抗生素药物的分析
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细菌数、细菌群体质量又直接受抗生素效 价的影响。
影响因素：
一、影响比浊法的物理因素
1、散射现象
2、菌液浓度：
3、细菌体大小的变化
二、培养基：在没有外加抑制剂的情况下， 菌体的生长受培养基的成分、酸度、培养 温度、通气等条件影响。一般的试验菌是 金黄色葡萄球菌，pH在6.8-7.8。
三、培养：温度、振摇。一般培养时间3小 时，可缩短为2小时。
X=(T/S)*C X样品效价(U/ml) T检品液最大稀释倍数 S标准品液最大稀释倍数 C标准品液效价(U/ml)
试管编号 1 2 3 4 5 6 7
8
9
10
稀释倍数 2 4 8 16 32 64 128 256 512 1024
标准品
---- - + +
+
+
+
供试品
---- + + +
其他检查：组分、杂质、晶型、比旋度、灰分、 重金属、熔点等。
抗生素药品分析常用的方法：
物理方法:旋光法、紫外、红外、色谱等
化学方法（专属性不强）：功能团反应，鉴别和 含量的测定。容量分析法：酸碱滴定（青霉素 含量测定）和碘量法。
生物学方法：酶反应、微生物法测定效价
第二节 抗生素效价微生物检定法
一、微生物检定法定义：
D • anti log IV
W
V U 3 U 2 U1 S3 S 2 S1 3
W U 3 U1 S3 S1 4
I log K
要求： 1、标准品中剂量抑菌圈直径15~18mm 2、高、中、低剂距为1:0.8 3、每一检品不得少于6个平皿 4、每板上等距安放小钢管6个 5、θ: 100±10%（100%±5%）
UL：为抗生素检品低剂量(dT1)所致的抑菌圈直径
D • anti log IV
W
W UH UL SH SL 2
I log H log L log K
V UH SH UL SL 2
要求：
1、高剂量抑菌圈直径应为20~24mm，个别 可为18~24mm，高剂量与低剂量抑菌圈直 径之差应大于或等于2mm。
（一）稀释单位 (u/ml，u/mg) 将1mg抗生素配成溶液，在一定条件下进行稀释，
对某一细菌能抑制其生长的最高稀释度，即为 1mg抗生素中可含有的单位。
（二）重量单位 (u/mg)
以抗生物有效成分（即生理活性部分） 的重量作为抗生素的单位。称重量单位.。 如一个链霉素碱单位的重量为1微克，一 个青霉素G钠盐的单位的重量为0.6微克。 同一种抗生素的各种盐的校价可根据其 分子量与标准盐类进行换算而得。
三 影响抗生素效价管碟法测定结果的 因素及其控制
（一）影响抑菌圈形状的因素与控制 1．稀释抗生素用的缓冲液的PH值、盐浓度的影 响. pH值低或含盐浓度高，就会不显抑菌圈或呈卵 圆形抑菌圈。这是因为抗生素溶液的盐浓度高 或pH值过低，可能改变抗生素分子的解离状态， 影响了抗生素对试验菌抑制作用。 2．制各琼脂培养基菌层，加菌时培养基温度的 影响 3．测试用的器材洗净度的影响 4 双碟培养温度的影响 5 其他操作的影响
结构的共同点： 1、和内酰胺相邻的碳原子上有一羧基。 2、内酰胺中氮原子相对的碳原子上有一功能团氨基。
