微生物检验第二十章 不发酵菌及检验讲义

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非发酵菌PPT课件

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非发酵菌及检验
1
一. 概论
非发酵菌(nonfermenters)是指一群不利用或仅以氧 化形式利用糖类的革兰阴性无芽胞杆菌, 需氧或兼性 厌氧.
基本特点: 1. 大多数为机会致病菌; 2. 存在于自然环境; 3. 多为正常菌群的一部分; 4. 对很多抗生素有天然的抗药性。
2
近几年,从临床标本中分离的非发酵菌的 比例逐年上升,目前已经约占分离的阴性 菌的40%。 非发酵菌的耐药性一般情况下都比肠杆菌 科细菌明显,常常表现为多重耐药性,并 且耐药性发展很快。
1998
1999
2000
2001
铜绿 大肠 肺克 不动 肠杆 嗜麦芽 变形 沙雷 其他假单 构椽酸
8
非发酵菌与其他细菌的区别
1. 与其他阴性杆菌的区别: 肠杆菌,弧菌科等
2. 与易脱色的革兰阳性菌区别.
9
辨认非发酵菌的基本方法
1. 在克氏铁琼脂(KIA)上为K/K; 2. 大多数氧化酶阳性; 3. 细菌多不能在麦康凯平板上生长或 生长不良.
2.恶臭假单胞菌: 特点:产荧光素,4℃和42℃不生长, 不产绿脓素
3.斯氏假单胞: 特点:42℃生长,精氨酸双水解酶阴性
27
不动杆菌属
共同特征: 氧化酶阴性, 不发酵糖类, 无动 力,硝酸盐试验阴性。 生物学性状: 1. 形态: 革兰阴性杆菌,多为球杆状,常 见成对排列无芽胞,无鞭毛。 2. 培养特性: 专性需氧菌, 最适生长温度 为35℃,营养要求不高,麦康凯、血平 板均生长。
动力 非发酵菌
OX +-来自嗜麦芽窄食单胞菌+ 端鞭毛
葡萄糖产酸
- 产碱杆菌属
+ 尿素
- 无色杆菌属 + 土壤杆菌属

临床检验技师-微生物检验(2019)讲义第二十章_不发酵菌及检验

临床检验技师-微生物检验(2019)讲义第二十章_不发酵菌及检验

第二十章不发酵菌及检验(不发酵G-杆菌)本章内容概述假单胞菌属(一)铜绿假单胞菌(二)嗜麦芽窄食单胞菌不动杆菌属、产碱杆菌属、黄杆菌属、莫拉菌属军团菌属不发酵菌概述不发酵或仅氧化形式利用葡萄糖的革兰阴性无芽胞杆菌;大部分为专性需氧菌。

