血培养的意义及标准化操作
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• 尿培养有助于尿路感染的诊断，鼓励送检。
• 痰培养诊断价值有限，在考虑下呼吸道感染
（CAP、HAP）时可以送检。
• 口腔和肠内容物、直肠周围脓肿、褥疮、恶
露、呕吐物等价值较低,一般不做细菌培养。
2020/2/12
11
我院细菌培养送检标本构成
尿液 20%
其它 14%
血液及骨髓 20%
2020/2/12
22
血培养检测——采血指征
• 在评估可疑新生儿败血症时，除发热或低烧外， 很少培养出细菌，应该补充尿液和脑脊液培养
• 肺炎链球菌与流感嗜血杆菌菌血症的患儿（特 别是2岁以下的幼儿）一般多见于门诊，常伴 有明显发热（≥38.5℃）和白细胞增多 （≥20×109/L）
• 老年菌血症患者，可能不发热或不低热，如伴 有身体不适，肌痛或中风可能是感染性心内膜 炎的重要指征
血培养的意义及标准 化操作
2020/2/12
1
血培养 (blood culture )
• 血培养是将新鲜离体血液标本接种于适当 的培养基，在一定温度条件下，使细菌生 长繁殖并对其进行鉴定，从而确定病原菌 的一种人工培养法。
• 培养方法：手工培养法
血培养仪法
2020/2/12
2
血培养的原则和规程；批准指南
2020/2/12
20
目前我院血培养存在的主要问题
• 血培养检测运输标准及接受标准不规范
➢标本运送有时被延误，没有及时送检，导致 微生物检测延迟
➢实验室工作人员没有认真核查接收血标本 培养瓶标签是否正确 采血量是否足够 培养瓶是否有破损 是否注明采血时间
2020/2/12
21
血培养检测——采血指征
2020/2/12
7
三级综合医院评审标准实施细则
2020/2/12
8
三级综合医院评审标准实施细则
2020/2/12
9
我院加入细菌耐药监测网 《申请书》，2013年
2020/2/12
10
鼓励送检有价值的标本
什么是有价值的标本？
• 组织和无菌体液（血、骨髓、脑脊液、关节 液、胸腹腔穿刺液）细菌学检验，有很高的 诊断价值，鼓励多送检。
2020/2/12
34
CRBSI送检方法
• 首先判断导管是否仍有保留的必要性 • 按导管保留与否分别采用不同的送检方法
1. 发热（≥38℃）或低温（≤ 36℃）； 2. 寒战； 3. WBC增多（>10.0×109/L，尤其伴核左移）； 4. 粒细胞减少(成熟的多核白细胞< 1×109/L)； 5. PLT降低； 6. 皮肤粘膜出血； 7. 昏迷； 8. 多器官功能衰竭；
或同时具备上述几种体征时应采血培养。
2020/2/12
• 预后重要性 血培养中一个临床重要的病原 菌生长,表明宿主原发感染部位的抵抗力下 降,或是机体不能清除病原菌或根除感染灶。 从血液中培养得到病原菌的种类,同样也对 预后有重要的意义。
2020/2/12
5
2全国抗菌药物临床应用专项整治活动 方案（八）
• 加强临床微生物标本检测和 细菌耐药监测。
• 医疗机构要采取综合措施， 努力提高微生物标本质量， 提高血液及其他无菌部位标 本送检比例，保障检测结果 的准确性。
不发热，甚至表现为低体温，实验检查白 细胞总数可不上升反而下降等
2020/2/12
14
临床科室感染情况
不同科室的血流感染发生率亦是不同
• 感染发生率最高的是在ICU病房，多见于革 兰阴性、阳性菌感染、真菌感染
• 其次在外科病房，尤其在外科手术后感染 率高，往往混合性感染较多见
• 在儿科尤其新生儿病房，革兰阳性球菌及 条件致病菌感染最为常见
关于儿童血培养采血量
• Paisley JW, Lauer BA. Pediatric blood cultures. Clin Lab Med 1994;14:1730.