青霉素有三个手性碳，头孢有两个手性碳，有 旋光性。
青霉素G有紫外吸收，头孢的分子中也有。 青霉素在酸碱或青霉素酶的作用下均会发生降
解，在酸性条件下生成青霉胺、青霉醛和二氧 化碳。在碱性条件下（或β-内酰胺酶）的作用 下，先开环，生成青霉噻唑酸或失羧青霉噻唑 酸，如继续加热也可完全水解，形成上述三种 产物。 头孢类相对稳定。
Y=a+bX Y:抑菌圈直径 A：截距 B：斜率 X：抗生素浓度的对数。
方法：为了消除平板间的差异，在每一平板的含菌 培养基上放置6个小钢管，相间的3个小管内加入 抗生素标准品的某一浓度（Ck）, 他所产生的抑 菌圈直径平均值为Yk .另外3个小管内加入标准 品的中心浓度（Co）,他所产生的抑菌圈直径平均 值为Yo 。 令fk = Yk - Yo
+
+
+
-：细菌被抑制 +：细菌生长
X=(T/S)*C=（16/32）*40=20 （U/ml)
检测终点判断： 1、试验菌生长完全抑制 2、生长50%抑制 3、指示剂变色 4、电位差的改变 5、菌种的溶血现象等
二、比浊法
原理：将一定量的抗生素加至接种有试验 微生物的液体培养基内，混匀后，经短期 培养（约3-4h），测量培养基浊度，其浊 度与细菌数、细菌群体质量存在直接关系， 在一定的范围内符合比耳定律。
第八章 抗生素药物的分析
第一节 概 述
抗生素的概念：
具有抑制或杀灭微生物的一类物质。
抗生素的特征：
生物体在生命活动过程中合成的次级代谢产物。 性质不稳定，易降解、聚合 纯度一般较低 临床上会引起不良反应 临床应用广泛，影响大
抗生素药品质量研究的项目：
性状及鉴别试验，含量测定或效价测定，酸碱度 测定，澄明度，水分或干燥失重，安全试验 （异常毒性），热原，降压物质，无菌。
这样采用自身对照的方法，可以消除平板间的误差， 使结果更加准确。
f= a+bX
标准曲线的制备：做8个浓度，取24个平皿，分8组， 每组3个取平均值。fk对X作图。
检品的效价检定：
取3个平皿，每个放6个小管。在间隔的3 个小管内加入抗生素标准品的中心浓度 (Co),另3 个小管内加入估计浓度相当于 Co的检品溶液。测量出fk,从标准曲线中 计算出检品的浓度，在换算出每毫克的 单位数。
四、比浊法与管碟法比较
比浊法 优点 1、快速
2、客观、精确 3、无扩散影响 缺点 1、对样品洁净度 要求高 2、实验要求较严
管碟法 1、结果较稳定 2、大批量
1、扩散因素影响较 大 2、时间长（2天) 3、操作繁琐,人为因 素的干扰
第二节 抗生素类药物的鉴别
一、β-内酰胺类抗生素的鉴别
分类：青霉烷类（四氢噻唑五圆环），头孢烯类（二氢噻 嗪），碳青霉烯类（硫霉素），克拉维酸（五圆环中的 硫被氧代替，且六位没取代基）。
是利用微生物发育时对某些物质的特殊依赖 性，按这些物质对微生物生长的影响，对他们作 出定量鉴定的方法。微生物检定法可分为三类： 稀释法（dilute method）、比浊法 （turbid compare method ） 、 琼 脂 扩 散 法 （ diffuse method）。
与化学方法相比： 优点：1、原理与医疗要求基本一致
