层析工艺验证PPT
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层析工艺验证
• 简介 • 层析验证的先决条件
– 工艺风险评估 – 原材料 – 工艺特性研究 – 分析方法 – 微生物负载和内毒素控制 – 研发和特性研究文件
• 层析柱工艺验证
– 一致性批次：生产规模验证 – 小规模验证研究 – 验证文件
• 后验证活动
– 持续监测和维护 – 变更控制
目录
简介
• 定义：层析工艺验证是证明层析柱分离工 艺能始终如一的按照批准的方案、既定的 操作参数执行。
层析验证先决条件
• 工艺风险评估
– 工艺开发和特性研究的早期阶段：风险评估可将资源 集中在最有可能对产品质量带来风险的操作参数或杂 质。
– 工艺开发和特性研究的后期阶段：风险评估促使工作 有条不紊。
– 规模放大：回顾所有操作参数和范围，评估和确认潜 在风险，识别缺失数据。风险评估结果可能指出需要 额外的特性研究。
– 工艺相关杂质可能来自发酵（比如核酸、抗生素）或 来自下游工艺（比如蛋白A配基脱落，缓冲液组分）。 检测这些组分的去除，要采用上述研究的物料。另外 ，还可以进行掺标研究，特别是分析方法不适用或不 够灵敏时。
层析验证先决条件
• 最差情况工艺能力：
– 指在正常操作范围内处理极端原料，或者在最宽的可 接受范围内处理正常原料。
使用实验设计（DOE）方法可进行有效地测试。
层析验证先决条件
• 小规模模型
– 如何证明小规模和生产规模的等效性？
• 通常通过在既定参数下多次运行并比较结果来 实现。
• 评估影响工艺一致性的参数，如收率、洗脱图 谱、洗脱体积和/或保留时间
• 评估代表产品质量的参数，如样品纯度、工艺 相关和宿主细胞相关杂质的水平。
层析验证先决条件
• 工艺特性研究
– 目的：建立工艺知识，包括可接受范围、设计空间、 失败边缘。
– 工艺特性研究要获取设定范围内的工艺操作参数（输 入）是如何影响工艺性能（输出）的，据此鉴定关键 操作参数、定义目标设定点和可接受范围。
– 工艺特性研究主要采用小规模研究。通过各种统计学 方法设计实验，以更少的实验获得更多的数据。
– 工艺开发和特性研究完成后，关键步骤过程控制知识 建立后：识别和分级潜在工艺风险，必要情况下，可 开发一个降低风险的措施。
层析验证先决条件
• 原材料
– 建立原材料质量标准和供应商变更控制程序。 – 正式工艺验证之前，原材料应经过确认。 – 层析填料有一些独特因素：通常是单一来源，很少有
备用填料能执行同一功能，没有法定标准，对工艺结 果有极高的影响。 – 层析不应采用动物源性的原材料。
层析验证活动
临床阶段
支持活动
-——开始工艺和分析方法开发
层析工艺开发—— （选择工艺步骤，定义基本工艺）
——定义填料和原材料规格
——开始临床生产
开始病毒去除研究——
1
——临床试验法规授权
确定临床质量属性——
开始工艺特性研究—— （定义操作参数，探索工艺范围）
2
——确认或验证分析方法
每个步骤的稳健性——
层析验证先决条件
• 研发和特性研究文件
– 经批准的研究文件是工艺验证方案的基础。研发和特性研究活动 应该按照公司的政策进行记录、审核、批准。这些文档必须全部 都能追溯到原始数据。转让文件（比如从研发者转让给商业操作 者）可以参考这些信息，研究报告必须总结早期研究成果并描述 工艺原理。这些研究可作为工艺特性研究的出发点。工艺特性研 究要按照质量部依据公司政策批准的方案执行。 。
层析验证先决条件
• 工艺差异性：