• CAPT Robert L. Volume of blood required to detect common neonatal pathogens. The Journal of Pediatrics.August 1996; 275-278
• 本文件为血培养的采集、运输、处理和从 怀疑细菌血症和真菌血症患者的血液中进 行病原体培养提供建议
• 美国临床和实验室标准协会（CLSI）通过 一致性评议达成全球适用标准。
2020/2/12
3
血培养的临床重要性
• 血培养是检测菌血症和真菌血症的最简单、 最准确和最常用的一种方法，是确认机体 血流感染的病原学基础。
2020/2/12
17
病例
• 2014年6月，我院ICU，某患者，男，22岁， 入院时不明原因发热、休克，转诊中南医院 医治无效死亡。
• 血液培养：马尔尼菲青霉；骨髓病理检查： 不能肯定。
①
②
③
2020/2/12
④
18
目前我院血培养存在的主要问题
• 血培养重视度不够，送检率低
➢觉得血培养用处不大，主要靠经验治疗 ➢血培养时间太长，不能适应临床需求 ➢有指征不送检
Vincent J-L, Sakr Y, Sprung CL, et al. Sepsis in European intensive care units: Results of the SOAP study. Crit Care Med 2006;34:344-355
2020/2/12
16
细菌血症和真菌血症
2020/2/12
29
采血量与检出率的关系
血培养：采血量每增加1毫升，成年人 真性菌血症阳性检出率增加3％
2020/2/12
30
关于儿童血培养采血量
• 儿童的采血量不能超过其总血容量的1%， 可按 年龄或体重分别采足够的血量
＜ 1月：≥0ห้องสมุดไป่ตู้5ml 1月－36月：≥1.0ml
≥36月：≥4.0ml
2020/2/12
27
厌氧血培养的意义
• Khanna等2对7072份同时做需氧瓶和厌氧瓶的 血培养结果分析显示: 640份血培养阳性，阳性率为9%（640/7072） 需氧和厌氧瓶同时阳性为55% 仅需氧瓶阳性为26% 仅厌氧瓶阳性为19%
2. Khanna P, Collignon P. Anaerobic bottles are still important in Blood culture sets. Eur J ClinMicrobiol InfectDis, 2001, 20: 2172219.
痰及咽拭子 46%
12
何谓“血流感染”
• 血流感染（BSI）是指各种病原微生物(细 菌或真菌)和毒素侵入血循环，在血液中繁 殖，释放毒素和代谢产物，并诱导细胞因 子释放，引起全身感染、中毒和全身炎症 反应（SIRS），进一步可能导致血压下降、 凝血和纤溶系统的改变，引起全身多器官 功能障碍综合征（MODS）的一种严重的 全身感染性疾病。
2020/2/12
32
血培养瓶应孵育多长时间
• CLSI推荐全自动系统只需孵育5天。
• 90%阳性标本可在12小时内被检测，36小 时内可检测出99%的阳性标本。
• 与孵育7天相比，只有0.3%有临床意义的阳 性血培养在5天内不能被检出。设定5天为 孵育周期是最具有性价比的。
Huang, et al., European Journal of Clinical Microbiology 17: 637. 1998 (Cockerill, et al. CID 2004)
➢诊断重要性 ➢预后重要性
CLSI. M47-A. Principle and procedures for blood cultures
2020/2/12
4
血培养的临床重要性
• 诊断重要性 阳性的血培养结果,不仅能确定 证实病人的疾病是由于感染病原菌引起,更 重要的是还可以提供病原菌对抗菌药物的 敏感性结果，从而优化抗感染治疗。
——直接威胁患者生命的感染性疾病
• 阳性的血培养报告应被视为潜在的医疗紧 急状态（危急值）
发展为败血症的比率高达40%-90% 血培养阳性的患者应尽可能快地给予其适 当的抗感染治疗
Vincent J-L, Sakr Y, Sprung CL, et al. Sepsis in European intensive care units: Results of the SOAP study. Crit Care Med 2006;34:344-355