1试验菌种：挑选合适的敏感菌；用适宜 的菌种保存方法；定期对菌种分离纯化； 控制菌龄菌量。
2培养基：培养基的成分影响抑菌圈的大 小和清晰度，pH也很重要。
一剂量法（标准曲线法）
一剂量法（标准曲线法）原理：在一定 范围内，抑菌圈的直径随抗生素浓度的 增减而增减。并且抑菌圈的直径与抗生 素的对数剂量成线性关系。据此测定抗 生素效价。
2、底层琼脂20ml，上层5ml，每一检品所用 平板不少于4个。
3、等距安置小钢管4个，相对角为同一物质。
4、 θ为100±10%（更精确要求100±5%）
5、标准品与检品同质
三剂量法：
应用高、中、低三种剂量，在同一实 验条件下比较标准品及检品溶液的抑菌圈 大小，以求得检品效价的方法。
S3:为抗生素标准品高剂量（dS3）所致的抑菌圈直径 S2: 为抗生素标准品中剂量（dS2）所致的抑菌圈直径 S1: 为抗生素标准品低剂量（dS1）所致的抑菌圈直径 U3：为抗生素检品高剂量(dT3)所致的抑菌圈直径 U2：为抗生素检品中剂量(dT2)所致的抑菌圈直径 U1: 为抗生素检品低剂量(dT1)所致的抑菌圈直径
T的影响：
一般T增加，r增大，但时间太长影响抑菌圈 清晰度。
M的影响：在一定的范围内，小管内M越大， 抑菌圈直径越大，M还与抗生素的抗菌活性、 浓度、钢管的大小、剂型、辅料等有关。
C的影响：C越小，抑菌圈直径越大，C与菌种、 菌量、培养基、温度等有关
H的影响：培养基增厚，则抑菌圈减小。
操作中要注意：
二剂量法：
将抗生素的标准品及检品各稀释成有 一定比例的二种剂量（2：1或4：1），即 高剂量和低剂量，在同一平板上进行对比， 根据所产生抑菌圈大小来计算检品效价的 方法。
SH:为抗生素标准品高剂量（dS2）所致的抑菌圈 直径
SL：为抗生素标准品低剂量(dS1)所致的抑菌圈直 径
UH：为抗生素检品高剂量(dT2)所致的抑菌圈直径
抑菌圈的形成
log M (1/ 9.21DT )r 2 log C 4DTH )
M:抗生素在管中的量 D：扩散系数 T：扩散时间 C：最低抑菌浓度 H：培养基厚度
r 2 9.21DT (log M log C 4DTH )
影响抑菌圈半径的因素： D的影响因素： 抗生素本身结构、分子量等，结构简单者容易扩 散，分子量大的扩散就慢， 杂质：抗生素或培养基中含有杂质，杂质本身也 有扩散系统，看干扰抗生素的扩散，影响抑菌圈 的大小和清晰度。 琼脂含量：含量过多影响抗生素的扩散，过少又 使钢管下陷，影响抑菌圈的大小。 菌种对抗生素的吸附作用： pH影响分子的形式、 温度影响扩散 D增大，r也增大
2、对微生物作用直接反映其抗菌活性 缺点：1、结果是总效价，无法区分多组分
2、时间长，有一定误差，操作繁杂
二、抗生素标准效价（potency)单位
牛津单位:抑制50毫升肉汤培养基中金黄色葡萄球 菌生长的青霉素的最低含量为一个牛津单位.
一个牛津单位相当于0.6ug的青霉素钠盐所具有的 抗 生 活 力 ， 1mg 青 霉 素 G 钠 盐 含 有 1667 个 牛 津 单 位,(IU)
3特定单位
以特定抗生素某一批产品的某一重量为一个 单位，经有关国家权威机构认可而定.