包括13个属。

大多为条件致病菌。

除不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌及个别假单胞菌外,氧化酶试验均为阳性。

氧化-发酵(O-F)试验是确定非发酵菌与发酵菌以及测定非发酵菌是否利用糖的基本试验。

麦康凯琼脂上:假单胞菌属、不动杆菌属、产碱杆菌属等生长,而莫拉菌属和艾肯菌属等不生长。

假单胞菌属铜绿假单胞菌——生物学特性形态与结构形态:细长杆菌。

染色:G-。

特殊结构:无芽胞,无荚膜。

有1~3根鞭毛,运动活泼。

培养特性营养要求:不高。

气体环境:专性需氧。

温度环境:最适35℃,4℃不生长。

菌落特点:普通琼脂平板:圆形大小不一,边缘不整齐、扁平、隆起、光滑湿润且常呈融合状态的菌落。

血液琼脂平板:扁平、湿润、有特殊气味的灰绿色或蓝绿色菌落,有金属光泽;周围有透明溶血环。

选择培养基:(麦康凯琼脂培养基)微小无光泽半透明菌落,48h菌落中心常呈棕绿色。

(SS琼脂培养基)类似沙门菌的菌落,稍久菌落可呈棕绿色。

产生的主要色素:①绿脓素,为蓝绿色,无荧光性;②绿色荧光素。

铜绿假单胞菌——微生物检验及鉴定标本采集:根据病情采集相应的临床标本。

形态学检查分离培养:依据菌落特征、色素(约10%菌株不产生色素)、气味等以及涂片染色结果。

生化试验(鉴定)耐药性具有多重耐药。

初代敏感的菌株在治疗3~4d后可能发生耐药。

亚胺培南耐药主要原因之一是产生金属酶。

铜绿假单胞菌——致病性及临床意义俗称绿脓杆菌。

是医院感染的主要病原体之一。

引起的局部感染常见于烧伤或创伤后,亦可引起中耳炎、角膜炎、尿道炎和下呼吸道感染,甚至引起心内膜炎、肺炎,严重者可引起败血症,死亡率甚高。

假单胞菌属嗜麦芽窄食单胞菌革兰阴性杆菌。

端鞭毛1~8根,有动力、无芽胞、无荚膜。

非发酵菌专题知识讲座

非发酵菌专题知识讲座

检验措施
❖鉴定:氧化酶阳性,触酶阳性,O-F试
验氧化型、木糖产酸不产气,液化明胶, 还原硝酸盐产生氮气,吲哚阴性,利用枸 橼酸盐,精氨酸双水解酶阳性。
❖ 铜绿假单胞菌迅速鉴定要点:
❖ 1、能产生绿色素。 ❖ 2、血平板上菌落大而扁平、湿润、边沿
不齐;有金属光泽;有生姜样气味;菌 落周围有宽敞旳兰绿色透明溶血环。 ❖ 3、氧化酶阳性
黄杆菌属
❖ 3.存在于水、土壤和蔬菜中,还可从口腔、上呼 吸道、皮肤中检出,是条件致病菌,也是引起医 院感染旳常见菌。可引起术后感染、菌血症、在 新生儿及婴幼儿旳化脓性脑膜炎中分离出脑膜败 血性黄杆菌百分比较高。
黄杆菌属
❖ 4. G-杆菌,需氧代谢,血琼脂培养基生长 良好,经典菌落为淡黄色,氧化酶、触酶、磷酸 酶阳性。
黄杆菌属
❖ 5. 临床上常见旳脑膜炎败血性黄杆菌及芳香黄 杆菌对广谱抗菌药(如氨基糖甙类、β-内酰胺酶 类、四环素类、氯霉素)有耐药性,应根据药敏 试验选择用药。
莫拉菌属
❖ 1.与临床有关旳有缺陷莫拉菌、犬莫拉菌、非 液化莫拉菌、亚特兰大莫拉、林肯莫拉菌、苯丙酮 酸 莫 拉 菌 、 奥 斯 陆 莫 拉 。 DNA G+Cmol % 为 40 ~ 47.5。
临床意义
❖ 假单胞菌属分布广泛,土壤、水和空气中都有 存 在 , 人 类 非 发 酵 菌 感 染 中 , 假 单 胞 菌 占 70 % ~ 80%,主要为铜绿假单胞菌,其他较为常见旳菌种 有嗜麦芽窄食单胞菌、荧光假单胞菌、恶臭假单胞 菌、产碱假单胞菌等。这些菌种也是医院感染旳主 要病原菌。
微生物特征
毛抗原。
❖抵抗力:耐潮湿、干燥、紫外线,不耐热和消
毒剂,临床分离旳菌株多耐药。
铜绿假单胞菌检验

微生物检验第二十章 不发酵菌及检验练习

微生物检验第二十章 不发酵菌及检验练习

第二十章不发酵菌及检验一、A11、非发酵菌是指一群不发酵或不分解糖类的A、革兰阴性无芽胞需氧杆菌B、革兰阴性无芽胞厌氧杆菌C、革兰阴性球菌D、革兰阳性芽胞需氧杆菌E、革兰阳性芽胞厌氧杆菌2、在普通琼脂培养基中可产生多种色素是A、不动杆菌B、产碱杆菌C、铜绿假单胞菌D、黄杆菌E、莫拉菌3、在含有蛋白胨的肉汤培养基中产氨,使pH上升至8.6的细菌是A、假单胞菌属B、不动杆菌属C、产碱杆菌属D、黄杆菌属E、莫拉菌属4、铜绿假单胞菌可产生的多种致病物质是A、内毒素,外毒素,菌毛B、内毒素,外毒素,芽胞C、内毒素,菌毛,芽胞D、外毒素,菌毛,芽胞E、外毒素,菌毛,黏附素5、铜绿假单胞菌引起的局部感染常见于A、失血性休克B、烧伤或创伤后C、尿路感染D、肠道感染E、介入性治疗后6、铜绿假单胞菌培养特性为A、专性需氧B、专性厌氧C、兼性厌氧D、微需氧E、以上都是7、军团菌生长对营养和培养环境的要求严格,其中哪种物质是军团菌生长所需要的A、丝氨酸和铁B、蛋氨酸和半胱氨酸C、苏氨酸和铁D、苯丙氨酸和半胱氨酸E、半胱氨酸和铁8、军团菌感染后,不易采集哪种标本进行微生物学检查A、痰B、肺泡盥洗液C、粪便D、活检肺组织E、血9、下列最适宜用于军团菌培养的培养基是A、BCYE琼脂培养基B、庆大霉素培养基C、巧克力培养基D、吕氏鸡蛋血清培养基E、亚碲酸盐血琼脂10、下列有关嗜肺军团菌的描述,错误的是A、生长繁殖较快B、有鞭毛,无芽胞C、最适生长温度35℃D、主要通过呼吸道传播E、培养需用含半胱氨酸和铁的培养基11、军团菌感染的首选治疗药物是A、青霉素B、阿米卡星C、加替沙星D、红霉素E、左氧氟沙星12、对非发酵菌的叙述正确的是A、分解糖类(+)、革兰阴性、杆菌B、分解糖类(-)、革兰阳性、杆菌C、分解糖类(-)、革兰阴性、球菌D、分解糖类(+)、革兰阳性、杆菌E、分解糖类(-)、革兰阴性、杆菌二、A21、女,22岁,住院一周后出现呼吸道感染症状。