2020/2/12
23
2020/2/12
24
血培养采集套数
同时从不同部位采集2～3套 注意： 1. 1“套”是指一次静脉穿刺， 2. 尽可能短时间内采集2～3套， 3. 此后的2～5天内不必重复采集， 4. 成人病人决不能只采集1瓶血培养标本， 5. 采血量不足和只做1套血培养所得结果是
不易正确解释的。
2020/2/12 CLSI M47-A Principle and procedures for blood cultures 25
血培养套数与阳性检出率（％）
100
90 80
65％ 70
80％
60
50
40
30
20
10
0
1套
2套
2020/2/1C2 ockerill, CID 2004
96％
3套
• 此外，血液透析中心、肾内科、风湿血液 科、肿瘤科、感染科也有较高的感染发生 率
2020/2/12
15
细菌血症和真菌血症
——直接威胁患者生命的感染性疾病
• 血液中的微生物在3分钟到达每个器官 • 在ICU死亡患者中，菌血症是最常见的潜在
死亡原因，严重的菌血症或感染性休克死 亡率高达32%至54%
• 采血消毒不够严格，导致污染率偏高
➢皮肤静脉采血消毒不够严格 ➢培养瓶的消毒问题
2020/2/12
19
目前我院血培养存在的主要问题
• 不规范的血培养
➢采血量、采血时间、采血套数不符合CLSI 规范，导致病原菌的分离率低
➢很难评估病原菌是污染还是与感染有关
• 血培养阳性结果的报告不够及时
➢手工培养阳性不及仪器培养法灵敏
2020/2/12
6
全国抗菌药物临床应用专项整治活 动方案（八）
• 根据临床微生物标本检测结果合理选用抗菌药物
➢ 接受抗菌药物治疗的住院患者抗菌药物使用前微 生物检验样本送检率不低于30%；
➢ 接受限制使用级抗菌药物治疗的住院患者抗菌药 物使用前微生物检验样本送检率不低于50%；
➢ 接受特殊使用级抗菌药物治疗的住院患者抗菌药 物使用前微生物送检率不低于80%。
2020/2/12
33
导管相关性血流感染（CRBSI)
• 指带有血管内导管或者拔除血管内导管48小时 内的患者出现菌血症或真菌血症，并伴有发热 （>38℃）、寒颤或低血压等感染表现，除血 管导管外没有其他明确的感染源
• CRBSI是医院感染的常见原因，美国每年25 万死亡病例， CRBSI占死亡病例12-35%
99％
4套
血培养套数
26
厌氧血培养的意义
• 根据文献，厌氧瓶除了检出厌氧菌，另外 对葡萄球菌，肠杆菌科细菌以及苛养菌的 检测有优势
• 资料显示：16%的链球菌和17%的肠杆菌 科细菌血培养时仅厌氧瓶报告阳性1
1.Bartlett JG, Dick J. The controversy regarding routine anaerobic blood cultures. Am J Med , 2000, 108: 5052506.
2020/2/12
28
要采集多少血液
• 采血量是影响灵敏度最关键因素； • 成人一套标本包括2个培养瓶（需氧瓶+厌
氧瓶），每瓶5-10ml，共10-20ml；至少采 取2套，共20-40ml； • 儿童一般只需采集需氧瓶，在保证采血量 <1%总血量下，一般不少于2ml； • 采血量不足时应优先保证需氧瓶，因临床 90%以上的感染为需氧菌或兼性厌氧菌感染。
• 对于新生儿败血症，最低的采血量不确定，通常 0.75-1.0ml的血量是推荐的
• 阳性率：足量采血 5.2% (34/655) VS 不足量采血 2.1% (14/648)
2020/2/12 Behrman:Nelson textbook of Pediatrics,17th ed.,2004
31
• 目前将败血症和菌血症统称为血流感染 。
2020/2/12
13
临床表现
• 血流感染常因原发病、病原菌、患者情况 不同临床表现也复杂多变,存在较大差异
• 有许多共同特点，如寒战、高热、心动过 速、呼吸急促、皮疹、肝脾肿大及精神、
意识的改变等临床表现，甚至可出现休克、 DIC和多脏器功能衰竭等严重并发症 • 在不同人群中，如年老体弱、婴幼儿、有 基础疾病等患者中临床可无典型表现，如
• 痰培养诊断价值有限，在考虑下呼吸道感染
（CAP、HAP）时可以送检。
• 口腔和肠内容物、直肠周围脓肿、褥疮、恶
