氨基酸、多肽、蛋白质和酶类药品检验

1、碘滴定法(也称直接碘量法)
电位比EӨI2/I—低的还原性物质，可以直接用I2的 标准溶液滴定的并不多，只限于较强的还原剂，如：
S2-、SO32-、Sn2+、S2O32医-、学ppAt sO32-、SbO33-等。
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剩余碘量法
在供试品中先加入一定量、过量的碘滴定液， 待I2与测定组分反应完全后，再用硫代硫酸 钠滴定液滴定剩余的碘，根据与药物作用的 碘的量来计算药物含量的方法。
此外，加入过量的KI，可以加快反应的速度和 提高反应的完全程度。
2.反应时溶液的温度不能高，一般在室温下进行。 因度的分升。解高保。温存度Na增2S大2OI23的溶挥液发时性，，室降温低升淀高粉，指加示速剂Na的2S灵2O敏3
3.析出碘的反应最好在带塞的碘量瓶中进行，滴
定切勿剧烈摇动。
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非水溶液滴定法
非水溶液滴定法是在非水溶剂中进行滴定的方法。 主要用来测定有机碱及其氢卤酸盐、磷酸盐、硫酸 盐或有机酸盐，以及有机酸碱金属盐类药物的含量。 也用于测定某些有机弱酸的含量。
非水溶剂的种类 (1) 酸性溶剂 有机弱碱在酸性溶剂中可显著地增强其相对碱
度，最常用的酸性溶剂为冰醋酸。 (2) 碱性溶剂 有机弱酸在碱性溶剂中可显著地增强其相对酸
I2十2S2O32—＝2I—+S4O62—
本法可测定矿石中0.5%以上的铜。
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2.钡盐中钡的测定
能 涤将后B，a在2用+H沉A稀淀c-H为NCaBAla溶cC缓r解O冲4，。溶加沉液淀入中经过，过量C滤rKO、I42，洗—
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2、滴定碘法(间接碘量法)
电位比EӨI2/I—高的氧化性物质，可在一定的条件 下，用碘离子来还原，产生相当量的碘，然后用 Na2S2O3标准溶液来滴定析出的I2，这种方法叫做间 接碘量法或称为滴定碘法。例如K2Cr2O7在酸性镕液 中与过量的KI作用，析出的I2用Na2S2O3标准溶液滴 定。
Cr2O72-+6I-+14H+＝2Cr3++3I2+7H2O
I2+2S2O32—＝2I-+S4O62—
利用这一方法可以测定很多氧化性物质 ,如ClO3-、
ClO- 、 CrO42- 、 IO3- 、 BrO3- 、 SbO43- 、 MnO4- 、
MnO2 、AsO43-、NO3-、NO2-、Cu2+、H2O2等等，以
示例一：三氨 基酸注射液-341
的测定
示例二：六氨
示例一：L-胱氨
基酸注射液400
酸的测定
6.氨基酸自动分析
仪
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碘量法
原理：半胱氨酸分子中含有－SH， 在酸性 条件下，与过量的碘作用，剩余的碘用硫代 硫酸钠溶液滴定。由硫代硫酸钠溶液所消耗 的量，间接求出硫化物的含量。
注意：滴定条件，指示剂，碘滴定液， Na2S2O3 标液配制
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碘量法的背景知识
(一) 方法简介
碘量法也是常用的氧化还原滴定方法之一。它 是因此以，I2的碘氧量化法性的和基I本-的反还应原是性为基础的滴定分析法。
I2+2e-=2I- E IO 2/I-=0.535V
剂由作E用Ө可；知而I2I是-是一一种种较中弱等的强氧度化的剂还，原能剂与，较能强与的许还原多 氧化剂作用，因此碘量法又可以用直接的和间接的 两种方式进行滴定。
碘滴定液(0.1mol/L)
I2=253.81 12.69g→1000ml 【配制】 取碘13.0g,加碘化钾36g与水50ml 溶解后，加盐酸3滴与水适量使成1000ml， 摇匀，用垂熔玻璃滤器滤过。
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碘量法的主要误差来 易被空气中的氧所氧化。
源
，一是
I2易
挥发，
二
是I-
为防止I2挥发，应采取以下措施： 度，降1.低加I2入的过挥量发K性I，，K提I与高I淀2形粉成指I3示—，剂以的增灵大敏I度2的。溶解
（二）应用实例
1.铜矿石中铜的测定
用络合NH物矿4H，石F并2经掩调H蔽C节试l、溶样H液中N的O的3p、FHe溴为3+水3，.5和使—尿其4.素形0，处成加理稳入成定K溶的I与液FeC后Fu、623+反指示应剂，，析反出应的式I2，如用下N：a2S2O3标准溶液滴定，以淀粉为
2Cu2++4I—＝2CuI↓+I2
度，最常用的碱性溶剂为二甲基甲酰胺。
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定氮法
样品与浓硫酸共热,含 氮有机物即分解产生氨 （消化），氨又与硫酸 作用，变成硫酸氨。经 强碱碱化使之分解放出 氨，借蒸汽将氨蒸至酸 液中，根据此酸液被中 和的程度可计算得样品 之氮含量。
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4.碘量法或溴量法 5.HPLC法
示例一：盐酸 半胱氨酸水合物
第7章 氨基酸、多肽、蛋白质和 酶类药品检验
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氨基酸类药物含量测定常用的方法
1.酸碱滴定法
示例1：谷氨酸的 含量测定
示例2：赖氨酸片 中赖氨酸的测定
2.非水溶液滴定法
示例：酪氨酸的 含量测定
3.定氮法
示例：天门酰氨 片的含量测定
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赖氨酸片中赖氨酸的测定中
1)为什么要用NaOH调节pH为7.0？ 2）加入甲醛溶液的作用？ 3）是直接滴定还是其他的滴定方式？
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为防止I-被空气中的氧所氧化，应采取以下措施：
1.避光 光线能催化I—被空气氧化。
在与S中2O性2.3溶或2—液弱将p酸会H性发值生溶的下液影述中响副进反行S2应。O：3因2—为与在I2之碱间性的溶反液应中必，须I2
S2O32—+4I2+10 OH—＝2SO42—+8I—十5H2O
而且，I2在碱性溶液中还会发生歧化反应：
及所以能滴与定Cr碘O4法2-生的成应用沉范淀围的医相阳学p当离pt 广子泛，。如Pb2+、
Ba2+等，
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碘量法常用淀粉作指示剂，淀粉与碘作 用形成蓝色络合物，灵敏度很高，即使在 5×10—6 mol/L溶液中亦能看出。
淀粉指示剂应在近终点时加入，因为当 溶液中有大量碘存在时，碘可被吸附在淀粉 表面，影响终点的正确判断。
3 I2+6OH—＝IO3—+5I—+3H2O
S2O32如—+果2在H+强＝酸SO性2+溶S液↓+中H，2ONa2S2O3溶液会发生分解：
同时，I—在酸性;+O2=2I2+2H2O
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3.在间接碘量法中，当析出碘的反应完成后，应 立化)即。用Na2S2O3进行滴定(避免I2的挥发和I—被空气氧