DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
2020高考生物一轮复习
DNA的粗提取与鉴定
基本思路
提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理或化学方法 分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。对于DNA 的 粗提取而言，就是要利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物 理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其它成分。
DNA的特性
⑴ DNA的溶解性 2mol/L
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
去除杂质的方 ➢直接在滤法液中加入嫩肉粉
嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能分解蛋白质
➢将滤液放在60-75°C的恒温水浴箱 中保温10-15min
蛋白质在此温度下变性，但DNA不受影响
➢反复溶解与析出DNA
用高盐浓度的溶液溶解DNA，能除去在高盐中 不能溶解的杂质；用低盐浓度使DNA析出，能 除去溶解在低盐溶液中的杂质
√ 液中，加入二苯胺试剂，沸水浴后液体由无色变成蓝色
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
实验课原堂理练习
（2015江苏卷.25） 图1、2 分别为“DNA 的粗提取与鉴定”的实验中部分
操作步骤示意图,下列叙述正确的是（
）（多选）BCD
A. 图1、2 中加入蒸馏水稀释的目的相同 B. 图1 中完成过滤之后保留滤液 C. 图2 中完成过滤之后弃去滤液 D. 在图1 鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
实实验验原步理骤——鸡血
鸡血
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
实实验验原步理骤——鸡血
制备鸡血细胞液…………加柠檬酸钠，防止血液凝固
↓ 破碎细胞，释放DNA… 加蒸馏水，使细胞吸水涨破
↓→破坏细胞膜、核膜等。
去除杂质……… ①加入2mol/L NaCl，溶解DNA，过滤
•
3.按照定额组织生产，对班组和个人 均严格 按定额 下达生 产任务 ，并进 行考核 。
•
4.定期检查本班组成员定额完成情况 ，及时 了解完 成和没 有完成 或超额 完成定 额的原 因，掌 握第一 手资料 ，反馈 给车间 或上级 部门。
•
5.组织职工正确填写定额原始记录， 做到全 面、完 整、准 确、及 时。
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
实验课原堂理小结
DNA
实验原理
DNA在不同浓度的Nacl溶液中的溶解度不同 DNA不溶于酒精 DNA与二苯胺呈现蓝色反应
的
粗 提
DNA粗提取
选择适宜材料
破碎细胞
取
与
DNA的析出
去除杂质
鉴
定
鉴定DNA 与二苯胺混合，沸水浴，呈现蓝色反应
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
鸡血
② 加蒸馏水稀释NaCl 浓度为0.14mol/L，析出DNA。
③将粘稠物溶解到2mol/L NaCl溶液中，同方向缓慢 搅拌，过滤
→除去细胞质中的大部分杂质。
DNA析出……… 与预冷的95％酒精混合，同方向缓慢搅拌，析出 白色丝状物
→除去核蛋白等。
DNA鉴定……… 加入2mol/L NaCl溶液，搅拌。再加入二苯胺，沸水浴
→除去细胞质中部分杂质。
出
DNA析出……… 上清液与预冷935.％低冷温酒有精混利合于，增同方加向D缓N慢A搅分拌子，柔韧性， 析出白色丝状物或者减1少000断0r/裂min下离心5min
→除去核蛋白等。
DNA鉴定……… 先加入2mol/L NaCl溶液溶解DNA。再加入二苯胺混匀， 置于沸水浴中5分钟。二苯胺现配现用。空白对照。
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
实验课原ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ理练习
√ 1.（2018北京理综，4B）鉴定DNA时，将粗提产物与二苯胺 混合后进行沸水浴 2.（2018江苏单科，17C）提取DNA时，在切碎的洋葱中加入
× 适量洗涤剂和食盐，充分研磨，过滤并弃去滤液
3.（2018江苏单科，17D）将DNA粗提物溶解在2mol/Nacl溶
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
•
1.加强职工主人翁责任感，组织落实 各项技 术组织 措施， 认清贯 彻劳动 定额的 重要意 义和目 的，增 强完成 定额和 超额完 成定额 的信心 。