非发酵菌及检验

非发酵菌及检验
1、标本采集:血液、脑脊液、胸腹水、尿 液、痰液、脓汁等。医院环境监控:可采空气、 水、物体表面等。 2、检验程序
3、检先增菌,再转 种血平板和麦康凯平板分离;脓汁、分泌物、 尿可直接种于上述培养基分离培养。
(3)鉴定:根据菌落特征、色素、 生姜气味、菌体形态、氧化酶试验等 作出鉴定。对无色素的菌株应与其他 假单胞菌鉴别。
铜绿假单胞菌的检验程序:
血液 体液
脑脊液、胸腹水、脓汁、痰、尿液 粪便
分离培养 血、麦康凯
增 菌 营养肉汤
直接涂片染色
分离培养 SS、麦康凯
初步鉴定 菌落特征,色 素 菌体形态、氧化酶
最后鉴定
生化反应
分型:血清学
噬菌体
铜绿假单胞菌的鉴定要点及与其他假单胞菌的区别
试 验 铜绿假 单胞菌 + 荧光假 单胞菌 + 恶臭假 单胞菌 + 斯氏假 单胞菌 + 嗜麦芽 假单胞 _ 鼻疽假 单胞菌 +/_ 类鼻疽 假单胞 +
挑选可疑菌落
最后鉴定 生化反应
初步鉴定 KIA:底层、斜面不变 硝酸盐还原、氧化酶、 动力
不动杆菌属主要菌种生化反应特征
醋酸钙不 动杆菌 鲍曼不 动杆菌 溶血不 动杆菌 琼氏不 动杆菌 约翰逊 不动杆菌 洛菲不 动杆菌
葡萄糖氧化
木糖氧化 乳糖氧化 精氨酸双水解酶

_ + +

+ + +
+/_
+/_ _ +
琼氏不动杆菌
约翰逊不动杆菌
一、生物学性状
形态与染色 革兰阴性球杆菌,常成双排列, 不易退色,多数有荚膜、无芽孢、无鞭毛。 培养特性 专性需养,营养要求不高。
最适温度35℃ ,鲍曼不动杆菌42℃可生长。 血平板上 圆形凸起、2~3 mm ,光滑、边 缘整齐、灰白色的菌落,部分菌落呈黏液状(溶 血不动杆菌可形成 β -溶血环); 不产生色素。 麦康凯平板 形成粉红色菌落。

非发酵菌及检验共53页文档

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Байду номын сангаас
40、学而不思则罔,思而不学则殆。——孔子
1、不要轻言放弃,否则对不起自己。
2、要冒一次险!整个生命就是一场冒险。走得最远的人,常是愿意 去做,并愿意去冒险的人。“稳妥”之船,从未能从岸边走远。-戴尔.卡耐基。
梦 境
3、人生就像一杯没有加糖的咖啡,喝起来是苦涩的,回味起来却有 久久不会退去的余香。
非发酵菌及检验 4、守业的最好办法就是不断的发展。 5、当爱不能完美,我宁愿选择无悔,不管来生多么美丽,我不愿失 去今生对你的记忆,我不求天长地久的美景,我只要生生世世的轮 回里有你。
谢谢!
36、自己的鞋子,自己知道紧在哪里。——西班牙
37、我们唯一不会改正的缺点是软弱。——拉罗什福科
xiexie! 38、我这个人走得很慢,但是我从不后退。——亚伯拉罕·林肯
39、勿问成功的秘诀为何,且尽全力做你应该做的事吧。——美华纳

非发酵菌群的分类鉴定优秀课件

非发酵菌群的分类鉴定优秀课件

麦康凯培 养基上生 长 生长 生长 生长 不易或— — 不定 生长 生长 抑制或— — 生长
非发酵菌群 氧化酶
+
假单胞菌属,产碱杆菌属,黄杆菌属, 支气管败血鲍特氏菌,金氏杆菌属, 无色杆菌属,莫拉氏菌属,艾肯氏菌属, 土壤杆菌属。

不动杆菌属 寡氧单胞菌属 付百日咳鲍特氏菌
(一)、氧化酶阴性菌群的 属间鉴别
黄色素
+

黄杆菌属
莫拉氏菌属
假单胞菌属 产碱杆菌属
无色杆菌属 土壤杆菌属
鞭毛染色
端毛菌
周毛菌
假单胞菌属
产碱杆菌属,无色杆菌属,土壤杆菌属
O型
O/F —
无色杆菌属,土壤杆菌属
还原硝酸盐后产气
+