– 一些工艺条件和保存时间会影响产品质量。例如，蛋 白A采用亲和层析，低pH洗脱可能会导致样品发生聚合 ，或是离子交换层析时高pH可能会导致样品大量脱氨 化。在这两种情况中，必须证明在保存期限内，下游 工艺步骤可以将这些变异体降低至可接受水平。
层析验证先决条件
• 工艺相关杂质：
层析验证先决条件
• 工艺特性研究
– 在项目开发的早期阶段（如临床I期前），可以只开发 层析步骤，不定义最佳操作范围。当产品即将获得许 可，再来优化生产的操作参数。
– 特性研究的基础：设备和设施的能力、已开发的工艺 、理论知识、以往经验、供应商建议、文献、生产历 史。
层析验证先决条件
• 工艺特性研究
层析柱工艺验证
• 一致性批次通常要进行以下研究：
– 操作参数控制 – 层析柱性能控制 – 杂质去除 – 微生物负载和内毒素控制 – 层析柱清洗和再生 – 保存
层析柱工艺验证
• 操作参数的控制
– 一致性批次生产时，操作参数要在设定点运行而且要 确认它们始终在各自规定的范围内。
– 通常，操作范围窄的设备需要更精细的控制和监测程 序。
层析验证先决条件
• 分析方法
– 纯化的目的是去除工艺相关杂质、产品相关杂质和污染物。因此 在层析验证研究中使用的分析方法应当能够可靠的检测和定量这 些物质在不同缓冲体系中的预期范围。要适当控制这些方法以保 证结果可靠。用于特定时期的分析方法，比如验证研究，应证明 它们适用于预期目的（比如灵敏度、线性、精度、准确度）来确 认。用于日常检测的分析方法也应验证
层析柱工艺验证
• 层析柱性能监测
– 一般认为回顾色谱图是定性，要争取将峰形比较定量化。可以分 析几个特征，如保留时间（或体积），峰面积（要在检测器的线 性范围内），和峰对称性。穿透上样法测柱效是一个准确且灵敏 的工具，用于监测层析柱性能和填料完整性。此外，色谱图出现 的任何异常变化都要记录和调查，如峰/谷/双肩的数量和形状。目 的是发现和识别层析文件不符常规的地方。由于变化会受到诸如 原料等的影响，因此在评价色谱图时要比较定性和定量限度。
层析柱工艺验证
验证研究的规模
研究
小规模
层析柱寿命
前验证
填料清洗
前验证
病毒去除验证
只适用于小规模
一致性批次
否
杂质清除
前验证
峰形研究
只适用于小规模
生产规模 小规模的确认 小规模的确认 不适用 是 一致性批次/确认 不适用
层析柱工艺验证
– 当有类似设备或步骤，大部分公司会根据单元操作进 行验证。另一种方法是依据前验证的数据进行模块化 验证。每个单元操作都应该单独考虑。设计验证研究 时，要考虑每个单元操作的功能。
窄范围（和/或难控制）
层析验证先决条件
宽范围（和/或易控制）
关键参数
非关键参数
为了不影响产品的关键质量属 工艺参数可以在较宽的范围
性，工艺参数必须保持在一个窄 内调节，很好控制，但在极端
质量 的范围内
情况下会影响质量
比如：洗脱液变化（如缓冲梯 度）导致高聚合或增加杂质水平
比如：柱子冲洗体积
工艺
重要参数 工艺参数必须保持在较窄范围 内，以保证操作稳定性
层析验证先决条件
• 微生物负载和内毒素控制
– 层析步骤一般不在无菌条件下进行，因此必须适当控制微生物负 载。在选择填料、清洗液、保存条件和工艺设备时,必须考虑生物 负载控制。一旦有微生物（比如芽孢子类细菌）繁殖，填料将很 难消毒。因此工艺设计时要避免引入微生物污染，这是很重要的 。额外的控制并不少见。
层析验证先决条件
• 内源性变化
– 由于细胞培养/发酵的生物差异，原料会变化。这会导 致产品效价、质量和宿主细胞杂质水平、或工艺相关 杂质（细胞培养基成分）等的变化。
