胺类药物的分析

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（2）电位法 USP（24） （3）外指示剂法 KI—淀粉糊剂或试纸
2NaNO2+2KI+4HCl→ 2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O
（4）内指示剂法 中性红 不可逆指示剂
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4. 测定方法 盐酸普鲁卡因 ChP（2005）
取本品约0.6g，精密称定，照永停滴定法 （附录ⅦA），在15～25℃，用亚硝酸钠滴定 液（0.1mol/L）滴定。每1ml亚硝酸钠滴定液 （0.1mol/L）相当于27.28mg的C13H20N2O2·HCl
盐酸普鲁卡因 1，2 萘醌 4 磺酸钠 pH49
棕红色化合物，max 482nm处测定A
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（五）荧光法——荧光探针技术 使荧光衍生化试剂与本身无荧光或荧光
效率低的化合物反应，其产物具有强荧光， 从而使检测灵敏度大大提高。
盐酸普鲁卡因胺 荧胺 pH7.5荧光物
λex400nm（激发波长）、λem485nm（发射波长） 处测定荧光强度，标准曲线法定量。
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（二）非水溶液滴定法 脂烃胺侧链，具弱碱性
（三）紫外分光光度法 对乙酰氨基酚在0.4％氢氧化钠溶液中，于
257nm波长处有最大吸收，其紫外吸收光谱 特征，可用于其原料及其制剂的含量测定。
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对乙酰氨基酚 ChP（2005）
取本品约40mg，精密称定，置25ml量瓶中，
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间接：对乙酰氨基酚、非那西丁、 醋氨苯砜、贝诺酯
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对乙酰氨基酚 ChP（2005） 【鉴别】 （2）取本品约0.1g，加稀盐酸 5mL，置水浴中加热40分钟，放冷；取0.5 mL，滴加亚硝酸钠试液5滴，摇匀，用水 3mL稀释后，加碱性β-萘酚试液2mL，振 摇，即显红色。
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2. 对氨基酚 杂质来源：中间体、水解产物 反应原理：
对氨基酚 亚硝基铁氰化钠 OH 兰色
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检查方法： 对照法
取本品1.0g，加甲醇溶液（1→2）20ml溶解后， 加碱性亚硝基铁氰化钠试液1m1，摇匀，放置30 min；如显色，与对乙酰氨基酚对照品1.0g加对 氨基酚50g用同一方法制成的对照液比较，不得
HO HO
OH C CH2NHCH3 H 肾上腺素
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HO HO
OH
COOH
C CH2NH2 H C OH
H
HO C H
COOH
重酒石酸去甲肾上腺素
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H C CH2NHCH3 HCl OH HO 盐酸去氧肾上腺素
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HO HO
H C CH2NHCH(CH3)2 HCl OH
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盐酸普鲁卡因 NaOH 普鲁卡因 油状物 对氨基苯甲酸钠 二乙氨基乙醇 （使湿润的红色石蕊试纸变兰色）
对氨基苯甲酸钠 HCl 对氨基苯甲酸（白色 ）
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2. 苯佐卡因 ChP（2005） 【鉴别】 （1）取本品约0.1g，加氢氧化钠 试液5mL，煮沸，即有乙醇生成；加碘试液， 加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。
加0.4％氢氧化钠溶液50ml溶解后，加水至刻
度，摇匀，精密量取5m1，置100ml量瓶中，
加0.4％氢氧化钠溶液10m1，加水至刻度，
摇 匀，在 257nm的 波长 处测定 吸收度 ， 按
C8H9NO2的吸收系数
为7E1115c%m计算，即得。
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（四）比色法 中性条件下的重氮化反应
O
醋氨苯砜
NHCOCH2N(C2H5)2
CH3
CH3
HCl
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盐酸利多卡因
CH3
C4H9
N
NHCO
HCl
CH3
盐酸布比卡因
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一、结构与性质 （一） 具有芳伯氨基或潜在的芳伯氨基， 可用重氮化—偶合反应鉴别或亚硝酸钠滴定 法测定含量，可与芳醛发生缩合反应，易氧 化变色。 （二） 酯键或酰胺键易水解
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（六）HPLC法 盐酸普鲁卡因注射液 ChP（2005） 可同时测定盐酸普鲁卡因及其降解产
物对氨基苯甲酸 离子抑制色谱法 内标法定量
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第二节 苯乙胺类药物的分析
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苯乙胺类药物的基本结构