产碱杆菌属
土壤杆菌属
无色杆菌属
第四节、非发酵菌群的属内鉴别
一、假单胞菌属和 寡氧单胞菌属
假单胞菌属属假单胞菌科,该属为严格 的专性需氧的革兰氏阴性杆菌,具有一 端鞭毛,无荚膜、无芽孢。该菌属在自 然界中分布广泛,营养要求不高,氧化 酶试验均为阳性,是假单胞菌科的代表 胞菌在普通琼脂培养基上能 产生水溶性绿色素,使整个培养基变为绿色。
(2)、在血平板上经35—37℃,18—24h培养 可表现为:菌落灰绿色、半透明、大而扁平、 表面湿润、边缘不齐;有金属光泽;有生姜样 芳香气味;菌落周围有宽大的兰绿色透明溶血 环。
莫拉氏菌属,艾肯氏菌属,土壤杆菌属。
触酶
+

假单胞菌属,产碱杆菌属,黄杆菌属,
金氏杆菌属,
支气管败血鲍特氏菌,无色杆菌属,
艾肯氏菌属
莫拉氏菌属,土壤杆菌属
O/F
动力
弱F

非发酵菌 微生物学检验

非发酵菌 微生物学检验

非发酵G-杆菌(nonfermentative G- Bacilli)1. 非发酵菌是一群需氧、无芽孢、不利用糖或仅能氧化分解糖类是做为能量来源的G-杆菌。

(1)通常所讲的非发酵菌指在KIA中24小时内表面能够生长,在底部不生长的需氧G-杆菌。

(2)非发酵菌与其它苛养或非糖发酵的G-杆菌之间的界限只是传统意义上的,并不是根据明确的遗传或表型特点来划分。

(3)多为条件致病菌,近年来日益增多,尤其是医院感染。

2. 分类与命名:主要的非发酵G-杆菌属被分成6个科:(1)假单胞菌科:根据rRNA-DNA同源性分为5个rRNA群①rRNAⅠ群/假单胞菌属;②rRNAⅡ群/伯克霍尔德菌属;③rRNAⅢ群/丛毛单胞菌属、食酸菌属;④rRNAⅣ群/短波毛单胞菌属;⑤rRNAⅤ群/窄食单胞菌属;⑥其它:鞘氨醇单胞菌属、希瓦菌属等(2)产碱杆菌科:产碱杆菌属;(3)黄杆菌科:华丽杆菌属(4)莫拉菌科:不动杆菌属、莫拉菌属;(5)甲基球菌科;(6)根瘤菌科3. 非发酵菌的基本鉴定要求(1)缺少糖发酵的证据,通常是在KIA或TSI培养基中无酸产生,斜面和底部均呈红色。

(2)氧化酶+(不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌、唐菖蒲伯克菌、浅黄华丽单胞菌、栖稻黄素单胞菌-),但并非所有氧化酶+的G-杆菌都是非发酵菌。