效价测定的方法： 一、稀释法（dilute method） 二、比浊法 （turbid compare method） 三、琼脂扩散法（diffuse method）
一、稀释法
原理：用液体培养基逐级将抗生素稀释， 在各管中加入等量的试验菌液，进行培养， 观察抑制细菌生长的最低抗生素浓度，再 与同法测定的标准品终点作比较，从而求 得被测抗生素的效价。
（二）影响抑菌圈边缘清晰度的因素与控制 1 试验菌长时间放置． 2 培养基的原材料品种与质量，生测用培养基用 的原材料的选择很重要。 3调节培养基的pH值或增加适量的盐浓度可使抑 菌圈清晰. 4不适当延长双碟的培养时间，使抑菌圈边缘不 清。
抗生素效价管碟来自百度文库测定的操作技术
操作分为八步： 1试验菌的纯化与悬液的制备 2 缓冲液、灭菌水与培养基的制备 3标准品、供试品的称量、溶解与稀释 4 双碟的制备及放管 5 滴加药液 6恒温培养 7 测量抑菌圈直径或面积 8 计算 操作流程：
青霉素G钾盐的理论效价（U/mg）=
青霉素G钠盐的理论效价 青霉素G钠盐的分子量 青霉素 G钾盐的分子量
1667 356.37 1593（U/mg）
372.48
1类似重量单位:
以抗生素盐类纯品的重量为单位。包括无生 物活性的酸根和金属离子。
2重量折算单位
以与原始的生物活性相当的纯抗生素实际 重量为一个单位，
操作流程如图：
基本要点：
1 培养条件的控制：试管规格均一 水浴 箱水温均匀，试管按拉丁方排列。
2 细菌生长误差的控制：
3 测量时间的控制：各管应先充分混匀， 将菌液移入比色皿后静止2分钟后测定。
三、琼脂扩散法（diffuse method） 即管碟法
管碟法原理:
抗生素在涂布特定菌的琼脂培养基内扩散，形成 一定浓度抗生素的球型区，抑制试验菌生长，通过透 明培养基观察抑菌圈，抗生素剂量的对数与抑菌圈面 积或直径成正比。在同样条件下将已知效价的标准品 溶液与未知效价的供试品溶液的剂量反应(抑菌圈)进 行比较；当标准品和供试品是属于同一性质的抗生素 时，标准品溶液和供试品溶液．对一定试验菌所得的 剂量反应曲线，在一定剂量范围内应互相平行。根据 以上原理，可设计为一剂量法、二剂量法及三剂量法。 从而可以较为准确地测定供试品的效价。
鉴别： 1、酶法： β-内酰胺酶 2、红外吸收光谱法：3000-2800(C-H),3350cm-1(NH),1800-1600(羰基)，1460-1375（甲基或次甲基） 3、紫外吸收光谱法 4、茚三酮反应：是α氨基的反应，与茚三酮缩合， 生成蓝紫色化合物。
影响因素：
一、影响比浊法的物理因素
1、散射现象
2、菌液浓度：
3、细菌体大小的变化
二、培养基：在没有外加抑制剂的情况下， 菌体的生长受培养基的成分、酸度、培养 温度、通气等条件影响。一般的试验菌是 金黄色葡萄球菌，pH在6.8-7.8。
三、培养：温度、振摇。一般培养时间3小 时，可缩短为2小时。
X=(T/S)*C X样品效价(U/ml) T检品液最大稀释倍数 S标准品液最大稀释倍数 C标准品液效价(U/ml)
试管编号 1 2 3 4 5 6 7
8
9
10
稀释倍数 2 4 8 16 32 64 128 256 512 1024
标准品
---- - + +
+
+
+
供试品
---- + + +
其他检查：组分、杂质、晶型、比旋度、灰分、 重金属、熔点等。
抗生素药品分析常用的方法：
物理方法:旋光法、紫外、红外、色谱等
化学方法（专属性不强）：功能团反应，鉴别和 含量的测定。容量分析法：酸碱滴定（青霉素 含量测定）和碘量法。
生物学方法：酶反应、微生物法测定效价
第二节 抗生素效价微生物检定法
一、微生物检定法定义：
D • anti log IV
W
V U 3 U 2 U1 S3 S 2 S1 3
W U 3 U1 S3 S1 4
I log K