•
2.帮助本单位职能部门做好劳动定额 制订和 修订工 作，并 组织班 组职工 讨论， 使劳动 定额保 持先进 合理的 水平。
当NaCl浓度为0.14mol/L
时，DNA的溶解度最小，
浓度为2mol/L时，DNA
的溶解度最大。 利用这一原理，可以使 DNA与其他物质分开。
DNA的特性
⑵ DNA不溶于酒精溶液
DNA不溶于酒精 将DNA与蛋白质进 细胞中某些蛋白质溶于酒精 一步分离
DNA的特性
（3） DNA的鉴定
DNA + 二苯胺 沸水浴 蓝色反应
实验原理
1．DNA___不__溶_于____酒精溶液，但某些蛋白质溶于酒精， 利用这一原理，可以初步分离DNA与蛋白质。
2．DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶 于 2 mol/L的NaCl溶液，在 0.14 mol/L的NaCl溶 液中溶解度最低。
3．DNA遇___二__苯_胺____试剂(沸水浴)会呈现___蓝___色， 因此__二__苯_胺____试剂可以作为鉴定DNA的试剂。
•
6.根据劳动定额，组织班组开展劳动 竞赛， 实行按 劳分配 。
•
7.要培养积极的心态，勇于正视自己 ，正确 地看待 自己和 别人。 一般说 来，人 们容易 看到自 己的优 点，归 功于己 ；看别 人却往 往会看 到缺点 ，责误 于人。 这是一 种心理 学现象 ，我们 应该在 自己的 不断成 长和进 步中克 服它
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
实实验验原结理果分析
原因：提取的DNA不是白色丝状物， 说明DNA中的杂质较多。 二苯胺鉴定不是蓝色可能所 提取的DNA含量低
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
实实验验原结理果分析
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
实选验取原实理验材料
DNA含量相对较高、材料易得
洋葱
鸡血
香蕉
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
实验实原验理步骤——洋葱
取材…………称取30克洋葱，切碎
↓
洋葱
破碎细胞预，冷释放酒D精NA的…优加入点研：磨1液.抑或者制洗核涤剂酸、水食解盐酶活性，防止DNA
过滤↓→…破…坏…细胞膜，4溶°解CD冰N箱A 中放置2几. 降分钟低或降分1解5子0清0r液运/mi动n下，离易心5于分钟形，成然沉后取淀上析
DNA的粗提取与鉴定
基本思路
提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理或化学方法 分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。对于DNA 的 粗提取而言，就是要利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物 理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其它成分。
DNA的特性
⑴ DNA的溶解性 2mol/L
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
去除杂质的方 ➢直接在滤法液中加入嫩肉粉
嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能分解蛋白质
➢将滤液放在60-75°C的恒温水浴箱 中保温10-15min
蛋白质在此温度下变性，但DNA不受影响
➢反复溶解与析出DNA
用高盐浓度的溶液溶解DNA，能除去在高盐中 不能溶解的杂质；用低盐浓度使DNA析出，能 除去溶解在低盐溶液中的杂质
√ 液中，加入二苯胺试剂，沸水浴后液体由无色变成蓝色
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
实验课原堂理练习
（2015江苏卷.25） 图1、2 分别为“DNA 的粗提取与鉴定”的实验中部分
操作步骤示意图,下列叙述正确的是（
）（多选）BCD
A. 图1、2 中加入蒸馏水稀释的目的相同 B. 图1 中完成过滤之后保留滤液 C. 图2 中完成过滤之后弃去滤液 D. 在图1 鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
实实验验原步理骤——鸡血
鸡血
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
实实验验原步理骤——鸡血
制备鸡血细胞液…………加柠檬酸钠，防止血液凝固
↓ 破碎细胞，释放DNA… 加蒸馏水，使细胞吸水涨破
↓→破坏细胞膜、核膜等。
去除杂质……… ①加入2mol/L NaCl，溶解DNA，过滤
•
3.按照定额组织生产，对班组和个人 均严格 按定额 下达生 产任务 ，并进 行考核 。