(3)麦康凯上生长很差或不生长。

(4)动力:多为+,但多为专性需氧,故半固体培养基中不明显,宜用直接动力观察或染色法。

4. 重要的鉴定试验(1)葡萄糖利用(O/F试验):O/F培养基:蛋白胨和糖类的比例为1:5而不同于发酵菌的1:2。

(2)氧化酶试验:(3)动力:半固体培养基:应只穿刺培养基顶部4mm,在培养4-6小时后首次观察结果,24和48小时后再次观察结果。

更准确的方法是湿片法和鞭毛染色。

(4)色素形成:非发酵菌可形成多种色素,有助于菌种的鉴定。

(5)硝酸盐还原/产气:将硝酸盐还原成亚硝酸盐,进而释放氮的生化过程。

(6)吲哚试验:需用含色氨酸丰富的培养基,产吲哚黄杆菌、脑膜败血黄杆菌、食酸丛毛单胞菌等+。

非发酵菌特征及鉴定思路PPT课件

非发酵菌特征及鉴定思路PPT课件

.
55
产KPC酶
国内: • 已在肠杆菌科的多个菌属中有报道。 • 肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、大肠埃希菌、产酸克雷伯菌、
沙门菌属、弗劳地柠檬酸杆菌和铜绿假单胞菌等。
• 该类酶除阴沟肠杆菌可有染色体介导外,其他各类细菌均 可为质粒介导,已成为临床治疗难题
.
56
如何检测?
• 产KPC酶的菌株用判断标准:
不是细菌分类的正式名称 是对一大群细菌 的统称 包括不同的科、属、种
不发酵葡萄糖有氧方式代谢
缺乏糖酵解酶类
代谢必须在有氧环境中进行
.
4
非发酵菌的分类和命名
与肠杆菌科不同,非发酵菌不能简单地归 于具有明显特征的某一菌科,且很多非发酵 菌的正确分类问题仍未解决 主要的非发酵菌分为6个科 1 分类不明 其余不属于以上菌科的非发酵菌暂时归类 于分类学尚未明确的细菌
非发酵阴性杆菌特征 及鉴定思路
.
1
内容
• 非发酵细菌分类
• 主要非发酵细菌特征
• 非发酵细菌耐药特征
• 临床最常分离非发酵细菌鉴定
.
2
非法酵革兰阴性杆菌感染特点
• 引起临床各科室 人体各部位感染 • 鉴定比肠杆菌科复杂 • 耐药谱广 临床治疗困难
.
3
非发酵菌的分类和生物学特性
非发酵菌 Nonfermentative Bacilli
对第三、第四代头孢菌素耐药)的肠杆菌科细 菌采用纸片法或MIC法(E-试验)进行厄他培南 (和其他碳青霉烯类)的测定。 • 如MIC为2或4μg/ml应视作有产KPC酶和其他碳 青酶霉烯酶的可能。
• 这时应与临床医师联系,并将该菌株送往参考 试验室作进一步的研究。
.
58

《非发酵菌及检验》课件

《非发酵菌及检验》课件

非发酵菌感染可引起机体免疫应 答异常,导致免疫损伤和感染扩 散。
临床表现
肺部感染
非发酵菌引起的肺部感染症状包括咳嗽、咳痰、呼吸 困难等。
泌尿系统感染
尿频、尿急、尿痛等泌尿系统感染症状也是非发酵菌 感染的常见表现。
其他感染
非发酵菌还可引起败血症、脑膜炎、心内膜炎等严重 感染,出现相应的临床表现。
诊断与治疗
阴性等。
非发酵菌对某些抗生素敏感或耐 药,因此需要根据药敏试验结果
进行治疗。
非发酵菌在自然界中广泛分布, 如土壤、水源、空气等,也常常 引起医院感染,如伤口感染、肺
炎等。
02 非发酵菌的检测方法
分离培养法
分离培养法是非发酵菌检测的传统方 法,通过选择性培养基将非发酵菌从 样本中分离出来,然后进行形态学和 生化鉴定。

非发酵菌感染常引起医院感染爆发事件 非发酵菌对常用消毒剂和抗生素具有较
,如泌尿道感染、呼吸机相关肺炎等。
高的耐药性,给治疗带来困难。
04 非发酵菌的致病性
致病机制
01
黏附作用
非发酵菌能够黏附在人体黏膜上 皮细胞上,进而侵入细胞间隙和 基质,引发感染。
毒素产生
02
03
免疫损伤
部分非发酵菌能够产生毒素,这 些毒素对人体细胞有毒害作用, 导致感染症状。
缺点是分离时间长,容易受到杂菌干 扰,且对某些非发酵菌的分离效果不 佳。
分离培养法的优点是操作简单,对设 备要求不高,适用于大多数非发酵菌 的分离。
免疫学检测法
免疫学检测法利用抗原-抗体反 应的原理,通过特异性抗体检 测非发酵菌的抗原。
免疫学检测法的优点是灵敏度 高、特异性强,适用于大量样 本的快速检测。

2017年主管检验技师考试微生物检验讲义第20章不发酵菌及检验

2017年主管检验技师考试微生物检验讲义第20章不发酵菌及检验

不发酵菌及检验一、概述不发酵菌主要是指一群不发酵或不分解糖类的革兰阴性无芽胞需氧杆菌。

目前,不发酵菌包括13个属。

主要有假单胞菌属、不动杆菌属、产碱杆菌属、莫拉菌属、黄杆菌属等。

这些细菌大多为条件致病菌。

对于不发酵菌的鉴定,必须首先进行种属间的鉴别,然后进行种间的鉴定。

一般实验室只需用几项试验,如氧化酶、O-F试验、动力及鞭毛、菌落色素、硝酸盐还原试验以及在麦康凯琼脂上的生长情况等即可对90%~95%分离的菌株作出初步鉴定。

1.培养温度多数不发酵菌适宜生存于自然界,培养温度以30℃为宜。

有的更适宜生长于室温(18~22℃)。

故常规标本应先培养于35~37℃,再培养于30℃或室温。

2.动力与鞭毛在不发酵菌的鉴定中,细菌是否具有鞭毛及鞭毛的特点有重要的诊断意义。

由于不发酵菌大部分为专性需氧菌,在半固体培养基上观察动力不明显,因细菌在琼脂表面生长,底层穿刺生长不良或不生长,故观察不发酵菌的动力以30℃或室温12~24小时培养物悬滴法为准。

有时需借助鞭毛染色予以鉴定。

3.氧化酶试验该试验是鉴定不发酵菌的重要试验,不发酵菌中除不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌及个别假单胞菌外,氧化酶试验均为阳性。