– 样品长时间存放也会导致产品变化。 – 围绕设定点波动的动态工艺控制也会带来变化。 – 在极端条件下（由特性研究确定）运行，结果会有极
层析柱工艺验证
• 操作参数的控制
– 提前配制浓缩液，再通过计量泵或比例调节阀来稀释 ，会使工艺更加复杂且需要额外的监测。
– 梯度洗脱工艺，在柱前或混合器后通常有额外的传感 器来反馈控制，如UV，pH，电导率，或近红外光谱水 平。
– 若工艺要求偏离室温操作，需要监测热交换器两端或 中间体储罐的温度。
层析验证先决条件
• 微生物负载和内毒素控制
– 通常，柱子使用后经消毒再用抑菌剂保存。产品和平 衡液的制备和储存应尽量减少微生物的引入。层析系 统的设计应有助于生物负载控制，比如，必须避免不 必要的仪表、阀门和死体积。在工艺开发时，必须确 定有效的柱子消毒程序，在生产规模一致性批次时进 行确认，并且在日常工艺中监测。
1 cm 18 cm 14 mL 10,000
Flow rate流速
150 cm/h = 19.6 L/min 150 cm/h = 2 mL/min
Load density载量
40 mg/mL
40 mg/mL
层析验证先决条件
• 操作参数的识别和分级
– 为了建立低风险的工艺控制策略并将验证集中 于保持产品质量，把操作参数分为四类：
– 在工艺的所有阶段都要评价柱层析的参数：平衡、上 样、冲洗、洗脱、再生、清洗和保存
层析柱工艺验证
• 操作参数的控制
– 建立层析柱时，部分参数就确定了，比如柱高、柱体积和各类填 料的柱效。
– 层析操作时通常还要监测其它的参数，包括流速、保留时间、操 作压力、过柱的溶液体积、PH、电导、温度以及工艺时间。例如 ，采用在线检测来分段收集样品，决定哪部分样品要收集的标准 通常是关键操作参数。
层析柱工艺验证
• 层析柱性能监测
– 一致性批次生产比日常生产需要更多的监测和取样。 – 层析柱性能通过分析输出参数来监测的（如色谱图，
运行记录，完整步骤的确认，收率），以此来保证产 品质量和杂质水平在可接受的范围内
层析柱工艺验证
• 层析柱性能监测
– 层析用于各种分离，每个分离都应取样分析，证明该 步的目的已达到。分析应能证明产品和杂质按照预期 进行分离。这对于那些影响最终产品安全性、效价和 效力的特定杂质特别重要。因此要证明这些杂质能始 终如一地被去除。
层析柱工艺验证
• 一致性批次：生产规模验证
– 在一致性批次研究开始前，要建立有操作参数的批生产记录并通 过批准。这些操作参数来源于研发实验、特性研究以及早期的临 床生产经验。
– 一致性批次生产的指标和范围通常和商业化批次一样。他们的主 要目的是，在生产环境下，工艺符合可接受标准。一致性批次生 产时，取样和分析都要在验证方案中定义。数据要记录，在报告 中分析，并与可接受标准进行比较。验证报告也要分析偏差，以 及和验证方案或批生产记录不符合的地方。
非重要参数 工艺参数可以在较宽的范围 内调节，很好控制，但在极端 情况下会影响工艺性能
比如：层析柱流速变化导致载 量下降，而不影响药物质量或杂 质去除
比如：层析柱冲洗流速
层析验证先决条件
• 工艺稳健性
– 定义：工艺稳健性是指工艺在一个较宽的操作 范围下，能始终如一且可靠地生产出符合预定 指标的产品。一个稳健的纯化工艺不受内源性 变化的影响。
– 特性研究应集中于影响层析性能的参数。例如，在离 子交换操作，应评估上样蛋白的pH和离子强度、冲洗 和洗脱条件、上样载量的影响。其他运行参数的范围 （例如，温度、装柱情况、或清洗条件），可能对工 艺性能的影响较小。它们也应进行测试，以建立一个 稳定的工艺。