露、呕吐物等价值较低,一般不做细菌培养。
2020/2/12
11
我院细菌培养送检标本构成
尿液 20%
其它 14%
血液及骨髓 20%
2020/2/12
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血培养检测——采血指征
• 在评估可疑新生儿败血症时，除发热或低烧外， 很少培养出细菌，应该补充尿液和脑脊液培养
• 肺炎链球菌与流感嗜血杆菌菌血症的患儿（特 别是2岁以下的幼儿）一般多见于门诊，常伴 有明显发热（≥38.5℃）和白细胞增多 （≥20×109/L）
• 老年菌血症患者，可能不发热或不低热，如伴 有身体不适，肌痛或中风可能是感染性心内膜 炎的重要指征
血培养的意义及标准 化操作
2020/2/12
1
血培养 (blood culture )
• 血培养是将新鲜离体血液标本接种于适当 的培养基，在一定温度条件下，使细菌生 长繁殖并对其进行鉴定，从而确定病原菌 的一种人工培养法。
• 培养方法：手工培养法
血培养仪法
2020/2/12
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血培养的原则和规程；批准指南
2020/2/12
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目前我院血培养存在的主要问题
• 血培养检测运输标准及接受标准不规范
➢标本运送有时被延误，没有及时送检，导致 微生物检测延迟
➢实验室工作人员没有认真核查接收血标本 培养瓶标签是否正确 采血量是否足够 培养瓶是否有破损 是否注明采血时间
2020/2/12
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血培养检测——采血指征
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三级综合医院评审标准实施细则
2020/2/12
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三级综合医院评审标准实施细则
2020/2/12
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我院加入细菌耐药监测网 《申请书》，2013年
2020/2/12
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鼓励送检有价值的标本
什么是有价值的标本？
• 组织和无菌体液（血、骨髓、脑脊液、关节 液、胸腹腔穿刺液）细菌学检验，有很高的 诊断价值，鼓励多送检。
2020/2/12
34
CRBSI送检方法
• 首先判断导管是否仍有保留的必要性 • 按导管保留与否分别采用不同的送检方法
1. 发热（≥38℃）或低温（≤ 36℃）； 2. 寒战； 3. WBC增多（>10.0×109/L，尤其伴核左移）； 4. 粒细胞减少(成熟的多核白细胞< 1×109/L)； 5. PLT降低； 6. 皮肤粘膜出血； 7. 昏迷； 8. 多器官功能衰竭；
或同时具备上述几种体征时应采血培养。
2020/2/12
• 预后重要性 血培养中一个临床重要的病原 菌生长,表明宿主原发感染部位的抵抗力下 降,或是机体不能清除病原菌或根除感染灶。 从血液中培养得到病原菌的种类,同样也对 预后有重要的意义。
2020/2/12
5
2全国抗菌药物临床应用专项整治活动 方案（八）
• 加强临床微生物标本检测和 细菌耐药监测。
• 医疗机构要采取综合措施， 努力提高微生物标本质量， 提高血液及其他无菌部位标 本送检比例，保障检测结果 的准确性。
不发热，甚至表现为低体温，实验检查白 细胞总数可不上升反而下降等
2020/2/12
14
临床科室感染情况
不同科室的血流感染发生率亦是不同
• 感染发生率最高的是在ICU病房，多见于革 兰阴性、阳性菌感染、真菌感染
• 其次在外科病房，尤其在外科手术后感染 率高，往往混合性感染较多见
• 在儿科尤其新生儿病房，革兰阳性球菌及 条件致病菌感染最为常见
关于儿童血培养采血量
• Paisley JW, Lauer BA. Pediatric blood cultures. Clin Lab Med 1994;14:1730.
