预习报告-实验15- 药物对离体豚鼠回肠的作用

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实验15 药物对离体豚鼠回肠的作用

实验日期:3月8日时间:温度:组员:受试对象:豚鼠性别:离体器官:回肠

【目的】

了解胆碱能神经递质乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)和局部炎症介质组胺(histamine)对肠道平滑肌M胆碱受体和H1受体的激动作用,以及它们的受体拮抗剂阿托品(atropine)和扑尔敏(chlorpheniramine)的阻断作用。

【原理】

消化道平滑肌与骨骼肌、心肌一样,具有肌肉组织共有的特性,如兴奋性.传导性和收缩性等。但消化道平滑肌兴奋性较低,收缩缓慢,富有伸展性,具有紧张性、自动节律性,对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等特点。给予离体肠肌以接近于在体情况的适宜环境,消化道平滑肌仍可保持良好的生理特性。

胃肠道、膀胱等平滑肌以胆碱能神经占优势,小剂量或低浓度的ACh即能激动M胆碱受体,产生与兴奋胆碱能神经节后纤维相似的作用,兴奋胃肠道平滑肌。Atropine与胆碱受体结合而本身不产生或较少产生拟胆碱作用,却能阻断胆碱能递质或拟胆碱药物与受体的结合,从而产生抗胆碱作用。Histamine对多种动物的胃肠道和气道平滑肌H1受体有兴奋作用,豚鼠尤其敏感。Chlorpheniramine为H1受体拮抗剂,能阻断histamine与H1受体的结合,从而产生抗histamine作用。

【材料】

豚鼠;麦氏浴槽,超级恒温器,张力换能器,生物信号采集处理系统;台氏溶液,10-2g/L acetylcholine chloride溶液,1g/L atropine sulfate溶液,10-2 g/L histamine phosphate 溶液、10-3 g/L chlorpheniramine溶液、10g/L BaCl2 溶液。

【方法】

1.实验装置准备和仪器参数设置

(1)离体肠管描记装置的准备见图7-15-1,麦氏浴槽中加固定量的台氏液,调节超级恒温器的温度,使麦氏浴槽内温度稳定在37±0.5℃。通气管接95%O2+5%CO2 混合气体管道。用螺丝夹调节气体管道的气体流量,调节至浴槽中气泡一个个逸出为止。

(2)张力换能器固定于铁支柱上,换能器输出线接微机生物信号处理系统,仪器参数设置:RM6240系统:点击“实验”菜单,“自定义实验项目”菜单中的“肠肌记录”。系统进入该实验信号记录状态。仪器参数:通道时间常数为直流,滤波频率10Hz,灵敏度3g,采样频率200Hz,扫描速度1s/div。

2.标本准备

(1)取豚鼠一只,用木槌击其头部致昏死,立即剖开腹腔,找到回盲部,然后,在离回盲部1cm处剪断,取出回肠约10cm左右一段,置于氧饱和的台氏液培养皿中,沿肠壁除去肠系膜,然后将回肠剪成数小段(约1~1.5cm),用5ml注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净,换以新鲜台氏液备用。注意操作时勿牵拉肠段以免影响收缩功能。

(2)取一小段肠管置于盛有台氏液的培养皿中,在其两端对角壁处,分别用缝针穿线,并打结。注意保持肠管通畅,勿使其封闭。肠管一端连线系于浴槽固定钩上,然后放入37℃麦氏浴槽中。再将肠管的另一端系结在张力换能器的悬臂梁上,调节肌张力至2~3g(图7-15-1)。

【观察项目】

1.待离体回肠稳定10~30分钟后,记录一段正常收缩曲线后,依次向麦氏浴槽中滴加下列药物。加入一种药液后,观察2~3分钟,并连续记录肠管收缩曲线,然后用台氏液连续冲洗

二次,待基线恢复到用药前的水平,随后记录一段基线。再加入第二种药液。浴槽液体的容量应相等。

2.加入10-2 g/L ACh 0.2ml,观察并记录其收缩曲线,2~3分钟后换液。

3.重复以上Ach 剂量,待收缩达最高点时,加入1g/L atropine 0.2ml,观察并记录其收缩曲线。不换液,待曲线降至基线或基本稳定后,再加入相同浓度的ACh,观察并记录其收缩曲线。

4.加入10-2 g/L histamine 0.3ml,待作用明显时(1~2分钟),迅速换液。使肠肌张力恢复正常。

5.加入10-3 g/L chlorpheniramine溶液0.2ml 5分钟后(不换液),加入同量histamine,观察并记录其收缩曲线。

6.加入10g/L BaCl2 溶液1ml,观察其反应,当作用达最高点,肠段持续于痉挛收缩状态时,加入1g/L atropine溶液0.2ml(或更大剂量),观察并记录其收缩曲线

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