层析验证先决条件
• 工艺特性研究
– 最终选定的范围应该跨越设备的已知变化和偏离。 – 参数的相互作用，可能会对性能产生多因素的影响，
层析验证先决条件
举例：疏水层析，小规模和生产规模输入参数比较
Parameter 参数
Production Column 生产型层析柱
Small-Scale Column 小规模层析柱
Diameter直径
100 cm
Bed height柱床高
18 cm
Bed volume柱体积
141,372 mL
Scale Down Factor缩小 — 系数
– 并非所有参数都与工艺直接相关，比如说最大操作压力通常受制 于层析柱。
层析柱工艺验证
• 操作参数的控制
– 下游操作通常要使用各种溶液如工艺缓冲液、病毒灭 活溶液和层析柱再生/消毒溶液。溶液参数如PH和电导 在制备和保存时可能会变化，但是在使用期间都应该 保持在可接受范围内。
– 溶液必须按照批生产记录进行配制并有适当的过程控 制。
生产规模设备确认IQ/OQ——
3
执行小规模寿命验证和清洁研究——
产品追加病毒去除研究——
执行生产规模验证——
——一致性批次生产
——提交生产许可申请
持续改进，变更控制，偏差管理——
——获得生产许可批准
生产规模填料寿命确认——
——执行持续工艺监测
简介பைடு நூலகம்
简介
• 以上是理想状态，不同项目的活动和顺序 是可变的
大差异。
层析验证先决条件
• 在定义工艺设计空间时，要考虑以下几点：
– 原料差异性 – 工艺差异性 – 工艺相关杂质 – 最差情况工艺能力
层析验证先决条件
• 原料差异性：
– 为了有效的评估正常发酵/细胞培养差异性（效价、产 品变异、宿主细胞杂质、工艺相关杂质、粘度）的影 响，可能的话要测试多批原料。
• 简介 • 层析验证的先决条件
– 工艺风险评估 – 原材料 – 工艺特性研究 – 分析方法 – 微生物负载和内毒素控制 – 研发和特性研究文件
• 层析柱工艺验证
– 一致性批次：生产规模验证 – 小规模验证研究 – 验证文件
• 后验证活动
– 持续监测和维护 – 变更控制
目录
简介
• 定义：层析工艺验证是证明层析柱分离工 艺能始终如一的按照批准的方案、既定的 操作参数执行。
层析验证先决条件
• 工艺风险评估
– 工艺开发和特性研究的早期阶段：风险评估可将资源 集中在最有可能对产品质量带来风险的操作参数或杂 质。
– 工艺开发和特性研究的后期阶段：风险评估促使工作 有条不紊。
– 规模放大：回顾所有操作参数和范围，评估和确认潜 在风险，识别缺失数据。风险评估结果可能指出需要 额外的特性研究。
– 工艺相关杂质可能来自发酵（比如核酸、抗生素）或 来自下游工艺（比如蛋白A配基脱落，缓冲液组分）。 检测这些组分的去除，要采用上述研究的物料。另外 ，还可以进行掺标研究，特别是分析方法不适用或不 够灵敏时。
层析验证先决条件
• 最差情况工艺能力：
– 指在正常操作范围内处理极端原料，或者在最宽的可 接受范围内处理正常原料。
使用实验设计（DOE）方法可进行有效地测试。
层析验证先决条件
• 小规模模型
– 如何证明小规模和生产规模的等效性？
• 通常通过在既定参数下多次运行并比较结果来 实现。
• 评估影响工艺一致性的参数，如收率、洗脱图 谱、洗脱体积和/或保留时间
• 评估代表产品质量的参数，如样品纯度、工艺 相关和宿主细胞相关杂质的水平。
层析验证先决条件
• 工艺特性研究
