表面
凝集
可用玻片法定性，也可用试管法 半定量分析。
临床应用：
新生儿溶血症、特发性自身免疫 性贫血、自身免疫性溶血症、和医源 性溶血性疾病等的检测。
二、间接Coombs试验
检测血清中的抗红细胞抗体
二、间接Coombs试验
检测血清中游离的不完全抗体 标本中
(slide agglutination test)
+
红细胞血型鉴定
红细胞悬液
B
A
方法评价: 定性试验 简便和快速 敏感度低
临床应用: 菌种鉴定 血清学分型 血型鉴定
二、试管凝集试验
在试管内颗粒性抗原直接与抗体 结合，在电解质的作用下，出现肉 眼可见的凝集现象。
试管凝集试验
免疫血清 1 2 3 10
1：10
阴性对照
………
血清稀释度 1:20 1:40 1:80 步骤：1）加生理盐水 0.5ml
2）依次倍比稀释免疫血清 3）加相同浓度的细菌悬液0.5ml
方法评价： 临床应用：
半定量试验 Widal reaction 简便、快速 Weil-felix reaction 敏感度低 Wright test:布鲁菌病 可有假阳性 交叉配血试验
应用：临床常用于检测抗溶血素0
和类风湿因子等。
（二）明胶颗粒凝集试验 （三）炭颗粒凝集试验 （四）甲苯胺红颗粒凝集试验
第四节 抗球蛋白红细胞免疫凝集试验
(antiglobulin test)
抗球蛋白试验 又称Coombs试
验
一、直接Coombs试验
检测红细胞上抗体 不完全抗体
一、直接Coombs试验
不完全抗体 抗球蛋白抗体
具有特异抗原的红细胞
凝集
临床应用：
1.检测母体Rh(D)抗体，以便尽早 发现和避免新生儿溶血症发生。 2.输血前交叉配血或不相容输血后 抗体检测。
第五节 自身红细胞凝集试验
与一般间接免疫血凝试验不同之处 在于反应中的红细胞是未经致敏的 受检者新鲜红细胞。
第六节 免疫凝集试验的临床应用 一、直接免疫凝集试验的临床应用 1、玻片凝集试验:定性检测，如细菌菌 种鉴定及分型、ABO血型鉴定等 2、试管凝集试验:半定量检测，如辅助 诊断伤寒、副伤寒的肥达试验等。
二、间接免疫血凝试验
二、间接免疫血凝试验
（一）载体： 是以红细胞作为载体的间接免 疫凝集试验。
常用的载体有：绵羊、家兔、鸡红细胞和O型人 红细胞 。
（二）致敏
蛋白质致敏红细胞的方法有：
直接法和间接法。
（三）血凝试验 微量滴定板或试管
标本倍比稀释（1：64）1滴 +
0.5%致敏红细胞悬液1滴
充分混匀
第六节 免疫凝集试验的临床应用
二、间接免疫凝集试验的临床应用 （一）抗原的检测 病原体可溶性抗原、各种蛋白质检测 （二）抗体的检测 检测细菌、病毒等产生的抗体、自身 免疫病抗体、超敏反应抗体等
第七节 临床常用免疫凝集试验试剂方法特点
一、诊断菌液 二、载体颗粒 红细胞、胶乳、炭粉粒子 三、其他
第八节 影响免疫凝集试验的主要因素
第一节 免疫凝集试验的基本原理
分两个阶段： ①抗原抗体的特异性结Байду номын сангаас阶段 ②出现肉眼可见的凝集现象
可见反应形成
第二节 直接免疫凝集试验
直接凝集反应(direct agglutination)细菌、 螺旋体、红细胞等颗粒性抗原，在适当电 解质参与下直接与相应抗体结合出现肉眼 可见的凝集现象。
一、玻片凝集试验
抗体
抗原
载体颗粒 抗体致敏颗粒
（三）间接免疫凝集抑制试验 用抗原致敏载体--检测抗原
（三）间接免疫凝集抑制试验
+ 说明标本中不存在相应抗原
— 说明标本中含有相应抗原
抗原
抗原致敏颗粒
A 抗体
无抗原 B 抗体
抗原抗体 复合物 抗原致敏颗粒
游离抗体
不凝集 凝集
结果判定
试验结果+(凝集)--(不凝集)
教学目的
掌握：直接凝集反应和间接凝集反应的试 验原理、类型；抗球蛋白参与的试验原理
熟悉：凝集反应的特点、应用
第一节 免疫凝集试验的基本原理
凝集反应(agglutination reaction)
是指细菌和红细胞等颗粒性抗原或表 面包被可溶性抗原（或抗体）的颗粒性载 体与相应抗体（或抗原）发生特异性结合 后，在适当电解质存在下，出现肉眼可见 的凝集现象。