要求： 1、标准品中剂量抑菌圈直径15~18mm 2、高、中、低剂距为1:0.8 3、每一检品不得少于6个平皿 4、每板上等距安放小钢管6个 5、θ: 100±10%（100%±5%）
UL：为抗生素检品低剂量(dT1)所致的抑菌圈直径
D • anti log IV
W
W UH UL SH SL 2
I log H log L log K
V UH SH UL SL 2
要求：
1、高剂量抑菌圈直径应为20~24mm，个别 可为18~24mm，高剂量与低剂量抑菌圈直 径之差应大于或等于2mm。
（一）稀释单位 (u/ml，u/mg) 将1mg抗生素配成溶液，在一定条件下进行稀释，
对某一细菌能抑制其生长的最高稀释度，即为 1mg抗生素中可含有的单位。
（二）重量单位 (u/mg)
以抗生物有效成分（即生理活性部分） 的重量作为抗生素的单位。称重量单位.。 如一个链霉素碱单位的重量为1微克，一 个青霉素G钠盐的单位的重量为0.6微克。 同一种抗生素的各种盐的校价可根据其 分子量与标准盐类进行换算而得。
三 影响抗生素效价管碟法测定结果的 因素及其控制
（一）影响抑菌圈形状的因素与控制 1．稀释抗生素用的缓冲液的PH值、盐浓度的影 响. pH值低或含盐浓度高，就会不显抑菌圈或呈卵 圆形抑菌圈。这是因为抗生素溶液的盐浓度高 或pH值过低，可能改变抗生素分子的解离状态， 影响了抗生素对试验菌抑制作用。 2．制各琼脂培养基菌层，加菌时培养基温度的 影响 3．测试用的器材洗净度的影响 4 双碟培养温度的影响 5 其他操作的影响
结构的共同点： 1、和内酰胺相邻的碳原子上有一羧基。 2、内酰胺中氮原子相对的碳原子上有一功能团氨基。
青霉素有三个手性碳，头孢有两个手性碳，有 旋光性。
青霉素G有紫外吸收，头孢的分子中也有。 青霉素在酸碱或青霉素酶的作用下均会发生降
解，在酸性条件下生成青霉胺、青霉醛和二氧 化碳。在碱性条件下（或β-内酰胺酶）的作用 下，先开环，生成青霉噻唑酸或失羧青霉噻唑 酸，如继续加热也可完全水解，形成上述三种 产物。 头孢类相对稳定。
Y=a+bX Y:抑菌圈直径 A：截距 B：斜率 X：抗生素浓度的对数。
方法：为了消除平板间的差异，在每一平板的含菌 培养基上放置6个小钢管，相间的3个小管内加入 抗生素标准品的某一浓度（Ck）, 他所产生的抑 菌圈直径平均值为Yk .另外3个小管内加入标准 品的中心浓度（Co）,他所产生的抑菌圈直径平均 值为Yo 。 令fk = Yk - Yo
+
+
+
-：细菌被抑制 +：细菌生长
X=(T/S)*C=（16/32）*40=20 （U/ml)
检测终点判断： 1、试验菌生长完全抑制 2、生长50%抑制 3、指示剂变色 4、电位差的改变 5、菌种的溶血现象等
二、比浊法
原理：将一定量的抗生素加至接种有试验 微生物的液体培养基内，混匀后，经短期 培养（约3-4h），测量培养基浊度，其浊 度与细菌数、细菌群体质量存在直接关系， 在一定的范围内符合比耳定律。
第八章 抗生素药物的分析
第一节 概 述
抗生素的概念：
具有抑制或杀灭微生物的一类物质。
抗生素的特征：
生物体在生命活动过程中合成的次级代谢产物。 性质不稳定，易降解、聚合 纯度一般较低 临床上会引起不良反应 临床应用广泛，影响大
抗生素药品质量研究的项目：
性状及鉴别试验，含量测定或效价测定，酸碱度 测定，澄明度，水分或干燥失重，安全试验 （异常毒性），热原，降压物质，无菌。
这样采用自身对照的方法，可以消除平板间的误差， 使结果更加准确。
f= a+bX
标准曲线的制备：做8个浓度，取24个平皿，分8组， 每组3个取平均值。fk对X作图。
检品的效价检定：
取3个平皿，每个放6个小管。在间隔的3 个小管内加入抗生素标准品的中心浓度 (Co),另3 个小管内加入估计浓度相当于 Co的检品溶液。测量出fk,从标准曲线中 计算出检品的浓度，在换算出每毫克的 单位数。