– 目的：建立工艺知识，包括可接受范围、设计空间、 失败边缘。
– 工艺特性研究要获取设定范围内的工艺操作参数（输 入）是如何影响工艺性能（输出）的，据此鉴定关键 操作参数、定义目标设定点和可接受范围。
– 工艺特性研究主要采用小规模研究。通过各种统计学 方法设计实验，以更少的实验获得更多的数据。
– 工艺开发和特性研究完成后，关键步骤过程控制知识 建立后：识别和分级潜在工艺风险，必要情况下，可 开发一个降低风险的措施。
层析验证先决条件
• 原材料
– 建立原材料质量标准和供应商变更控制程序。 – 正式工艺验证之前，原材料应经过确认。 – 层析填料有一些独特因素：通常是单一来源，很少有
备用填料能执行同一功能，没有法定标准，对工艺结 果有极高的影响。 – 层析不应采用动物源性的原材料。
层析验证活动
临床阶段
支持活动
-——开始工艺和分析方法开发
层析工艺开发—— （选择工艺步骤，定义基本工艺）
——定义填料和原材料规格
——开始临床生产
开始病毒去除研究——
1
——临床试验法规授权
确定临床质量属性——
开始工艺特性研究—— （定义操作参数，探索工艺范围）
2
——确认或验证分析方法
每个步骤的稳健性——
层析验证先决条件
• 研发和特性研究文件
– 经批准的研究文件是工艺验证方案的基础。研发和特性研究活动 应该按照公司的政策进行记录、审核、批准。这些文档必须全部 都能追溯到原始数据。转让文件（比如从研发者转让给商业操作 者）可以参考这些信息，研究报告必须总结早期研究成果并描述 工艺原理。这些研究可作为工艺特性研究的出发点。工艺特性研 究要按照质量部依据公司政策批准的方案执行。 。
层析验证先决条件
• 工艺差异性：
– 一些工艺条件和保存时间会影响产品质量。例如，蛋 白A采用亲和层析，低pH洗脱可能会导致样品发生聚合 ，或是离子交换层析时高pH可能会导致样品大量脱氨 化。在这两种情况中，必须证明在保存期限内，下游 工艺步骤可以将这些变异体降低至可接受水平。
层析验证先决条件
• 工艺相关杂质：
层析验证先决条件
• 工艺特性研究
– 在项目开发的早期阶段（如临床I期前），可以只开发 层析步骤，不定义最佳操作范围。当产品即将获得许 可，再来优化生产的操作参数。
– 特性研究的基础：设备和设施的能力、已开发的工艺 、理论知识、以往经验、供应商建议、文献、生产历 史。
层析验证先决条件
• 工艺特性研究
层析柱工艺验证
• 一致性批次通常要进行以下研究：
– 操作参数控制 – 层析柱性能控制 – 杂质去除 – 微生物负载和内毒素控制 – 层析柱清洗和再生 – 保存
层析柱工艺验证
• 操作参数的控制
– 一致性批次生产时，操作参数要在设定点运行而且要 确认它们始终在各自规定的范围内。
– 通常，操作范围窄的设备需要更精细的控制和监测程 序。
层析验证先决条件
• 分析方法
– 纯化的目的是去除工艺相关杂质、产品相关杂质和污染物。因此 在层析验证研究中使用的分析方法应当能够可靠的检测和定量这 些物质在不同缓冲体系中的预期范围。要适当控制这些方法以保 证结果可靠。用于特定时期的分析方法，比如验证研究，应证明 它们适用于预期目的（比如灵敏度、线性、精度、准确度）来确 认。用于日常检测的分析方法也应验证
层析柱工艺验证
• 层析柱性能监测
– 一般认为回顾色谱图是定性，要争取将峰形比较定量化。可以分 析几个特征，如保留时间（或体积），峰面积（要在检测器的线 性范围内），和峰对称性。穿透上样法测柱效是一个准确且灵敏 的工具，用于监测层析柱性能和填料完整性。此外，色谱图出现 的任何异常变化都要记录和调查，如峰/谷/双肩的数量和形状。目 的是发现和识别层析文件不符常规的地方。由于变化会受到诸如 原料等的影响，因此在评价色谱图时要比较定性和定量限度。