4.氧化-发酵(O-F)试验本试验是确定不发酵菌与发酵菌以及测定不发酵菌是否利用糖的基本试验。

不发酵菌对葡萄糖的代谢特点是氧化型产生微量酸。

Hugh-Leifson设计的O-F培养基只含0.2%蛋白胨,1%的糖和指示剂溴麝香草酚蓝。

检测时接种细菌于2管O-F培养基,在第一管培养基的表面加盖一层无菌液状石蜡或无菌溶解凡士林(称闭管),另一管则不加(称开管)。

经培养后,开管产酸,闭管不变,表示细菌氧化利用糖类;如开管和闭管都产酸,表示细菌都发酵分解糖类;若两管都无变化,表示细菌不能利用糖类。

根据细菌在此培养基中生长情况与结果,可区别细菌为氧化型或发酵型。

5.在麦康凯琼脂上生长情况如假单胞菌属、不动杆菌属、产碱杆菌属等生长,而莫拉菌属和艾肯菌属等不生长。

第二十一章非发酵菌及检验ppt课件

第二十一章非发酵菌及检验ppt课件

绿脓杆菌 产碱杆菌
2019
-
4
5. MAC上的生长情况
一般都生长良好,如假单胞菌属、不 动杆菌属、产碱杆菌属,而莫拉杆菌属等 不生长。
2019
-
5
假单胞菌属
❖假单胞菌属(Pseudomonas)是非发酵菌
中的一大属,是假单胞菌科的代表菌属。
❖本属菌为需氧、有端鞭毛、无芽孢、无荚 膜、氧化酶阳性的革兰阴性杆菌。大多数 为条件致病菌,是医院感染的主要病原菌, 常见的有铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞 菌、荧光假单胞菌、恶臭假单胞菌等。
❖生化反应:氧化酶 - ,MIU - - - ,硝酸盐 还原试验 - 。
❖耐药性:对全部氨基青霉素、一代二代头 孢菌素和一代喹诺酮类抗生素天然耐药。
2019
-
21
2019
-
22
鲍曼不动杆菌在BAP上的生长现象
2019
-
23
莫拉菌属
❖莫拉菌属(Moraxella)为条件致病菌,能 引起眼结膜炎、肺炎、脑膜炎等。
4. 明胶液化试验:+
5. 硝酸盐还原产气(N2)试验:+
6. 精氨酸双水解酶:+
2019
-
13
生物学性状
铜绿假单胞菌
抗原构造
1. 菌体抗原(O):包括外膜蛋白、脂多 糖两种成分。
2. 鞭毛抗原(H)
抵抗力
对外界的抵抗力比其他无芽胞菌强;对 多种抗生素不敏感。
2019
-
14
致病性
铜绿假单胞菌
致病物质
❖本属菌对理化因素的耐受性较强,对多种 抗生素耐药。
2019
-
6
铜绿假单胞菌
❖铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)是假单胞

微生物学检验非发酵菌及检验

微生物学检验非发酵菌及检验

涂片 染色镜检
标本
分离培养 (血平板、麦康凯)
可疑菌落
血标本 增菌
涂片 动力观察 革兰染色 鞭毛染色
氧化酶
O/F 硝酸盐还原
KIA斜面底层不变色 其他生化反应
测验1
关于铜绿假单胞菌,错误的是 A 革兰阴性杆菌 B 氧化酶-、触酶- C 硝酸盐还原- D 产生水溶性蓝绿色素 E 菌落有金属光泽
测验2
黄杆菌科
革兰阴性杆菌,无鞭毛 专性需氧、营养要求不高,普通平板上 生长,形成黄色色素 麦康凯平板上不生长 氧化酶+ O/F:O
莫拉菌属
革兰阴性球杆菌 ,不易脱色,成双排列 (与奈瑟菌相似),无鞭毛,部分菌株 有荚膜 专性需氧,营养要求高,普通平板上不 生长 氧化酶+ O/F:-
非发酵菌--检验程序
流感嗜血杆菌与金 黄色葡萄球菌在血 平板上共同孵育时, 由于后者能合成较 多的V因子,在金黄 色葡萄球菌菌落周 围生长的流感嗜血 杆菌的菌落较大, 离金黄色葡萄球菌 菌落越远的越小。
卫星现象
根据荚膜抗原分ABCDEF六型,B型 毒力最强
可产生自溶酶
致病物质:荚膜、菌毛、内毒素、 IgA蛋 白酶
所致疾病
军团菌
是引起军团菌病的病原体 首发于1976年的美国一次军人聚会,故 称作军团病 1982年,在我国南京首次证实了军团菌病。
形态染色
革兰阴性,但不易被着色 杆菌,形态有多形性 Gimenen染色,菌体呈红色,背景为绿 色 不形成芽孢,无荚膜 , 有端生或侧生鞭毛
培养特性
营养要求高 专性需氧 需~5%CO2 生长缓慢 常用培养基及菌落特征 BCYE培养基:灰白色、圆形光滑湿润菌落 F-G培养基:针尖大小、黄色荧光
铜绿假单胞菌--分型检查
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第二十章不发酵菌及检验
(不发酵G-杆菌)
本章内容
概述
假单胞菌属
(一)铜绿假单胞菌
(二)嗜麦芽窄食单胞菌
不动杆菌属、产碱杆菌属、黄杆菌属、莫拉菌属
军团菌属
不发酵菌概述
不发酵或仅氧化形式利用葡萄糖的革兰阴性无芽胞杆菌;大部分为专性需氧菌。