四、比浊法与管碟法比较
比浊法 优点 1、快速
2、客观、精确 3、无扩散影响 缺点 1、对样品洁净度 要求高 2、实验要求较严
管碟法 1、结果较稳定 2、大批量
1、扩散因素影响较 大 2、时间长（2天) 3、操作繁琐,人为因 素的干扰
第二节 抗生素类药物的鉴别
一、β-内酰胺类抗生素的鉴别
分类：青霉烷类（四氢噻唑五圆环），头孢烯类（二氢噻 嗪），碳青霉烯类（硫霉素），克拉维酸（五圆环中的 硫被氧代替，且六位没取代基）。
是利用微生物发育时对某些物质的特殊依赖 性，按这些物质对微生物生长的影响，对他们作 出定量鉴定的方法。微生物检定法可分为三类： 稀释法（dilute method）、比浊法 （turbid compare method ） 、 琼 脂 扩 散 法 （ diffuse method）。
与化学方法相比： 优点：1、原理与医疗要求基本一致
1试验菌种：挑选合适的敏感菌；用适宜 的菌种保存方法；定期对菌种分离纯化； 控制菌龄菌量。
2培养基：培养基的成分影响抑菌圈的大 小和清晰度，pH也很重要。
一剂量法（标准曲线法）
一剂量法（标准曲线法）原理：在一定 范围内，抑菌圈的直径随抗生素浓度的 增减而增减。并且抑菌圈的直径与抗生 素的对数剂量成线性关系。据此测定抗 生素效价。
2、底层琼脂20ml，上层5ml，每一检品所用 平板不少于4个。
3、等距安置小钢管4个，相对角为同一物质。
4、 θ为100±10%（更精确要求100±5%）
5、标准品与检品同质
三剂量法：
应用高、中、低三种剂量，在同一实 验条件下比较标准品及检品溶液的抑菌圈 大小，以求得检品效价的方法。
S3:为抗生素标准品高剂量（dS3）所致的抑菌圈直径 S2: 为抗生素标准品中剂量（dS2）所致的抑菌圈直径 S1: 为抗生素标准品低剂量（dS1）所致的抑菌圈直径 U3：为抗生素检品高剂量(dT3)所致的抑菌圈直径 U2：为抗生素检品中剂量(dT2)所致的抑菌圈直径 U1: 为抗生素检品低剂量(dT1)所致的抑菌圈直径
T的影响：
一般T增加，r增大，但时间太长影响抑菌圈 清晰度。
M的影响：在一定的范围内，小管内M越大， 抑菌圈直径越大，M还与抗生素的抗菌活性、 浓度、钢管的大小、剂型、辅料等有关。
C的影响：C越小，抑菌圈直径越大，C与菌种、 菌量、培养基、温度等有关
H的影响：培养基增厚，则抑菌圈减小。
操作中要注意：
二剂量法：
将抗生素的标准品及检品各稀释成有 一定比例的二种剂量（2：1或4：1），即 高剂量和低剂量，在同一平板上进行对比， 根据所产生抑菌圈大小来计算检品效价的 方法。
SH:为抗生素标准品高剂量（dS2）所致的抑菌圈 直径
SL：为抗生素标准品低剂量(dS1)所致的抑菌圈直 径
UH：为抗生素检品高剂量(dT2)所致的抑菌圈直径
抑菌圈的形成
log M (1/ 9.21DT )r 2 log C 4DTH )
M:抗生素在管中的量 D：扩散系数 T：扩散时间 C：最低抑菌浓度 H：培养基厚度
r 2 9.21DT (log M log C 4DTH )
影响抑菌圈半径的因素： D的影响因素： 抗生素本身结构、分子量等，结构简单者容易扩 散，分子量大的扩散就慢， 杂质：抗生素或培养基中含有杂质，杂质本身也 有扩散系统，看干扰抗生素的扩散，影响抑菌圈 的大小和清晰度。 琼脂含量：含量过多影响抗生素的扩散，过少又 使钢管下陷，影响抑菌圈的大小。 菌种对抗生素的吸附作用： pH影响分子的形式、 温度影响扩散 D增大，r也增大
2、对微生物作用直接反映其抗菌活性 缺点：1、结果是总效价，无法区分多组分
2、时间长，有一定误差，操作繁杂
二、抗生素标准效价（potency)单位
牛津单位:抑制50毫升肉汤培养基中金黄色葡萄球 菌生长的青霉素的最低含量为一个牛津单位.
