部分乙肝患者表面抗原检测为阴性
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部分乙肝患者表面抗原检测为阴性,与临床不符合。
检测乙肝表面抗原(HBsAg)普遍采用ELISA双抗体夹心一步法.但在日常工作中会发现HBsAg阴性而HBeAg阳性的现象,其原因就是当标本中的抗原浓度过高时产生的钩状效应(HOOK)现象,从而出现假阴性造成真阳性的漏检.
钩状效应:抗原抗体特异性反应时,生成结合物的量与反应物的浓度有关。无论在一定量的抗体中加入不同量的抗原或在一定量的抗原中加入不同量的抗体,均可发现只有在两者分子比例合适时才出现最强的抗原-抗体反应。以沉淀反应为例,若向一排试管中加入一定量的抗体,然后依次向各管中加入递增量的相应可溶性抗原,根据所形成的沉淀物及抗原。
抗体的比例关系可绘制出反应曲线(图):
对策:探讨酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunoadsordent Assay,ELISA)一步法检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)产生假阴性的原因。方法:对ELISA一步法HBsAg/HBsAb/HBeAg/HBeAb/HBcAb为-/-/+/-/+模式的标本,采用ELISA二步夹心法和不同比例稀释后一步法复核。结果:15 809例标本中,有50例标本HBsAg/HBsAb/HBeAg/HBeAb/HBcAb为-/-/+/-/+结果模式,占0.32%。其中有5例标本两步法测定为HBsAg阳性,按不同梯度稀释后采用一步法复核,5例均为HBsAg阳性。结论:对高滴度的HBsAg标本ELISA一步法测定可能会出现假阴性,可采用两步法或稀释后一步法复核,以降低漏检率。低或中等浓度的HBsAg假阴性标本可通过采用高灵敏度检测方法避免。