2017年初级检验技师《微生物检验》讲义第16章弯曲菌属和螺杆菌属及检验
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弯曲菌属和螺杆菌属及检验
一、弯曲菌属
是一类微需氧,不分解糖类,氧化酶阳性,菌体弯曲呈逗点状、S形或螺旋状,有动力的革兰阴性菌。
包括5个种和5个亚种。
对人类致病的主要是空肠弯曲菌和胎儿弯曲菌胎儿亚种。
前者是人类腹泻最常见的病原菌之一,后者在免疫功能低下时可引起败血症、脑膜炎等。
(一)生物学特性
1.形态染色革兰阴性、细长、螺旋形或海鸥展翅状、S形的弯曲杆菌。
陈旧培养物可呈球形或长丝状。
一端或两端具有单鞭毛,运动活泼。
一端单鞭毛多见于胎儿亚种,两端单鞭毛多见于空肠弯曲菌,无芽胞,无荚膜。
2.培养特性微需氧菌,初次分离时需在含5%O2、85%N2、10%CO2气体环境中生长,传代培养时能在10%C02环境中生长。
最适生长温度随菌种而异。
空肠弯曲菌、大肠弯曲菌在43℃生长,25℃不生长;胎儿弯曲菌在25℃生长,而43℃不生长;简明弯曲菌在25℃和43℃均不生长。
但各种菌在37℃皆可生长。
生长温度的差异可用于菌种鉴别。
营养要求高,需加入血液、血清才能生长。
空肠弯曲菌初次分离时可形成两种菌落:一种为扁平、湿润、灰白色、半透明、边缘不整齐的菌落;另一种为圆形、凸起、半透明、针尖状、有光泽、单个细小菌落。
两种菌落均不溶血。
3.生化反应本属细菌生化反应不活泼。
不分解糖类、不液化明胶、不分解尿素,V-P和甲基红试验均阴性。
氧化酶均为阳性,大多数弯曲菌能还原硝酸盐、触酶试验为阳性,空肠弯曲菌马尿酸水解试验阳性。
4.抗原结构有菌体(O)抗原、热不稳定抗原和鞭毛(H)抗原。
根据O抗原可将空肠弯曲菌分为42个血清型。
5.抵抗力抵抗力较弱,56℃5分钟即被杀死。
干燥环境中仅能存活3小时。
(二)微生物检验
1.标本采集
2.检验方法及鉴定
(1)直接涂片
1)悬滴标本检查:取新鲜粪便置载玻片上,加生理盐水少许混合后,上覆盖玻片置显微镜下观察有无投镖式或螺旋状运动的细菌。
2)革兰染色检查:为革兰阴性逗点状、S形或螺旋状小杆菌。
(2)分离培养:粪便和肛拭子标本直接接种于改良弯曲菌琼脂平板如改良的Skirrow血琼脂平板和Campy-BAP平板;血液或脑脊液标本接种肉汤增菌后,转种弯曲菌分离培养基,置43℃、37℃,在微需氧环境下培养24~72h,观察菌落特征。
(3)鉴定
1)属的鉴定特征:革兰阴性细小弯曲杆菌,单鞭毛、运动活泼,微需氧,在弯曲菌选择培养基上形成两种类型菌落。
不分解葡萄糖。
弯曲菌属的鉴定要点为氧化酶阳性,革兰阴性,菌体弯曲或呈S形。
最常用的鉴定试验有生长温度(25℃、37℃、43℃)试验、过氧化氢酶试验、马尿酸盐水解试验、硝酸盐和亚硝酸盐还原试验、硫化氢试验等。
2)种和亚种鉴定:见表
二、幽门螺杆菌属
是一类氧化酶和过氧化氢酶均阳性、微需氧、在37℃能够生长,42℃少数生长的革兰阴性弯曲的细菌。
能引起人类疾病的主要是幽门螺杆菌。
(一)生物学性状
革兰阴性,菌体细长弯曲呈螺旋形、S形或海鸥状,菌体-端或两端可有多根鞭毛。
运动活泼。
微需氧,在5%O2、85%N2、10%CO2的环境中生长良好。
氧化酶、触酶均阳性,快速脲酶试验强阳性。
(二)临床意义
HP是非自身免疫性慢性胃炎的致病菌,与消化性溃疡,尤其是十二指肠溃疡有密切关系。
