X染色质的观察

X－染色质的观察


剂量补偿效应dosage compensation effect ： 具有两份或两份以上的基因量的个体与只有一 份基因量的个体的基因表达趋于一致的遗传效 应。 莱昂假说Lyon hypothesis


①巴氏小体是一条失活的X染色体 ②两条X染色体中哪一条失活是随机的 ③失活在胚胎早期发生(人类在胚胎发育16天时)， 失活的X染色体在以后分裂中不会复活；当生殖细 胞形成时，失活的染色体可恢复。 ④杂合体雌性在伴性基因的作用上是嵌合体。

X－染色质的观察


2.毛发根部细胞的观察：
拔取一根带有毛根的毛发，自基部截取2cm左右 置载玻片上，在毛根部加一滴地衣红染液，片刻 （2-5min）后再加一滴50％醋酸（或只加50％ 醋酸）（用不用洗掉？）。 低倍镜下观察，待毛根鞘软化后，拔去毛干（用 针尖将根部组织刮下，去毛干，并用针头将刮下 的组织均匀分散；或将毛囊细胞轻轻蹭于另一载 玻片上。）重新加一滴染液，加盖片，在酒精灯 上轻微加热后，静置5分钟，加吸水纸，用手指 轻压后镜检。
X－染色质源自文库观察

.X－染色质的辨认：

⑴核质是网状或细颗粒状分布。 ⑵核膜清晰，核无缺损。 ⑶染色适度。 ⑷周围无杂菌。

选定后的细胞，在高倍镜或油镜下进一步观察。 X－染色质的形态表现为一结构致密浓染小体， 轮廓清楚，常附着于核膜边缘或靠近内侧。
X－染色质的观察

注意：在女性间期细胞核内侧靠近核膜 处有约1微米大小的反光极强的颗粒状亮 点，即为巴氏小体。材料不同，观察结 果可能有不同，且必须和核仁区别开来 （核仁往往离核膜较远或接近核中央部 位）。

2、发根细胞巴氏小体观察
拔取带毛囊头发 一段,置于载玻片上 →滴100μl 45%乙酸 解离5分钟后，吸掉 乙酸→解剖针剥取 外层毛囊细胞，在 载玻片上将组织细 胞均匀摊平→晾干 →滴上100μl 改良 苯酚品红染色10分 钟→吸去染液，滴 100μl 95% 乙醇分 色，1分钟后吸掉→ 压片→镜检

1.分别观察50个男、女性可数的细胞并计算 各自的巴氏小体细胞所占的百分比。 2.在观察中画出4～5个典型细胞，标明巴氏 小体的部位。
X－染色质的观察


刮口腔上皮细胞前要漱口；染色时间不要太长， 否则核质着色深，X染色 质体不易区分； 毛囊细胞要充分解离，压片前可先用解剖针 敲片，使细胞解离。 毛囊细胞要充分解离，压片前可先用解剖针 敲片，使细胞解离。
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人口腔X小体
X－染色质的观察

作业：

X－染色质的观察



一．实验目的： 掌握鉴别X－染色质的简易方法，识别其形态特征及所在部位。 二．实验原理： 1.概念：人们已知的基因确实有不可逆转的失活或丢失，受永久失活所 调节的例子涉及到一个完整的染色体，即X－染色质，失活的染色质叫巴 氏小体。 在雌性哺乳动物中，包括人类，女性口腔粘膜细胞中约30%-50%（男性 0-2%）的细胞中，XX染色体其中一条就是失活的,表现为浓固缩状态。 2.发生的时期：这种现象发生在胚胎早期，染色体失活是随机的，某些 细胞中是父性X－染色体失活，而有些细胞则是母性X－染色体失活， 3.形态表现：X－染色质的形态表现为，结构致密浓染小体，轮廓清楚， 常附着于核膜边缘或靠近内侧，其形状有：微凸形、三角形、卵形、短 棒形及双球形等。
X－染色质的观察


实验用品：
1.材料：女性口腔颊部粘膜细胞。 2.用品：显微镜，载玻片，盖玻片，吸水纸等。 3.药品：吉姆萨染液等。


实验方法： 1.女性口腔颊部粘膜细胞的观察：
从女性口腔两侧颊部刮取上皮粘膜细胞，第一次 刮取物弃去，在原位刮取2～3次，可涂1～3片 干燥后，用Gimsa染色液染10分钟，勿使干燥， 用水冲洗后晾干镜检。