一个牛津单位相当于0.6ug的青霉素钠盐所具有的 抗 生 活 力 ， 1mg 青 霉 素 G 钠 盐 含 有 1667 个 牛 津 单 位,(IU)
3特定单位
以特定抗生素某一批产品的某一重量为一个 单位，经有关国家权威机构认可而定.
效价测定的方法： 一、稀释法（dilute method） 二、比浊法 （turbid compare method） 三、琼脂扩散法（diffuse method）
一、稀释法
原理：用液体培养基逐级将抗生素稀释， 在各管中加入等量的试验菌液，进行培养， 观察抑制细菌生长的最低抗生素浓度，再 与同法测定的标准品终点作比较，从而求 得被测抗生素的效价。
（二）影响抑菌圈边缘清晰度的因素与控制 1 试验菌长时间放置． 2 培养基的原材料品种与质量，生测用培养基用 的原材料的选择很重要。 3调节培养基的pH值或增加适量的盐浓度可使抑 菌圈清晰. 4不适当延长双碟的培养时间，使抑菌圈边缘不 清。
抗生素效价管碟来自百度文库测定的操作技术
操作分为八步： 1试验菌的纯化与悬液的制备 2 缓冲液、灭菌水与培养基的制备 3标准品、供试品的称量、溶解与稀释 4 双碟的制备及放管 5 滴加药液 6恒温培养 7 测量抑菌圈直径或面积 8 计算 操作流程：
青霉素G钾盐的理论效价（U/mg）=
青霉素G钠盐的理论效价 青霉素G钠盐的分子量 青霉素 G钾盐的分子量
1667 356.37 1593（U/mg）
372.48
1类似重量单位:
以抗生素盐类纯品的重量为单位。包括无生 物活性的酸根和金属离子。
2重量折算单位
以与原始的生物活性相当的纯抗生素实际 重量为一个单位，
操作流程如图：
基本要点：
1 培养条件的控制：试管规格均一 水浴 箱水温均匀，试管按拉丁方排列。
2 细菌生长误差的控制：
3 测量时间的控制：各管应先充分混匀， 将菌液移入比色皿后静止2分钟后测定。
三、琼脂扩散法（diffuse method） 即管碟法
管碟法原理:
抗生素在涂布特定菌的琼脂培养基内扩散，形成 一定浓度抗生素的球型区，抑制试验菌生长，通过透 明培养基观察抑菌圈，抗生素剂量的对数与抑菌圈面 积或直径成正比。在同样条件下将已知效价的标准品 溶液与未知效价的供试品溶液的剂量反应(抑菌圈)进 行比较；当标准品和供试品是属于同一性质的抗生素 时，标准品溶液和供试品溶液．对一定试验菌所得的 剂量反应曲线，在一定剂量范围内应互相平行。根据 以上原理，可设计为一剂量法、二剂量法及三剂量法。 从而可以较为准确地测定供试品的效价。
鉴别： 1、酶法： β-内酰胺酶 2、红外吸收光谱法：3000-2800(C-H),3350cm-1(NH),1800-1600(羰基)，1460-1375（甲基或次甲基） 3、紫外吸收光谱法 4、茚三酮反应：是α氨基的反应，与茚三酮缩合， 生成蓝紫色化合物。