层析柱工艺验证
验证研究的规模
研究
小规模
层析柱寿命
前验证
填料清洗
前验证
病毒去除验证
只适用于小规模
一致性批次
否
杂质清除
前验证
峰形研究
只适用于小规模
生产规模 小规模的确认 小规模的确认 不适用 是 一致性批次/确认 不适用
层析柱工艺验证
– 当有类似设备或步骤，大部分公司会根据单元操作进 行验证。另一种方法是依据前验证的数据进行模块化 验证。每个单元操作都应该单独考虑。设计验证研究 时，要考虑每个单元操作的功能。
窄范围（和/或难控制）
层析验证先决条件
宽范围（和/或易控制）
关键参数
非关键参数
为了不影响产品的关键质量属 工艺参数可以在较宽的范围
性，工艺参数必须保持在一个窄 内调节，很好控制，但在极端
质量 的范围内
情况下会影响质量
比如：洗脱液变化（如缓冲梯 度）导致高聚合或增加杂质水平
比如：柱子冲洗体积
工艺
重要参数 工艺参数必须保持在较窄范围 内，以保证操作稳定性
层析验证先决条件
• 微生物负载和内毒素控制
– 层析步骤一般不在无菌条件下进行，因此必须适当控制微生物负 载。在选择填料、清洗液、保存条件和工艺设备时,必须考虑生物 负载控制。一旦有微生物（比如芽孢子类细菌）繁殖，填料将很 难消毒。因此工艺设计时要避免引入微生物污染，这是很重要的 。额外的控制并不少见。
层析验证先决条件
• 内源性变化
– 由于细胞培养/发酵的生物差异，原料会变化。这会导 致产品效价、质量和宿主细胞杂质水平、或工艺相关 杂质（细胞培养基成分）等的变化。
– 样品长时间存放也会导致产品变化。 – 围绕设定点波动的动态工艺控制也会带来变化。 – 在极端条件下（由特性研究确定）运行，结果会有极
层析柱工艺验证
• 操作参数的控制
– 提前配制浓缩液，再通过计量泵或比例调节阀来稀释 ，会使工艺更加复杂且需要额外的监测。
– 梯度洗脱工艺，在柱前或混合器后通常有额外的传感 器来反馈控制，如UV，pH，电导率，或近红外光谱水 平。
– 若工艺要求偏离室温操作，需要监测热交换器两端或 中间体储罐的温度。
层析验证先决条件
• 微生物负载和内毒素控制
– 通常，柱子使用后经消毒再用抑菌剂保存。产品和平 衡液的制备和储存应尽量减少微生物的引入。层析系 统的设计应有助于生物负载控制，比如，必须避免不 必要的仪表、阀门和死体积。在工艺开发时，必须确 定有效的柱子消毒程序，在生产规模一致性批次时进 行确认，并且在日常工艺中监测。
1 cm 18 cm 14 mL 10,000
Flow rate流速
150 cm/h = 19.6 L/min 150 cm/h = 2 mL/min
Load density载量
40 mg/mL
40 mg/mL
层析验证先决条件
• 操作参数的识别和分级
– 为了建立低风险的工艺控制策略并将验证集中 于保持产品质量，把操作参数分为四类：
– 在工艺的所有阶段都要评价柱层析的参数：平衡、上 样、冲洗、洗脱、再生、清洗和保存
层析柱工艺验证
• 操作参数的控制
– 建立层析柱时，部分参数就确定了，比如柱高、柱体积和各类填 料的柱效。
– 层析操作时通常还要监测其它的参数，包括流速、保留时间、操 作压力、过柱的溶液体积、PH、电导、温度以及工艺时间。例如 ，采用在线检测来分段收集样品，决定哪部分样品要收集的标准 通常是关键操作参数。
层析柱工艺验证
• 层析柱性能监测