R1 CH CH NH R2 OH R3
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常见的苯乙胺类药物
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精密量取本品，加乙醇稀释使成为每1mL中含盐酸普 鲁卡因2.5mg的溶液，作为供试品溶液。取对氨基苯甲酸对照 品，加乙醇制成每1mL中含30g的溶液，作为对照品溶液。 取上述两种溶液各10 L，分别点于含有羧甲基纤维素钠为粘 合剂的硅胶H薄层板上，用苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14∶1 ∶ 1 ∶ 4）为展开剂，展开后，取出晾干，用对二甲氨基苯甲醛 溶液（2％对二甲氨基苯甲醛乙醇溶液100mL，加冰醋酸5mL 制成）喷雾显色。供试品溶液如显与对照品溶液相应的杂质 斑点，其颜色与对照品溶液主斑点比较，不得更深。
盐酸丁卡因
H2N
CONHCH2CH2N(C2H5)2 HCl
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盐酸普鲁卡因胺
酰胺类药物的基本结构
R3
R1
NH C R2
O R4
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HO
NHCOCH3
对乙酰氨基酚（扑热息痛）
C2H5O
NHCOCH3
非那西丁（对乙酰氨基苯乙醚）
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O
CH3CONH
S
NHCOCH3
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2. 硫氰酸盐衍生物 盐酸丁卡因 ChP（2005）
【鉴别】 （1）取本品约0.1g，加5%醋酸 钠溶液10mL溶解后，加25%硫氰酸铵溶液 1mL，即析出白色结晶；滤过，结晶用水 洗 涤 ， 在 80℃ 干 燥 ， 依 法 测 定 （ 附 录 ⅥC），熔点约为131℃。
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苯佐卡因 NaOH 乙醇
乙醇 I2 NaOH CHI（3 碘仿臭气，黄色 ）
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（五）制备衍生物测熔点 1．三硝基苯酚衍生物 盐酸利多卡因 ChP（2005） 【鉴别】 取本品0.2g，加水20ml溶解。 （1）取溶液10mL，加三硝基苯酚试液10 mL，即生成沉淀；滤过，沉淀用水洗涤后 ，干燥，依法测定（附录ⅥC），熔点为 228～232℃，熔融时同时分解。
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NHCOR + H2O
H+ △
NO2 + 6[H]
NH2 + RCOOH
NH2 + 2H2O
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2. 主要测定条件 （1）加入适量KBr加速反应 KBr为催化剂 在盐酸存在下，重氮化反应的机理为：
NaNO2+HCl→HNO2+NaCl HNO2+HCl→NOCl+H2O
盐酸普鲁卡因胺 H 2O2 羟肟酸 FeCl3 羟肟酸铁（紫红色 暗棕色 棕黑色）
3．与汞离子的反应
盐酸利多卡因 Hg（NO3）2 HNO3、黄色 对氨基苯甲酸酯类 Hg（NO3）2 HNO3、红色或橙黄色
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（四）水解产物的反应 1. 盐酸普鲁卡因 ChP（2005） 【鉴别】 （1）取本品约0.1g，加水2mL 溶解后，加10％氢氧化钠溶液1mL，即生 成白色沉淀；加热，变为油状物；继续加 热，产生的蒸气，能使湿润的红色石蕊试 纸变为蓝色；热至油状物消失后，放冷， 加盐酸酸化，即析出白色沉淀。
用作重氮化法的终点指示时，调节R1使加于电极上的电压 约为50mV。取供试品适量，精密称定，置烧杯中，除另 有规定外，可加水40mL与盐酸溶液（1→2）15mL，而后 置电磁搅拌器上，搅拌使溶解，再加溴化钾2g，插入铂— 铂电极后，将滴定管的尖端插入液面下约2/3处，用亚硝 酸钠滴定液（0.1mol/L或0.05mol/L）迅速滴定，随滴随 搅拌，至近终点时，将滴定管的尖端提出液面，用少量水 淋洗尖端，洗液并入溶液中，继续缓缓滴定，至电流计指 针突然偏转，并不再回复，即为滴定终点。
盐酸异丙肾上腺素
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Cl H2N
Cl
H C CH2 NH C(CH3)3 HCl OH
盐酸克仑特罗
HO CH2OH
H C CH2 NH C(CH3)3 OH
+ HCl
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ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
（3）室温条件下滴定 10～30℃ （4）滴定速度： 先快后慢
滴定管尖端插入液面下2/3处，滴定液 一次大部分放下，近终点时方改为慢速滴 定。
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3. 指示终点的方法 （1）永停滴定法 ChP（2005）、BP（1998）
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永停滴定法（附录ⅦA）
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NO+ ClNH2 慢
H N NO
快
快
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N N OH N N+Cl-
HNO2 HBr ƒ NOBr H2O （1）K1