• CAPT Robert L. Volume of blood required to detect common neonatal pathogens. The Journal of Pediatrics.August 1996; 275-278
• 本文件为血培养的采集、运输、处理和从 怀疑细菌血症和真菌血症患者的血液中进 行病原体培养提供建议
• 美国临床和实验室标准协会（CLSI）通过 一致性评议达成全球适用标准。
2020/2/12
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血培养的临床重要性
• 血培养是检测菌血症和真菌血症的最简单、 最准确和最常用的一种方法，是确认机体 血流感染的病原学基础。
2020/2/12
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病例
• 2014年6月，我院ICU，某患者，男，22岁， 入院时不明原因发热、休克，转诊中南医院 医治无效死亡。
• 血液培养：马尔尼菲青霉；骨髓病理检查： 不能肯定。
①
②
③
2020/2/12
④
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目前我院血培养存在的主要问题
• 血培养重视度不够，送检率低
➢觉得血培养用处不大，主要靠经验治疗 ➢血培养时间太长，不能适应临床需求 ➢有指征不送检
Vincent J-L, Sakr Y, Sprung CL, et al. Sepsis in European intensive care units: Results of the SOAP study. Crit Care Med 2006;34:344-355
2020/2/12
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细菌血症和真菌血症
2020/2/12
29
采血量与检出率的关系
血培养：采血量每增加1毫升，成年人 真性菌血症阳性检出率增加3％
2020/2/12
30
关于儿童血培养采血量
• 儿童的采血量不能超过其总血容量的1%， 可按 年龄或体重分别采足够的血量
＜ 1月：≥0ห้องสมุดไป่ตู้5ml 1月－36月：≥1.0ml
≥36月：≥4.0ml
2020/2/12
27
厌氧血培养的意义
• Khanna等2对7072份同时做需氧瓶和厌氧瓶的 血培养结果分析显示: 640份血培养阳性，阳性率为9%（640/7072） 需氧和厌氧瓶同时阳性为55% 仅需氧瓶阳性为26% 仅厌氧瓶阳性为19%
2. Khanna P, Collignon P. Anaerobic bottles are still important in Blood culture sets. Eur J ClinMicrobiol InfectDis, 2001, 20: 2172219.
痰及咽拭子 46%
12
何谓“血流感染”
• 血流感染（BSI）是指各种病原微生物(细 菌或真菌)和毒素侵入血循环，在血液中繁 殖，释放毒素和代谢产物，并诱导细胞因 子释放，引起全身感染、中毒和全身炎症 反应（SIRS），进一步可能导致血压下降、 凝血和纤溶系统的改变，引起全身多器官 功能障碍综合征（MODS）的一种严重的 全身感染性疾病。
2020/2/12
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血培养瓶应孵育多长时间
• CLSI推荐全自动系统只需孵育5天。
• 90%阳性标本可在12小时内被检测，36小 时内可检测出99%的阳性标本。
• 与孵育7天相比，只有0.3%有临床意义的阳 性血培养在5天内不能被检出。设定5天为 孵育周期是最具有性价比的。
Huang, et al., European Journal of Clinical Microbiology 17: 637. 1998 (Cockerill, et al. CID 2004)
➢诊断重要性 ➢预后重要性
CLSI. M47-A. Principle and procedures for blood cultures
2020/2/12
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血培养的临床重要性
• 诊断重要性 阳性的血培养结果,不仅能确定 证实病人的疾病是由于感染病原菌引起,更 重要的是还可以提供病原菌对抗菌药物的 敏感性结果，从而优化抗感染治疗。
——直接威胁患者生命的感染性疾病
• 阳性的血培养报告应被视为潜在的医疗紧 急状态（危急值）
发展为败血症的比率高达40%-90% 血培养阳性的患者应尽可能快地给予其适 当的抗感染治疗
Vincent J-L, Sakr Y, Sprung CL, et al. Sepsis in European intensive care units: Results of the SOAP study. Crit Care Med 2006;34:344-355
