凝血检测ppt课件
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VerifyNOW属床旁检测设备，整个检测过程只需3min
19
VerifyNOW的优势与劣势
系统诊断的血小板反应性和临床预后关系尚待更大规模的随机 对照观察 此方法目前最大的劣势在于其阿司匹林反应性的诊断标准是基 于单剂量 325mg阿司匹林口服后光比浊法测定的肾上腺素诱 导血小板聚集，故此标准尚需进一步的验证
11
血小板检测
数量：血小板计数 功能： 透光率比浊法血小板聚集仪 血小板功能检测仪-100 VerifyNOW 流式细胞术 plateletmapping
12
血小板计数
血小板计数指单位体积血液中所含的血小板数目（血小板计 数是临床反映患者止血与血栓疾病的一种常用指标）。 方法原理：血小板计数仪一般需使用PRP(富血小板血浆)血 浆进行，即使用特殊的离心速度将红细胞和白细胞进行沉淀 ，使上层血浆中尽量保存最为丰富的血小板，然后应用这种 PRP血浆进行血小板计数。 正常值：100-300 *109/L 10-30万/立方毫米 临床意义： 血小板计数有助于临床上止血和血栓性疾病的诊断和鉴 别诊断。
凝血相关检测
掌握：各种检测名称,临床用途
熟悉：各种检测对应检测内容，优缺点
了解：各种检测方法学原理
1
检查目的
止凝血障碍疾病的诊断 抗凝治疗监测 溶栓治疗效果判断 术前检查
2
检测内容
血栓及出血、止血检测是临床血液学检查中重要组成 部分，一般包括： 血管壁检测 血小板检测 凝血因子检测 纤溶活性检测 血流变学检测
17
PFA-100的优势与劣势
优势：方法简单，需血量少( 800μl) 、快速且敏感性与重 复性均较佳 劣势：价格昂贵，受血中vWF水平以及血细胞比容的影响较 大，正是由于这些不足，限制了 PFA-100在评价血小板功能 中的应用
18
VerifyNOW
VerifyNOW由美国 Accumetrics公司研发，2006年经美国食品 药品管理局(FDA) 批准用于血小板功能检测 方法原理：在试管内预混有血小板激活剂和纤维蛋白原包被的 小珠“加入全血标本后，血小板受激活剂作用而活化，其表 面IIb/IIIa受体复合物与小珠表面的纤维蛋白原交联，使血 小板聚集于小珠表面，试管内透光性增强
16
血小板功能检测仪-100
为克服光学方法的局限性，研究人员发展了血小板功能检测仪 -100，( Platelet Function Analyzner-100，PFA-100) 方法原理：检测高切应力条件下血流经过微孔膜时微孔的闭合 时间。微孔膜上附有血小板的激活剂胶原-肾上腺素或胶原ADP，模仿了高切应力、血管损伤、全血情况下的凝固时间 ，极大程度地模仿在体的血栓形成条件。
临床意义： 可分别评价阿司匹林以及氯吡格雷的抗血小板效应
15
透光率比浊法血小板聚集仪 优势与劣势
优点： 可通过不同途径激活血小板聚集对抗血小板药物效果进行评 估 局限性： 检测结果依赖于操作者的经验，不同实验室间甚至同一实验 室内的可重复性以及可比性均较差 最为重要的是此实验仅仅分析富血小板血浆内血小板聚集的 变化，而忽略了在体情况下血流切应力、红细胞、白细胞、 单核细胞等与血小板的相互作用
血管 收缩
加速 (Ⅱ） 聚集
加速Ⅱa 形成
使纤维蛋白 网收缩
9
血小板能维持血管壁稳定性
血小板参与血管内皮的再生和修复过程 增加血管壁的抵抗力 减低血管壁的通透性和脆性。
10
血小板止血功能
粘附、聚集在血管破损处，形成白色血栓
释放活性物质，促进血小板聚集，增强血管收 缩
促进凝血过程 血块收缩，形成稳固血栓 维持血管壁的完整性，毛细血管的通透性
20
流式细胞术
全血法流式细胞术原理： 流式细胞仪能快速测定大量个体细胞的特性。样品中欲分 析的细胞预先进行荧光标记,然后由压缩氮经硅管送达标本 室,再以5000～10000个细胞/秒的速率逐个射入光敏感区。 在适当波长的激发光作用下,被特殊染色的细胞发射出一定 量的荧光脉冲讯号。
21
流式细胞术优势与劣势