（一）正向间接免疫凝集试验
抗原致敏载体--检测抗体
（一）正向间接免疫凝集试验
特点：简便快速，敏感性和特异性均高， 成本低廉。
应用：伤寒沙门菌的多糖抗原致敏绵羊红 细胞测伤寒抗体。
抗原
抗
体
载体颗粒 抗原致敏颗粒
（二）反向间接免疫凝集试验
用抗体致敏载体----检测抗原
（二）反向间接免疫凝集试验
应用：检测HbsAg、AFP等。 特点：本方法快速、敏感性高、特异性强。
一、抗原因素 二、抗血清因素 三、致敏颗粒试剂 四、血清标本 五、试验条件
小结
凝集反应常用的实验方法： 1、玻片法:定性检测 2、试管法:半定量检测
检测结果 -- +
（四）协同免疫凝集试验
SPA:SPA-IgG Fc; SPA抗体致敏---测抗原 反向间接凝集反应
（四）协同免疫凝集试验
载体：金黄色葡萄球菌。
优点：特异、灵敏、简便、快速。 应用：可用于细菌、病毒、毒素及各种可 溶性抗原的快 速检测。
协同凝集试验
13
载体种类：
常用的载体有动物或人红细胞、 聚苯乙烯胶乳颗粒、明胶颗粒和 活性炭等。
室温12h
血凝反应强度示意图
二、间接免疫血凝试验
载体：红细胞 优点：红细胞来源广，价格低。
该试验为最经典的抗原抗体反 应之一。 应用：常用于测定抗核抗体、类风湿 因子等。
三、颗粒免疫凝集试验 （一）胶乳颗粒凝集试验
（一）胶乳颗粒凝集试验 载体：聚苯乙烯胶乳 优点：性能稳定，均一性好。 缺点：敏感度不及血凝试验。
第三节 间接免疫凝集试验
间接免疫凝集试验(indirect agglutination) 将可溶性抗原或抗体吸附于颗粒性载体表
面，然后与相应的抗体或抗原反应，在电解 质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象。
一、间接免疫凝集试验的类型
正向间接免疫凝集试验 反向间接免疫凝集试验 间接免疫凝集抑制试验 协同免疫凝集试验
抗膜抗原的抗体 结合在红细胞表面
凝集
可用玻片法定性，也可用试管法 半定量分析。
临床应用：
新生儿溶血症、特发性自身免疫 性贫血、自身免疫性溶血症、和医源 性溶血性疾病等的检测。
二、间接Coombs试验
检测血清中的抗红细胞抗体
二、间接Coombs试验
检测血清中游离的不完全抗体 标本中
(slide agglutination test)
+
红细胞血型鉴定
红细胞悬液
B
A
方法评价: 定性试验 简便和快速 敏感度低
临床应用: 菌种鉴定 血清学分型 血型鉴定
二、试管凝集试验
在试管内颗粒性抗原直接与抗体 结合，在电解质的作用下，出现肉 眼可见的凝集现象。
试管凝集试验
免疫血清 1 2 3 10
1：10
阴性对照
………
血清稀释度 1:20 1:40 1:80 步骤：1）加生理盐水 0.5ml
2）依次倍比稀释免疫血清 3）加相同浓度的细菌悬液0.5ml
方法评价： 临床应用：
半定量试验 Widal reaction 简便、快速 Weil-felix reaction 敏感度低 Wright test:布鲁菌病 可有假阳性 交叉配血试验
应用：临床常用于检测抗溶血素0
和类风湿因子等。
（二）明胶颗粒凝集试验 （三）炭颗粒凝集试验 （四）甲苯胺红颗粒凝集试验
第四节 抗球蛋白红细胞免疫凝集试验
(antiglobulin test)
抗球蛋白试验 又称Coombs试
验
一、直接Coombs试验
检测红细胞上抗体 不完全抗体
一、直接Coombs试验
不完全抗体 抗球蛋白抗体
具有特异抗原的红细胞
凝集
临床应用：
1.检测母体Rh(D)抗体，以便尽早 发现和避免新生儿溶血症发生。 2.输血前交叉配血或不相容输血后 抗体检测。
第五节 自身红细胞凝集试验
与一般间接免疫血凝试验不同之处 在于反应中的红细胞是未经致敏的 受检者新鲜红细胞。
第六节 免疫凝集试验的临床应用 一、直接免疫凝集试验的临床应用 1、玻片凝集试验:定性检测，如细菌菌 种鉴定及分型、ABO血型鉴定等 2、试管凝集试验:半定量检测，如辅助 诊断伤寒、副伤寒的肥达试验等。