2020/2/12
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2020/2/12
24
血培养采集套数
同时从不同部位采集2～3套 注意： 1. 1“套”是指一次静脉穿刺， 2. 尽可能短时间内采集2～3套， 3. 此后的2～5天内不必重复采集， 4. 成人病人决不能只采集1瓶血培养标本， 5. 采血量不足和只做1套血培养所得结果是
不易正确解释的。
2020/2/12 CLSI M47-A Principle and procedures for blood cultures 25
血培养套数与阳性检出率（％）
100
90 80
65％ 70
80％
60
50
40
30
20
10
0
1套
2套
2020/2/1C2 ockerill, CID 2004
96％
3套
• 此外，血液透析中心、肾内科、风湿血液 科、肿瘤科、感染科也有较高的感染发生 率
2020/2/12
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细菌血症和真菌血症
——直接威胁患者生命的感染性疾病
• 血液中的微生物在3分钟到达每个器官 • 在ICU死亡患者中，菌血症是最常见的潜在
死亡原因，严重的菌血症或感染性休克死 亡率高达32%至54%
• 采血消毒不够严格，导致污染率偏高
➢皮肤静脉采血消毒不够严格 ➢培养瓶的消毒问题
2020/2/12
19
目前我院血培养存在的主要问题
• 不规范的血培养
➢采血量、采血时间、采血套数不符合CLSI 规范，导致病原菌的分离率低
➢很难评估病原菌是污染还是与感染有关
• 血培养阳性结果的报告不够及时
➢手工培养阳性不及仪器培养法灵敏
2020/2/12
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全国抗菌药物临床应用专项整治活 动方案（八）
• 根据临床微生物标本检测结果合理选用抗菌药物
➢ 接受抗菌药物治疗的住院患者抗菌药物使用前微 生物检验样本送检率不低于30%；
➢ 接受限制使用级抗菌药物治疗的住院患者抗菌药 物使用前微生物检验样本送检率不低于50%；
➢ 接受特殊使用级抗菌药物治疗的住院患者抗菌药 物使用前微生物送检率不低于80%。
2020/2/12
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导管相关性血流感染（CRBSI)
• 指带有血管内导管或者拔除血管内导管48小时 内的患者出现菌血症或真菌血症，并伴有发热 （>38℃）、寒颤或低血压等感染表现，除血 管导管外没有其他明确的感染源
• CRBSI是医院感染的常见原因，美国每年25 万死亡病例， CRBSI占死亡病例12-35%
99％
4套
血培养套数
26
厌氧血培养的意义
• 根据文献，厌氧瓶除了检出厌氧菌，另外 对葡萄球菌，肠杆菌科细菌以及苛养菌的 检测有优势
• 资料显示：16%的链球菌和17%的肠杆菌 科细菌血培养时仅厌氧瓶报告阳性1
1.Bartlett JG, Dick J. The controversy regarding routine anaerobic blood cultures. Am J Med , 2000, 108: 5052506.
2020/2/12
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要采集多少血液
• 采血量是影响灵敏度最关键因素； • 成人一套标本包括2个培养瓶（需氧瓶+厌
氧瓶），每瓶5-10ml，共10-20ml；至少采 取2套，共20-40ml； • 儿童一般只需采集需氧瓶，在保证采血量 <1%总血量下，一般不少于2ml； • 采血量不足时应优先保证需氧瓶，因临床 90%以上的感染为需氧菌或兼性厌氧菌感染。
• 对于新生儿败血症，最低的采血量不确定，通常 0.75-1.0ml的血量是推荐的
• 阳性率：足量采血 5.2% (34/655) VS 不足量采血 2.1% (14/648)
2020/2/12 Behrman:Nelson textbook of Pediatrics,17th ed.,2004
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• 目前将败血症和菌血症统称为血流感染 。
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临床表现
• 血流感染常因原发病、病原菌、患者情况 不同临床表现也复杂多变,存在较大差异
• 有许多共同特点，如寒战、高热、心动过 速、呼吸急促、皮疹、肝脾肿大及精神、
意识的改变等临床表现，甚至可出现休克、 DIC和多脏器功能衰竭等严重并发症 • 在不同人群中，如年老体弱、婴幼儿、有 基础疾病等患者中临床可无典型表现，如