血管壁和血小板相互作用
高度怀疑血管因素异常时才做Ⅼ
[参考值]BT测定器法 6.9±2.1min >9min
为延长
6
出血时间意义
BT延长 血小板明显 <50109/L 血小板功能异常：血小板无力症或药物 影响（如阿斯匹林、潘生丁） 血管壁异常：遗传性毛细血管扩张症 严重缺乏血浆某些凝血因子，血管性假性血友病（VWD）、 DIC
13
血小板计数优势与劣势
优点：是目前普遍应用的针对血小板检测最简 便快捷的方法 弊端：只能提示血小板数量变化，与血小板各 功能不明显相关，当出于对凝血过程中血小 板功能探查目的时，常常并不直观。
14
透光率比浊法血小板聚集
方法原理： 检测富血小板血浆在各种激动剂作用下发生血小板聚集或形成 血凝块后透光率的变化
优势： 能在较接近受检者体内情况的条件下测定血小板功能 不受其他种类细胞或碎片的干扰。 可检测出活化的血小板聚集亚群 劣势： 检测费用高 仪器操作复杂 无法在床旁完成检测
22
检测内容
血栓及出血、止血检测是临床血液学检查中重要组成 部分，一般包括： 血管壁检测 血小板检测 凝血因子检测 纤溶活性检测 血流变学检测
3
血管壁的作用
血管壁在出凝血过程中的作用表现为:
血管的收缩
血Βιβλιοθήκη Baidu板的激活
凝血系统的激活
局部血粘度的增高
4
血管壁检查
常用筛选试验如下：
毛细血管抵抗力试验（CRP）
出血时间（BT）
血块收缩试验(CRT)
5
出血时间测定
出血时间测定
将皮肤毛细血管刺破后，血液自然流出到自
然停止所需的时间称为出血时间(BT) 。主要反映
BT缩短
某些严重高凝状态或血栓性疾病
7
检测内容
血栓及出血、止血检测是临床血液学检查中重要组成 部分，一般包括： 血管壁检测 血小板检测 凝血因子检测 纤溶活性检测 血流变学检测
8
血小板在凝血中的作用
血管受损 vWF 血小板黏附 Fig PLT释放(5-HT ADP) PLT聚集 (Ⅰ)
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VerifyNOW的优势与劣势
系统诊断的血小板反应性和临床预后关系尚待更大规模的随机 对照观察 此方法目前最大的劣势在于其阿司匹林反应性的诊断标准是基 于单剂量 325mg阿司匹林口服后光比浊法测定的肾上腺素诱 导血小板聚集，故此标准尚需进一步的验证
11
血小板检测
数量：血小板计数 功能： 透光率比浊法血小板聚集仪 血小板功能检测仪-100 VerifyNOW 流式细胞术 plateletmapping
12
血小板计数
血小板计数指单位体积血液中所含的血小板数目（血小板计 数是临床反映患者止血与血栓疾病的一种常用指标）。 方法原理：血小板计数仪一般需使用PRP(富血小板血浆)血 浆进行，即使用特殊的离心速度将红细胞和白细胞进行沉淀 ，使上层血浆中尽量保存最为丰富的血小板，然后应用这种 PRP血浆进行血小板计数。 正常值：100-300 *109/L 10-30万/立方毫米 临床意义： 血小板计数有助于临床上止血和血栓性疾病的诊断和鉴 别诊断。
凝血相关检测
掌握：各种检测名称,临床用途
熟悉：各种检测对应检测内容，优缺点
了解：各种检测方法学原理
1
检查目的
止凝血障碍疾病的诊断 抗凝治疗监测 溶栓治疗效果判断 术前检查
2
检测内容
血栓及出血、止血检测是临床血液学检查中重要组成 部分，一般包括： 血管壁检测 血小板检测 凝血因子检测 纤溶活性检测 血流变学检测
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PFA-100的优势与劣势
优势：方法简单，需血量少( 800μl) 、快速且敏感性与重 复性均较佳 劣势：价格昂贵，受血中vWF水平以及血细胞比容的影响较 大，正是由于这些不足，限制了 PFA-100在评价血小板功能 中的应用
18
VerifyNOW