包括13个属。

大多为条件致病菌。

除不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌及个别假单胞菌外,氧化酶试验均为阳性。

氧化-发酵(O-F)试验是确定非发酵菌与发酵菌以及测定非发酵菌是否利用糖的基本试验。

麦康凯琼脂上:假单胞菌属、不动杆菌属、产碱杆菌属等生长,而莫拉菌属和艾肯菌属等不生长。

假单胞菌属
铜绿假单胞菌——生物学特性
形态与结构
形态:细长杆菌。

染色:G-。

特殊结构:无芽胞,无荚膜。

有1~3根鞭毛,运动活泼。

培养特性
营养要求:不高。

气体环境:专性需氧。

温度环境:最适35℃,4℃不生长。

菌落特点:
普通琼脂平板:圆形大小不一,边缘不整齐、扁平、隆起、光滑湿润且常呈融合状态的菌落。

血液琼脂平板:扁平、湿润、有特殊气味的灰绿色或蓝绿色菌落,有金属光泽;周围有透明溶血环。

选择培养基:(麦康凯琼脂培养基)微小无光泽半透明菌落,48h菌落中心常呈棕绿色。

(SS琼脂培养基)类似沙门菌的菌落,稍久菌落可呈棕绿色。

产生的主要色素:①绿脓素,为蓝绿色,无荧光性;②绿色荧光素。

铜绿假单胞菌——微生物检验及鉴定
标本采集:根据病情采集相应的临床标本。

形态学检查
分离培养:
依据菌落特征、色素(约10%菌株不产生色素)、气味等以及涂片染色结果。

生化试验(鉴定)
耐药性
具有多重耐药。

初代敏感的菌株在治疗3~4d后可能发生耐药。

亚胺培南耐药主要原因之一是产生金属酶。

铜绿假单胞菌——致病性及临床意义
俗称绿脓杆菌。

是医院感染的主要病原体之一。

引起的局部感染常见于烧伤或创伤后,亦可引起中耳炎、角膜炎、尿道炎和下呼吸道感染,甚至引起心内膜炎、肺炎,严重者可引起败血症,死亡率甚高。

假单胞菌属
嗜麦芽窄食单胞菌
革兰阴性杆菌。

端鞭毛1~8根,有动力、无芽胞、无荚膜。

菌落不溶血,有黄色素。

氧化酶阴性,葡萄糖缓慢氧化,可水解七叶苷、液化明胶、DNA酶阳性并可使赖氨酸脱羧。

不动杆菌属
球杆状,并成对排列,可单个存在。

无芽胞、无鞭毛。

专性需氧菌。

“三阴”:即氧化酶阴性,硝酸盐还原试验阴性和动力阴性。

临床重要的为醋酸钙不动杆菌、鲍曼不动杆菌和洛菲不动杆菌。

产碱杆菌属
G-短杆菌,有时呈弧状,单个、成对或链状排列。

无芽胞,多数菌株无荚膜,本菌属菌为周毛菌。

需氧,液体培养基中浑浊生长,表面形成菌膜,管底形成黏液沉淀;含有蛋白胨的肉汤中产氨,使pH 上升可至8.6;普通培养基上生长良好。

氧化酶、触酶均阳性,不分解糖类,O/F培养基中呈碱性反应,尿素、硫化氢、吲哚、明胶液化均阴性。

人肠道及皮肤正常菌群、条件致病菌,引起医院感染。

黄杆菌属
G-杆菌。

无动力、无芽胞、无荚膜。

血平板上典型菌落呈淡黄色、黄色或棕黄色。

氧化酶、触酶、磷酸酶阳性。

芳香黄杆菌、脑膜炎败血性黄杆菌较常见。

莫拉菌属
G-杆菌,具有多形性。

营养要求较高,最适生长温度为32~35℃。

氧化酶阳性,触酶阳性,无动力,不分解任何糖类,吲哚试验阴性。

可从人类或温血动物体内检出。

是导致中耳炎、鼻窦炎、支气管炎和肺炎的病原体。

军团菌属——生物学特性
形态与结构
形态:杆菌。

染色:G-;常规染色不易着色。

特殊结构:有端生或侧生鞭毛。

无芽胞、无荚膜、有菌毛。

培养特性
营养要求:苛刻。

气体环境:专性需氧。

在含有2.5%~5% CO2环境中生长良好。

温度环境:最适36℃。

菌落特点:初次分离需L-半胱氨酸,培养基中含铁盐可促进生长。

活性炭-酵母浸出液琼脂(BCYE)培养基:培养3~5d形成圆形,凸起、灰白色、有光泽的菌落。