HP感染还可能是引起胃癌的危险因子。
(三)微生物检查
1.标本采集从多部位采集胃黏膜活检标本。
2.检验方法
(1)快速诊断:直接染色镜检,快速脲酶分解试验,碳标记呼吸试验,血清学诊断,分子生物学技术。
(2)分离培养鉴定,用选择性培养基和非选择性培养基放在微需氧和湿润的环境中,35℃孵育3~4d,挑选出细小、针尖大小、半透明的、不溶血的可疑菌落,作生化鉴定。
【习题】
分离霍乱弧菌应选择的培养基是
A.血清肉汤
B.肉浸液
C.碱性蛋白胨水
D.庖肉培养基
E.葡萄糖蛋白胨水
『正确答案』C
『答案解析』分离霍乱弧菌应选择的培养基是碱性蛋白胨水。
弧形科细菌不包括下列哪一菌属
A.弯曲菌属
B.气单胞菌属
C.邻单胞菌属
D.发光杆菌属
E.弧菌属
『正确答案』A
『答案解析』弯曲菌属不属于弧菌科细菌。
关于弧菌的叙述,下列哪项是错误的
A.革兰阴性
B.耐碱不耐酸
C.一端具有单鞭毛而运动活泼
D.菌体短小,弯曲成弧形或逗点形
E.营养要求高,仅在含葡萄糖的培养基上生长良好『正确答案』E
『答案解析』营养要求不高,普通培养基上生长良好。
弧菌科中尚未发现对人有致病性的是
A.发光杆菌属
B.气单胞菌属
C.邻单胞菌属
D.弧菌属
E.螺杆菌属
『正确答案』A
『答案解析』发光杆菌属尚未发现对人有致病性。
霍乱患者的典型大便呈
A.水样
B.果酱样
C.脓血样
D.米泔水样
E.消化不良的恶臭便
『正确答案』D
『答案解析』霍乱患者的典型大便呈米泔水样。
剧烈腹泻和呕吐
“米泔水”样便
烦躁,声嘶,口渴
霍乱面容:眼窝深陷,两颊深凹
霍乱弧菌的生物学性状,错误的是
A.无嗜盐性
B.耐碱不耐酸
C.耐酸不耐碱
D.革兰阴性、呈弧形
E.极端单鞭毛,运动活泼
『正确答案』C
用于霍乱弧菌培养的培养基是
A.碱性蛋白胨水
B.碱性琼脂平板
C.庆大霉素平板
D.TCBS
E.以上均可
『正确答案』E
与副溶血性弧菌特征不符的是
A.革兰阴性杆状或弧状
B.有单根鞭毛、运动活泼
C.存在于沿岸的海水或海产品中
D.嗜盐,在无盐的培养基中也可生长
E.引起食物中毒
『正确答案』D
幽门螺杆菌感染的快速诊断
A.葡萄糖发酵试验
B.硫化氢试验
C.尿素酶试验
D.胆汁溶菌试验
E.明胶液化试验
『正确答案』C
与人类慢性胃炎、胃溃疡、十二指肠溃疡及胃癌有关的是
A.大肠埃希菌
B.幽门螺杆菌
C.空肠弯曲菌
D.志贺菌
E.沙门菌
『正确答案』B
副溶血性弧菌在下列哪种培养基中不生长
A.SS琼脂平板
B.血液琼脂平板
C.3.5%NaCl琼脂平板
D.3.5%NaCl蛋白胨水
E.无盐培养基
『正确答案』E
对人致病性的弧菌是
A.副溶血性弧菌
B.溶藻弧菌
C.河弧菌
D.创伤弧菌
E.麦氏弧菌
『正确答案』A
区别幽门螺杆菌与弯曲菌的主要依据是
A.染色性特点
B.形态特点
C.尿素酶试验
D.动力试验
E.氧化酶试验
『正确答案』C
暗视野显微镜观察出流星样运动的细菌是
A.霍乱弧菌
B.金黄色葡萄球菌
C.大肠埃希菌
D.不动杆菌
E.链球菌
『正确答案』A
副溶血性弧菌与霍乱弧菌在TCBS培养基上形成不同颜色的菌落的原因是不分解
A.葡萄糖
B.麦芽糖
C.甘露醇
D.乳糖
E.蔗糖
『正确答案』E
快速脲酶试验强阳性的细菌是
A.变形杆菌
B.幽门螺杆菌
C.沙门菌
D.志贺菌
E.大肠埃希菌
『正确答案』B。