感染性疾病与感染免疫检测

第二十二章感染性疾病与感染免疫检测

感染是病原体以某种传播形式从传染源传播到易感者，并在宿主体生长繁殖、释放毒素或导致机体微生态平衡失调的病理生理过程。

大多数病原体是由外界侵入的，受病原体侵袭力、致病力及宿主免疫状态等多种因素的影响，其破坏人体的微生态平衡后产生各种不同的感染谱，出现感染性疾病。

感染性疾病的早期诊断临床上最为常用的是病原体抗原检测和宿主血清抗体检测。IgM类抗体出现早，消失快，常作为感染的早期诊断指标。IgG类抗体出现晚，维持时间长，是流行病学调查的重要根据。

第一节细菌感染性疾病的免疫检测

细胞免疫是抗细胞细菌感染的主要效应机制。体液免疫在抗细胞外细菌感染中发挥主要作用。

一、链球菌感染

（一）链球菌

化脓性链球菌是致病力最强的一种链球菌，能产生多种毒素（链球菌溶血素O和S）、M蛋白、脂磷壁酸、链激酶和透明质酸等致病因子，可引起急性咽炎、呼吸道感染、脓疱疮、皮下软组织感染、心膜炎、脑膜炎和猩红热等。该细菌感染后可致超敏反应性疾病，如风湿热和急性肾小球肾炎等。

链球菌感染最常用的免疫学实验室检查是抗链球菌溶血素“O”（ASO）检测。链球菌溶血素“O”（ASO）是一种具有溶血活性的蛋白质，能溶解人类和一些动物的红细胞，且具有一定的抗原性，能刺激机体产生相应抗体。临床上常采用胶乳凝集试验、免疫散射比浊法检测ASO。免疫功能不全或大量使用肾上腺皮质激素时，ASO水平可不升高。

（二）猪链球菌

猪链球菌感染的主要临床表现包括：①普通型表现：急起高热、畏寒、头痛、头晕、腹痛、腹泻、乏力、不适；②中毒性休克综合征（TSS）表现：除上述表现外，出现菌血症、败血症、DIC指征，包括皮肤瘀斑、出血，血压下降，脉压缩小，继而肝、肾功能不全，呼吸窘迫综合征（ARDS），软组织坏死；③脑膜炎表现：除普通型表现外，有恶心、剧吐、颈项强直、烦躁、昏迷，脑膜刺激征。

猪链球菌的实验室检查有细菌培养、鉴定和免疫学检测等方法。分子诊断技术是鉴定分型诊断方法，常用于猪链球菌的快速诊断以及流行病学调查。免疫学技术主要应用患者血清学鉴定。

二、伤寒沙门菌感染

沙门菌可致多种感染，轻者为自愈性胃肠炎，重者可引起致死性伤寒。伤寒和副伤寒A、B沙门菌引起胃肠炎、菌血症和肠热症等。

伤寒沙门菌感染的实验室诊断主要依赖于免疫学检测方法。

1.肥达反应

为血清凝集试验。产生凝集时抗体效价≥1：80为阳性，或双份血清效价呈4倍以上增长。

2.ELISA

以伤寒沙门菌脂多糖（毒素的主要成分）为抗原，用间接ELISA法检测伤寒患者血清中特异性IgM 抗体，该方法有助于伤寒的早期诊断。

（2ELISA法测定患者血清中的Vi抗体，有助于检出伤寒带菌者及慢性带菌者。

三、结核分枝杆菌感染

抗体反应。

细胞免疫与体液免疫在结核感染时可发生分离现象，即活动型细胞免疫功能低下，抗体效价升高。在恢复期或稳定期，细胞免疫功能增强，抗体效价下降。

抗结核杆菌抗体无保护作用。细胞免疫在抗感染免疫中起重要作用，即致敏细胞与抗原相遇，释放淋巴因子（主要是IFN-γ），作用于巨噬细胞。

1.结核菌素试验包括针对旧结核菌素（old tuberculin，OT）与结核菌素纯蛋白衍生物（purified protein derivative，PPD）两种菌体蛋白。

2.分枝杆菌抗体检测以分枝杆菌外膜抗原为已知抗原，检测待测血清中的分枝杆菌抗体。可采用胶体金方法进行。其他分枝杆菌感染、麻风病也可呈阳性。

3.全血干扰素测定法当全血与PPD和对照抗原（植物血凝素）共同孵育后，致敏的淋巴细胞可分泌IFN-γ，

观或人为因素的影响。

第二节真菌感染性疾病的免疫检验

浅部真菌主要侵犯机体皮肤、毛发和指（趾）甲，引起浅部真菌病。深部真菌是指侵犯表皮以外组织器官即皮肤深层和脏如肺、脑、消化道等的病原真菌和条件致病真菌。

一、深部真菌感染

念珠菌又称假丝酵母菌，是最常见和主要的深部真菌。其中以白念珠菌最常见，临床标本中约占80%。

深部念珠菌病常继发于慢性消耗性疾病、严重营养不良、免疫功能抑制宿主或较长时间使用广谱抗生素者等，可发生于消化道、呼吸道、心、肾、脑、肝等处。菌血症中念珠菌的比例近年来也明显升高。