– 一致性批次生产比日常生产需要更多的监测和取样。 – 层析柱性能通过分析输出参数来监测的（如色谱图，
运行记录，完整步骤的确认，收率），以此来保证产 品质量和杂质水平在可接受的范围内
层析柱工艺验证
• 层析柱性能监测
– 层析用于各种分离，每个分离都应取样分析，证明该 步的目的已达到。分析应能证明产品和杂质按照预期 进行分离。这对于那些影响最终产品安全性、效价和 效力的特定杂质特别重要。因此要证明这些杂质能始 终如一地被去除。
层析柱工艺验证
• 一致性批次：生产规模验证
– 在一致性批次研究开始前，要建立有操作参数的批生产记录并通 过批准。这些操作参数来源于研发实验、特性研究以及早期的临 床生产经验。
– 一致性批次生产的指标和范围通常和商业化批次一样。他们的主 要目的是，在生产环境下，工艺符合可接受标准。一致性批次生 产时，取样和分析都要在验证方案中定义。数据要记录，在报告 中分析，并与可接受标准进行比较。验证报告也要分析偏差，以 及和验证方案或批生产记录不符合的地方。
非重要参数 工艺参数可以在较宽的范围 内调节，很好控制，但在极端 情况下会影响工艺性能
比如：层析柱流速变化导致载 量下降，而不影响药物质量或杂 质去除
比如：层析柱冲洗流速
层析验证先决条件
• 工艺稳健性
– 定义：工艺稳健性是指工艺在一个较宽的操作 范围下，能始终如一且可靠地生产出符合预定 指标的产品。一个稳健的纯化工艺不受内源性 变化的影响。
– 特性研究应集中于影响层析性能的参数。例如，在离 子交换操作，应评估上样蛋白的pH和离子强度、冲洗 和洗脱条件、上样载量的影响。其他运行参数的范围 （例如，温度、装柱情况、或清洗条件），可能对工 艺性能的影响较小。它们也应进行测试，以建立一个 稳定的工艺。
层析验证先决条件
• 工艺特性研究
– 最终选定的范围应该跨越设备的已知变化和偏离。 – 参数的相互作用，可能会对性能产生多因素的影响，
层析验证先决条件
举例：疏水层析，小规模和生产规模输入参数比较
Parameter 参数
Production Column 生产型层析柱
Small-Scale Column 小规模层析柱
Diameter直径
100 cm
Bed height柱床高
18 cm
Bed volume柱体积
141,372 mL
Scale Down Factor缩小 — 系数
– 并非所有参数都与工艺直接相关，比如说最大操作压力通常受制 于层析柱。
层析柱工艺验证
• 操作参数的控制
– 下游操作通常要使用各种溶液如工艺缓冲液、病毒灭 活溶液和层析柱再生/消毒溶液。溶液参数如PH和电导 在制备和保存时可能会变化，但是在使用期间都应该 保持在可接受范围内。
– 溶液必须按照批生产记录进行配制并有适当的过程控 制。
生产规模设备确认IQ/OQ——
3
执行小规模寿命验证和清洁研究——
产品追加病毒去除研究——
执行生产规模验证——
——一致性批次生产
——提交生产许可申请
持续改进，变更控制，偏差管理——
——获得生产许可批准
生产规模填料寿命确认——
——执行持续工艺监测
简介பைடு நூலகம்
简介
• 以上是理想状态，不同项目的活动和顺序 是可变的
大差异。
层析验证先决条件
• 在定义工艺设计空间时，要考虑以下几点：
– 原料差异性 – 工艺差异性 – 工艺相关杂质 – 最差情况工艺能力
层析验证先决条件
• 原料差异性：
– 为了有效的评估正常发酵/细胞培养差异性（效价、产 品变异、宿主细胞杂质、工艺相关杂质、粘度）的影 响，可能的话要测试多批原料。