抗原
具有0、H抗原,H抗原无特异性,0抗原具有特异性。

抵抗力
人工管道的水源中常存在此菌,如医院空调冷却水中常有此菌,对常用化学消毒剂敏感。

军团菌属——微生物检验及鉴定
标本采集:下呼吸道分泌物、胸水、肺组织及血液等。

形态学检查:意义不大。

分离培养:培养难度大。

分离培养后的菌落进行革兰染色镜检,进行生化试验。

也可利用PCR技术及荧光抗体染色进行鉴定。

生化试验(鉴定)
血清学诊断
检测军团菌抗体IgG、IgM。

军团菌属——致病性及临床意义
可引起军团病,主要由嗜肺军团菌导致。

轻症型类似流感,患者有发热、头痛、无力等症状。

重症型是以肺部感染为主要特征,常导致多器官损害,最终导致呼吸衰竭死亡。

经典例题
铜绿假单胞菌培养特性为
A.专性需氧
B.专性厌氧
C.兼性厌氧
D.微需氧
E.需5%~10%CO2
『正确答案』A
『答案解析』铜绿假单胞菌为专性需氧菌。

具有绿脓素的微生物是
A.军团菌
B.铜绿假单胞菌
C.肺炎克雷伯杆菌
D.流感嗜血杆菌
E.肺炎链球菌
『正确答案』B
『答案解析』铜绿假单胞菌产生的主要色素包括:①绿脓素,为蓝绿色,可溶于水和氯仿,无荧光性;
②荧光素为绿色荧光素,溶于水而不溶于氯仿。

铜绿假单胞菌的生物学特性不包括
A.革兰阴性杆菌
B.1~3根鞭毛,运动活泼
C.最适生长温度为35℃
D.在培养基上形成有特殊气味的绿色菌落
E.在SS琼脂培养基上不生长
『正确答案』E
『答案解析』铜绿假单胞菌在SS琼脂培养基上可形成类似沙门菌的菌落,稍久菌落可呈棕绿色。

患者男,35岁。

右眼被刺伤3天后,患眼红肿、疼痛、视物不清、角膜溃疡,伴大量的淡绿色分泌物。

最有可能的致病菌是
A.葡萄球菌
B.链球菌
C.铜绿假单胞菌
D.需氧芽胞杆菌
E.阿米巴
『正确答案』C
『答案解析』铜绿假单胞菌引起的局部感染常见于烧伤或创伤后,亦可引起中耳炎、角膜炎、尿道炎和下呼吸道感染。

其产生的主要色素包括:①绿脓素;②荧光素。

患者男,45岁,烧伤。

对其伤口分泌物进行细菌培养。

在血平皿上形成扁平、湿润、灰绿色、透明溶血的菌落。

最可能的细菌是
A.金黄色葡萄球菌
B.大肠埃希菌
C.铜绿假单胞菌
D.鲍曼不动杆菌
E.化脓性链球菌
『正确答案』C
『答案解析』铜绿假单胞菌引起的局部感染常见于烧伤或创伤后,其产生的主要色素包括:①绿脓素;
②荧光素。

初次分离需要L-半胱氨酸的细菌是
A.肺炎链球菌
B.大肠埃希菌
C.金黄色葡萄球菌
D.铜绿假单胞菌
E.军团菌
『正确答案』E
『答案解析』军团菌营养要求较苛刻,且生长缓慢,初次分离需L-半胱氨酸,培养基中含铁盐可促进生长。

军团菌的传播途径是
A.接触传播
B.呼吸道传播
C.输血传播
D.性接触传播
E.粪-口传播
『正确答案』B
『答案解析』军团菌的传播途径是呼吸道传播。

患者男,70岁。

临床诊断肺炎。

痰培养结果提示:革兰阴性杆菌,氧化酶阴性,无动力,硝酸盐还原试验阴性。

最有可能是
A.肺炎克雷伯菌
B.流感嗜血杆菌
C.铜绿假单胞菌
D.不动杆菌
E.肺炎支原体
『正确答案』D
『答案解析』不动杆菌属的生物学特征为“三阴”,即氧化酶阴性,硝酸盐还原试验阴性和动力阴性。

铜绿假单胞菌与醋酸钙不动杆菌的区别试验为
A.触酶试验
B.氧化酶试验
C.葡萄糖OF试验
D.在普通肉汤中生长
E.在麦康凯培养基上生长
『正确答案』B
『答案解析』铜绿假单胞菌氧化酶阳性,醋酸钙不动杆菌氧化酶阴性。

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