VerifyNOW由美国 Accumetrics公司研发，2006年经美国食品 药品管理局(FDA) 批准用于血小板功能检测 方法原理：在试管内预混有血小板激活剂和纤维蛋白原包被的 小珠“加入全血标本后，血小板受激活剂作用而活化，其表 面IIb/IIIa受体复合物与小珠表面的纤维蛋白原交联，使血 小板聚集于小珠表面，试管内透光性增强
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血小板功能检测仪-100
为克服光学方法的局限性，研究人员发展了血小板功能检测仪 -100，( Platelet Function Analyzner-100，PFA-100) 方法原理：检测高切应力条件下血流经过微孔膜时微孔的闭合 时间。微孔膜上附有血小板的激活剂胶原-肾上腺素或胶原ADP，模仿了高切应力、血管损伤、全血情况下的凝固时间 ，极大程度地模仿在体的血栓形成条件。
临床意义： 可分别评价阿司匹林以及氯吡格雷的抗血小板效应
15
透光率比浊法血小板聚集仪 优势与劣势
优点： 可通过不同途径激活血小板聚集对抗血小板药物效果进行评 估 局限性： 检测结果依赖于操作者的经验，不同实验室间甚至同一实验 室内的可重复性以及可比性均较差 最为重要的是此实验仅仅分析富血小板血浆内血小板聚集的 变化，而忽略了在体情况下血流切应力、红细胞、白细胞、 单核细胞等与血小板的相互作用
血管 收缩
加速 (Ⅱ） 聚集
加速Ⅱa 形成
使纤维蛋白 网收缩
9
血小板能维持血管壁稳定性
血小板参与血管内皮的再生和修复过程 增加血管壁的抵抗力 减低血管壁的通透性和脆性。
10
血小板止血功能
粘附、聚集在血管破损处，形成白色血栓
释放活性物质，促进血小板聚集，增强血管收 缩
促进凝血过程 血块收缩，形成稳固血栓 维持血管壁的完整性，毛细血管的通透性
20
流式细胞术
全血法流式细胞术原理： 流式细胞仪能快速测定大量个体细胞的特性。样品中欲分 析的细胞预先进行荧光标记,然后由压缩氮经硅管送达标本 室,再以5000～10000个细胞/秒的速率逐个射入光敏感区。 在适当波长的激发光作用下,被特殊染色的细胞发射出一定 量的荧光脉冲讯号。
21
流式细胞术优势与劣势
血管壁和血小板相互作用
高度怀疑血管因素异常时才做Ⅼ
[参考值]BT测定器法 6.9±2.1min >9min
为延长
6
出血时间意义
BT延长 血小板明显 <50109/L 血小板功能异常：血小板无力症或药物 影响（如阿斯匹林、潘生丁） 血管壁异常：遗传性毛细血管扩张症 严重缺乏血浆某些凝血因子，血管性假性血友病（VWD）、 DIC
13
血小板计数优势与劣势
优点：是目前普遍应用的针对血小板检测最简 便快捷的方法 弊端：只能提示血小板数量变化，与血小板各 功能不明显相关，当出于对凝血过程中血小 板功能探查目的时，常常并不直观。
14
透光率比浊法血小板聚集
方法原理： 检测富血小板血浆在各种激动剂作用下发生血小板聚集或形成 血凝块后透光率的变化
优势： 能在较接近受检者体内情况的条件下测定血小板功能 不受其他种类细胞或碎片的干扰。 可检测出活化的血小板聚集亚群 劣势： 检测费用高 仪器操作复杂 无法在床旁完成检测
22
检测内容
血栓及出血、止血检测是临床血液学检查中重要组成 部分，一般包括： 血管壁检测 血小板检测 凝血因子检测 纤溶活性检测 血流变学检测
3
血管壁的作用
血管壁在出凝血过程中的作用表现为:
血管的收缩
血Βιβλιοθήκη Baidu板的激活
凝血系统的激活
局部血粘度的增高
4
血管壁检查
常用筛选试验如下：
毛细血管抵抗力试验（CRP）
出血时间（BT）
血块收缩试验(CRT)
5
出血时间测定
出血时间测定
将皮肤毛细血管刺破后，血液自然流出到自
然停止所需的时间称为出血时间(BT) 。主要反映
BT缩短
某些严重高凝状态或血栓性疾病
7
检测内容
血栓及出血、止血检测是临床血液学检查中重要组成 部分，一般包括： 血管壁检测 血小板检测 凝血因子检测 纤溶活性检测 血流变学检测
8
血小板在凝血中的作用
血管受损 vWF 血小板黏附 Fig PLT释放(5-HT ADP) PLT聚集 (Ⅰ)