•
4.定期检查本班组成员定额完成情况 ，及时 了解完 成和没 有完成 或超额 完成定 额的原 因，掌 握第一 手资料 ，反馈 给车间 或上级 部门。
•
5.组织职工正确填写定额原始记录， 做到全 面、完 整、准 确、及 时。
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
实验课原堂理小结
DNA
实验原理
DNA在不同浓度的Nacl溶液中的溶解度不同 DNA不溶于酒精 DNA与二苯胺呈现蓝色反应
的
粗 提
DNA粗提取
选择适宜材料
破碎细胞
取
与
DNA的析出
去除杂质
鉴
定
鉴定DNA 与二苯胺混合，沸水浴，呈现蓝色反应
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
鸡血
② 加蒸馏水稀释NaCl 浓度为0.14mol/L，析出DNA。
③将粘稠物溶解到2mol/L NaCl溶液中，同方向缓慢 搅拌，过滤
→除去细胞质中的大部分杂质。
DNA析出……… 与预冷的95％酒精混合，同方向缓慢搅拌，析出 白色丝状物
→除去核蛋白等。
DNA鉴定……… 加入2mol/L NaCl溶液，搅拌。再加入二苯胺，沸水浴
→除去细胞质中部分杂质。
出
DNA析出……… 上清液与预冷935.％低冷温酒有精混利合于，增同方加向D缓N慢A搅分拌子，柔韧性， 析出白色丝状物或者减1少000断0r/裂min下离心5min
→除去核蛋白等。
DNA鉴定……… 先加入2mol/L NaCl溶液溶解DNA。再加入二苯胺混匀， 置于沸水浴中5分钟。二苯胺现配现用。空白对照。
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
实验课原ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ理练习
√ 1.（2018北京理综，4B）鉴定DNA时，将粗提产物与二苯胺 混合后进行沸水浴 2.（2018江苏单科，17C）提取DNA时，在切碎的洋葱中加入
× 适量洗涤剂和食盐，充分研磨，过滤并弃去滤液
3.（2018江苏单科，17D）将DNA粗提物溶解在2mol/Nacl溶
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
•
1.加强职工主人翁责任感，组织落实 各项技 术组织 措施， 认清贯 彻劳动 定额的 重要意 义和目 的，增 强完成 定额和 超额完 成定额 的信心 。
•
2.帮助本单位职能部门做好劳动定额 制订和 修订工 作，并 组织班 组职工 讨论， 使劳动 定额保 持先进 合理的 水平。
当NaCl浓度为0.14mol/L
时，DNA的溶解度最小，
浓度为2mol/L时，DNA
的溶解度最大。 利用这一原理，可以使 DNA与其他物质分开。
DNA的特性
⑵ DNA不溶于酒精溶液
DNA不溶于酒精 将DNA与蛋白质进 细胞中某些蛋白质溶于酒精 一步分离
DNA的特性
（3） DNA的鉴定
DNA + 二苯胺 沸水浴 蓝色反应
实验原理
1．DNA___不__溶_于____酒精溶液，但某些蛋白质溶于酒精， 利用这一原理，可以初步分离DNA与蛋白质。
2．DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶 于 2 mol/L的NaCl溶液，在 0.14 mol/L的NaCl溶 液中溶解度最低。
3．DNA遇___二__苯_胺____试剂(沸水浴)会呈现___蓝___色， 因此__二__苯_胺____试剂可以作为鉴定DNA的试剂。
•
6.根据劳动定额，组织班组开展劳动 竞赛， 实行按 劳分配 。
•
7.要培养积极的心态，勇于正视自己 ，正确 地看待 自己和 别人。 一般说 来，人 们容易 看到自 己的优 点，归 功于己 ；看别 人却往 往会看 到缺点 ，责误 于人。 这是一 种心理 学现象 ，我们 应该在 自己的 不断成 长和进 步中克 服它
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
实实验验原结理果分析
原因：提取的DNA不是白色丝状物， 说明DNA中的杂质较多。 二苯胺鉴定不是蓝色可能所 提取的DNA含量低
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
实实验验原结理果分析
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
实选验取原实理验材料
DNA含量相对较高、材料易得
洋葱
鸡血
香蕉
DNA粗提取与鉴定【优秀课件】
实验实原验理步骤——洋葱
取材…………称取30克洋葱，切碎
↓
洋葱
破碎细胞预，冷释放酒D精NA的…优加入点研：磨1液.抑或者制洗核涤剂酸、水食解盐酶活性，防止DNA
过滤↓→…破…坏…细胞膜，4溶°解CD冰N箱A 中放置2几. 降分钟低或降分1解5子0清0r液运/mi动n下，离易心5于分钟形，成然沉后取淀上析