HNO2 HCl ƒ NOCl H2O （2）K2
∵ K1 ≈ 300 K2 加入KBr，可增大被测溶液中NO+的浓 度，所以能加快重氮化反应速度
Ar
NH2
HCl NaNO2
重氮盐
OH- 橙黄～猩红色
萘酚
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直接：盐酸普鲁卡因、对氨基水杨酸 钠 、苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺
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盐酸普鲁卡因 ChP（2005） 【鉴别】 （4）本品显芳香第一胺类的鉴 别反应（附录Ⅲ）
取供试品约50mg，加稀盐酸1m1，必要时缓 缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亚硝酸钠溶 液数滴，滴加碱性β-萘酚试液数滴，视供试品 不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。
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（2）酸的种类及其浓度 在不同酸中重氮化反应的速度为： HBr＞HCl ＞ H2SO4 ＞ HNO3 盐酸: 1:2.5～6
加入盐酸：
① 重氮化反应速度加快；
② 重氮盐在酸性溶液中稳定； ③ 防止生成偶氮氨基化合物，而影响测定结果
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N N+Cl- + H2N N N NH
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（七）IR 盐酸布比卡因 ChP（2005）
【鉴别】（3）本品的红外光吸收图谱与对 照的图谱（光谱集324图）一致。
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三、杂质检查 （一）对乙酰氨基酚
1. 有关物质 杂质来源： 中间体、副产物及分解产物 检查方法： TLC 对氯乙酰苯胺： 杂质对照品法 其他杂质： 参比杂质对照品法
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（三）具脂烃胺侧链，弱碱性，可与生物碱 沉淀试剂发生沉淀反应进行鉴别或非水碱量 法测定含量。 （四）游离碱易溶于有机溶剂，其盐可溶于 水。
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（五） 某些特征取代基（如酚羟基）的反应 （六） UV （七） IR
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二、鉴别试验 （一）重氮化—偶合反应
芳香第一胺类鉴别反应
第 六章
胺类药物的分析
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第一节 芳胺类药物的分析
常见的芳胺类药物 对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构
O
H
R1N
C OR2
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H2N
COOC2H5
苯佐卡因
H2N
COOCH2CH2N(C2H5)2 HCl
盐酸普鲁卡因
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CH3(CH2)3NH
COOCH2CH2N(C2H5)2 HCl
对乙酰氨基酚 HCl、对氨基酚
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盐酸丁卡因 NaNO2 H （乳白色）
（二）三氯化铁反应 对乙酰氨基酚
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（三）与重金属离子反应
1. 与铜和钴离子反应
盐酸利多卡因
硫酸铜
碳酸钠
蓝紫色
氯仿
黄色
盐酸利多卡因 CoCl 2 H 亮绿色细小
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2．羟肟酸铁盐反应
（六）UV 盐酸布比卡因 ChP（2005）
【鉴别】 （2）取本品，精密称定，按干 燥 品 计 算 ， 加 0.01mol/L 盐 酸 溶 液 制 成 每 1mL 中 含 0.40mg 的 溶 液 ， 照 分 光 光 度 法 （附录ⅣA）测定，在263nm与271nm的 波长处有最大吸收；其吸收度分别为 0.53～0.58与0.43～0.48。
更深（0.005％）。
允许杂质存在的最大量
L
供试品量
100%
50 10 6
100% 0.005%
1.0
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2. 盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的
检查
杂质来源： 水解产生 检查方法： TLC 杂质对照品法
允许杂质存在的最大量
L
供试品量
100%
30 103 10 100% 1.2% 2.5 10
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四、含量测定 （一）亚硝酸钠滴定法
1. 原理： 具芳伯氨基的药物
Ar NH2 + NaNO2 + 2 HCl
+ Ar CNl- N+ NaCl+ 2 H2O
具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。具潜在芳 伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）经水 解，芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用 本法测定。