肠球菌属检验

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1．概述
肠球菌属包括粪肠球菌、屎肠球菌、鸟肠球菌、类鸟肠球菌、棉子糖肠球菌等21个种。

2. 标本类型
血液、尿液、痰、穿刺液、脓液等标本。

3. 鉴定
3.1 形态与染色革兰阳性球菌，单个、成双或短链排列。

3.2 培养特性在血琼脂平板上35℃培养18～24小时，形成较小、灰白色，有α溶血或γ溶血环的菌落。

在康凯琼脂平板上形成较小、干燥、粉红色菌落。

3.3 生化反应触酶试验阴性，分解甘露醇，胆汁七叶苷试验阳性，在含6.5%NaCl肉汤中生长，多数菌株PYR试验阳性，对杆菌肽耐药。

3.4 鉴别要点
3.4.1 本菌属特征革兰阳性球菌，触酶阴性，在含6.5%NaCl肉汤中生长，胆汁七叶苷和耐盐试验阳性，45℃生长。

3.4.2与链球菌属和乳球菌属的鉴别肠球菌属能在pH9.6肉汤和45℃生长，胆汁七叶甘和耐盐试验阳性，而链球菌属和乳球菌属则相反。

3.4.3 粪肠球菌与屎肠球菌、鸟肠球菌的鉴别粪肠球菌不分解L-阿拉伯糖，分解山梨醇。

屎肠球菌能分解L-阿拉伯糖，不分解山梨醇。

鸟肠球菌分解L-阿拉伯糖和山梨醇。

3.5 操作步骤
3.5.1 涂片、染色观察菌落特征，挑取可疑菌落，涂片染色镜检。

3.5.2 触酶试验参见《触酶试验标准操作规程》。

3.5.3 鉴定从血琼脂平板上挑取纯菌落，用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。

4. 药敏
参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSI M100-S19最新版本文件。

5. 质量控制
参见《质量管理程序》。

6. 检验结果解释与分析
在β-内酰胺酶阴性肠球菌中，氨苄西林药敏试验结果可预测阿莫西林-克拉维酸、氨苄西林-舒巴坦、哌拉西林和哌拉西林-他唑巴坦等敏感性。

青霉素药敏试验可预测氨苄西林、阿莫西林、阿莫西林-克拉维酸、氨苄西林-舒巴坦、哌拉西林和哌拉西林-他唑巴坦等药敏结果。

粪肠球菌中氨苄西林药敏结果可以预测亚胺培南的药敏结果。

对于血培养和脑脊液培养分离出的肠球菌需做β-内酰胺酶检测，若β-内酰胺酶阳性，则对氨基青霉素、羧基青霉素和脲基青霉素均耐药。

为耐万古霉素肠球菌（VRE）加做氯霉素、红霉素、四环素和利福平药敏试验，根据结果进行治疗。

氨基糖苷类高水平耐药株HLAR可用庆大霉素120μg/ml纸片筛选，无抑菌环为耐药，抑菌环≥10mm为非HLAR，对于抑菌环在7-9mm之间的菌株需用稀释法确认。

对于肠球菌属，头孢菌素类、氨基糖苷类（仅筛选高水平耐药性）、磺胺甲恶唑、甲氧苄啶和克林霉素在体外可能有活性（敏感），但在临床上耐药，所以不能报告肠球菌对这些药物敏感。

7. 临床意义
粪肠球菌和屎肠球菌主要引起医院感染，最常见为尿道感染（大部分与尿道器械操作、导尿等有关），其次为腹部和盆腔等部位的创伤和外科术后感染。

近年来，肠球菌属氨苄西
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林耐药菌株和庆大霉素高耐药株逐渐增多，耐万古霉素的肠球菌国外也有较多报道，已使肠球菌所致重症感染的治疗成为临床棘手的问题。

8. 鉴定流程
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参考文献
[1] 中国合格评定国家认可委员会.CNAS-GL23:2008医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的指南.2008
[2] 周庭银编著.临床微生物学诊断与图解.第二版.上海：上海科学技术出版社，2007
[3] 叶应妩，王毓三，申子瑜主编.全国临床检验操作规程.第3版.南京：东南大学出版社，2006
[4] Murray PR. Manual of Cinical Microbilogy. 9th ed.Washington:ASM Press,2007 [5] ISO 15189：2007医学实验室-质量和能力认可准则. 2007
异味肠球菌
触酶试验涂片染色：G+球菌，单个、成双或短链排列
菌落观察：较小、灰白色、α溶血或γ溶血 +甘露醇-
+精氨酸- +阿拉伯糖- +棉子糖-
鸟肠球菌
异味肠球菌 +丙酮酸- 坚韧肠球菌 粪变种 +蔗糖-
肠道肠球菌 +阿拉伯糖- +动力- 母鸡肠球菌 屎肠球菌 +丙酮酸- 粪肠球菌 +动力-
铅黄肠球菌 +色素- 曼特肠球菌 孤立肠球菌。