（二）隐球菌感染隐球菌属中的主要致病菌为新型隐球菌。新型隐球菌的感染一般为外源性，但也可为源性。新型隐球菌是条件致病菌，大多由呼吸道进入，在肺部引起轻度炎症或隐性感染，也可由破损皮肤或肠道传入。当机体免疫功能下降时可向全身播散。新型隐球菌虽为全身性感染，但以中枢神经系统感染、肺部感染最为多见，而皮肤、骨骼或其他脏的损害则较少见。

（三）曲霉感染曲霉可在身体许多部位引起病变，如皮肤、耳、鼻腔、眼眶、心脏、脑、肾脏、呼吸道和消化道等，其中以肺部病变最为常见，主要包括过敏性肺曲霉病、侵袭性肺曲霉病等。

真菌感染的免疫学检测临床上多数深部真菌感染缺乏特异性症状和体征，而真菌镜检和培养、病理检查等检查手段因取材困难、耗时、阳性率低等而难以满足临床需要。免疫血清学方法具有简便、快速、敏感性和特异性相对较高的优点，为临床提供了更多信息。

二、类真菌感染

卡氏肺孢菌，又称卡氏肺孢子虫，常见于：①早产婴儿和新生儿；②血液系统恶性肿瘤，如白血病、目前病原诊断主要依靠形态学检查，呼吸道分泌物或肺活检组织切片染色见肺泡泡沫状嗜伊红物质中富含本病原体。支气管灌洗术和支气管肺活检时本病原体发现率可达90%。

第三节病毒感染性疾病的免疫检测

病毒具有较强的免疫原性，能诱导机体产生免疫应答，有助于病毒的清除并预防再次感染。机体在感染病毒或接种病毒疫苗后，能产生对病毒多种抗原成分的各类特异性抗体。

细胞免疫在抗病毒感染中发挥着主要的作用，特别是细胞毒T淋巴细胞（CTL）和相关的细胞因子。

特异性抗病毒抗体发挥免疫清除的作用，可通过：①中和作用是机体灭活游离病毒的主要方式。②促

一、流感病毒感染

1.病毒的抗原检测：常采用免疫荧光或酶标记技术，以标记抗体检测鼻咽分泌物中的流感病毒抗原。该方法具有快速和灵敏度高的优点，有助于早期诊断。阳性结果具有诊断意义，但阴性不能完全排除。

2.病毒的抗体检测

①血凝抑制试验或补体结合试验可以检测急性期和恢复期患者血清总抗体效价，效价4倍升高有助于回顾性诊断和流行病学调查，但不能用于早期诊断。

②时间分辨免疫荧光技术检测流感病毒抗原。该方法具有敏感性高、特异性强、临床符合率高等特点，

（二）禽流感病毒

A型流感病毒（AIV）是一种可引起禽类从呼吸系统疾病到严重的全身性败血症等多种症状的综合病症的病毒，即禽流行性感冒（AI）简称禽流感。AIV感染的免疫学诊断主要包括对AIV特异性IgM和IgG抗体的检测。检测方法包括：禽流感血凝抑制试验、神经氨酸抑制试验、琼脂免疫扩散试验、ELISA法及抗体斑点-ELISA（Dot-ELISA）法等。

二、轮状病毒感染

人轮状病毒（HRV）是引起婴幼儿胃肠炎和腹泻的主要病毒病原体，也是能引起较大儿童及成人腹泻的主要病原体。

1.抗原检测用ELISA或者免疫酶斑点试验从粪便标本中检测RV抗原，如果结果阳性则可诊断为RV

2.抗体检测可采用ELISA法检测。感染5天后患者血清中即可测出IgM抗体水平的升高，可用于早期诊断。IgG抗体的检测常采用发病早期和恢复期双份血清进行，如有4倍以上的增长则有诊断意义。

三、肝炎病毒感染

常采用ELISA和化学发光技术。HAV IgM是感染的特异性标志，有助于区分现症感染和既往感染。HAV-IgM在急性感染时出现较早（发病后1～4周），上升快，高峰效价高，持续时间短（常于3～6个月后转阴性），是急性HAV感染或者复发的可靠指标。HAV-IgG

维持多年，甚至终生。

（二）乙型肝炎病毒感染

HBsAg 抗-HBs

HBcAg 抗-HBc

HBeAg 抗-HBe

小三阳

大三阳

1.乙型肝炎表面抗原血清HBsAg的检测可采用固相放射免疫法、ELISA、反向间接血凝试验等方法，是乙型肝炎患者早期诊断的重要指标。目前可以采用化学发光法对血清中的进行定量检测，这对肝炎患者动态疗效观察很有价值。

为乙肝患者血清中首先出现的病毒标志物，可作为乙肝的早期诊断和普查。在急性肝炎潜伏期即可出现阳性，先于临床症状及肝功能试验异常1～7周。