二、间接免疫血凝试验
二、间接免疫血凝试验
（一）载体： 是以红细胞作为载体的间接免 疫凝集试验。
常用的载体有：绵羊、家兔、鸡红细胞和O型人 红细胞 。
（二）致敏
蛋白质致敏红细胞的方法有：
直接法和间接法。
（三）血凝试验 微量滴定板或试管
标本倍比稀释（1：64）1滴 +
0.5%致敏红细胞悬液1滴
充分混匀
第六节 免疫凝集试验的临床应用
二、间接免疫凝集试验的临床应用 （一）抗原的检测 病原体可溶性抗原、各种蛋白质检测 （二）抗体的检测 检测细菌、病毒等产生的抗体、自身 免疫病抗体、超敏反应抗体等
第七节 临床常用免疫凝集试验试剂方法特点
一、诊断菌液 二、载体颗粒 红细胞、胶乳、炭粉粒子 三、其他
第八节 影响免疫凝集试验的主要因素
第一节 免疫凝集试验的基本原理
分两个阶段： ①抗原抗体的特异性结Байду номын сангаас阶段 ②出现肉眼可见的凝集现象
可见反应形成
第二节 直接免疫凝集试验
直接凝集反应(direct agglutination)细菌、 螺旋体、红细胞等颗粒性抗原，在适当电 解质参与下直接与相应抗体结合出现肉眼 可见的凝集现象。
一、玻片凝集试验
抗体
抗原
载体颗粒 抗体致敏颗粒
（三）间接免疫凝集抑制试验 用抗原致敏载体--检测抗原
（三）间接免疫凝集抑制试验
+ 说明标本中不存在相应抗原
— 说明标本中含有相应抗原
抗原
抗原致敏颗粒
A 抗体
无抗原 B 抗体
抗原抗体 复合物 抗原致敏颗粒
游离抗体
不凝集 凝集
结果判定
试验结果+(凝集)--(不凝集)
教学目的
掌握：直接凝集反应和间接凝集反应的试 验原理、类型；抗球蛋白参与的试验原理
熟悉：凝集反应的特点、应用
第一节 免疫凝集试验的基本原理
凝集反应(agglutination reaction)
是指细菌和红细胞等颗粒性抗原或表 面包被可溶性抗原（或抗体）的颗粒性载 体与相应抗体（或抗原）发生特异性结合 后，在适当电解质存在下，出现肉眼可见 的凝集现象。
（一）正向间接免疫凝集试验
抗原致敏载体--检测抗体
（一）正向间接免疫凝集试验
特点：简便快速，敏感性和特异性均高， 成本低廉。
应用：伤寒沙门菌的多糖抗原致敏绵羊红 细胞测伤寒抗体。
抗原
抗
体
载体颗粒 抗原致敏颗粒
（二）反向间接免疫凝集试验
用抗体致敏载体----检测抗原
（二）反向间接免疫凝集试验
应用：检测HbsAg、AFP等。 特点：本方法快速、敏感性高、特异性强。
一、抗原因素 二、抗血清因素 三、致敏颗粒试剂 四、血清标本 五、试验条件
小结
凝集反应常用的实验方法： 1、玻片法:定性检测 2、试管法:半定量检测
检测结果 -- +
（四）协同免疫凝集试验
SPA:SPA-IgG Fc; SPA抗体致敏---测抗原 反向间接凝集反应
（四）协同免疫凝集试验
载体：金黄色葡萄球菌。
优点：特异、灵敏、简便、快速。 应用：可用于细菌、病毒、毒素及各种可 溶性抗原的快 速检测。
协同凝集试验
13
载体种类：
常用的载体有动物或人红细胞、 聚苯乙烯胶乳颗粒、明胶颗粒和 活性炭等。
室温12h
血凝反应强度示意图
二、间接免疫血凝试验
载体：红细胞 优点：红细胞来源广，价格低。
该试验为最经典的抗原抗体反 应之一。 应用：常用于测定抗核抗体、类风湿 因子等。
三、颗粒免疫凝集试验 （一）胶乳颗粒凝集试验
（一）胶乳颗粒凝集试验 载体：聚苯乙烯胶乳 优点：性能稳定，均一性好。 缺点：敏感度不及血凝试验。
第三节 间接免疫凝集试验
间接免疫凝集试验(indirect agglutination) 将可溶性抗原或抗体吸附于颗粒性载体表
面，然后与相应的抗体或抗原反应，在电解 质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象。
一、间接免疫凝集试验的类型
正向间接免疫凝集试验 反向间接免疫凝集试验 间接免疫凝集抑制试验 协同免疫凝集试验