PCR实验室规范化管理与质量控制ppt课件
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《pcr质量管理》ppt课件
测定前的标本采集
❖采集时间 ❖标本采集过早或过晚都能够会给出假阴
性结果。当病原体感染机体后，特定的 临床标本中，病原体含量能到达PCR检 出程度的点，并不能覆盖整个感染过程， 能够只是在感染或疾病发生开展过程中 的某一个时间段。
❖如：呼吸道冠状病毒，感染发病后3-4d，
测定前的标本采集
❖标本采集部位、类型和采集量 ❖1、在临床静脉血液标本的采集上，普
❖ 简单反复：把低值的标本再做一次 ❖ 缘由讨论性反复：加大样本量重做一次
如何判别乙肝患者抗病毒治疗疗效？
❖当一个HBV-DNAPCR定量检验结果为 7.2E+08IU/ml的乙肝患者，在抗病毒药物如 拉米夫啶或干扰素治疗，两周后，再检测， 如结果为5.2E+08IU/ml，再两周后，结果为 9.0E+08IU/ml，抗病毒治疗有效吗？
测定前的标本采集
❖标本采集中的防污染 ❖1、最好采用一次性无菌及无核酸酶的资料，
不用途置便可直接运用，采集中要特别留意 防止混入操作者的头发、表皮细胞、痰液等。 ❖2、如运用玻璃器皿，必需经0.1%DEPC水处 置后高压。以使能够存在的RNase失活。
❖总而言之，标本的搜集及适当的预处置，对
测定前的标本采集
❖ 扩增效率E：指的是一个循环后的产物添加量与这 个循环的模板量的比值，其值位于0-1。在PCR的 前20或30个循环中，E值比较恒定，为指数扩增期， 随后E值逐渐降低，直至0，此时PCR到达平台期， 不再扩增。
质控物运用的功能
❖弱阳性质控样本最常见的失控缘由： ❖1、核酸提取中的随机误差。如核酸提取中的
❖三、标本运送与保管： ❖标本一经采集，那么应尽能够快的送至检测
实验室。 ❖⑴、DNA的标本，如是在无菌条件下采集，
PCR实验室全面解决方案ppt课件
30检测分析基因扩增核酸纯化样本前处理整体服务专业平台多元化应用方便高效标准化可溯源安全性实验流程天隆分子诊断实验室解决方案五大特点31实验安全自动化提取消除人为失误预封装试剂盒设计封闭式自动化提取过程首创镶嵌式温控设计一次性专供耗材数据安全全程实验信息纪录监控全运行过程操作人员实验信息断电保护自动生成纪录文件数据可通过网络和usb输出操作人员不同权限管理全面的防污染措施优化的设计和流程防飞溅设置紫外消毒装置全封闭的设置镶嵌式加热平台与仪器罩上配有磁力装置32天隆科技国内唯一能够自主研发生产核酸提取仪全套设备和试剂的厂家核酸提取仪市场占有率全国第一家忠实用户的选择天隆价值3334国家项目承载完善的产全面的解决方案卓越的服务体系rcr平台芯片平台测序平台analytics天隆科技天隆价值353637
全面的解 卓越的服 决方案 务体系
芯片平台
测序平台
RCR平台
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苏州
天隆科技-SK集团
一、企业简介-专业化生产线（13485认证）、试剂生产车间（GMP认证
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一、企业简介-天隆独特优势
l 最强研发团队及合作伙伴 ——专业化、国际化
l 最专业的售后服务 ——专家团队，完善的硬件及应用服务
l 最佳实验室整体解决方案 ——核心产品系列化，接轨知名国际品牌
1
1
全面的防污染措施
优化的设计和流程 防飞溅设置，紫外消毒装置 全封闭的设置，镶嵌式加热平台与仪器罩上配 有磁力装置
天隆价值
国内唯一能够自主研发生产核酸提取 仪、PCR扩增仪、QPCR仪全套设备和试
剂的厂家
核酸提取仪市场占有率全国 第一
2000家忠实用户的选择
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PCR质量控制 PPT
能再次投入使用 3)实验室应检查由于上述缺陷对往常所进行的检测工作的影响,
并记录相关分析、处理意见
检测、验证方法(适用于定量项目)
可校准的项目实施校准
质控品检测结果在允许范围内
与其他仪器的检测结果比较(5个样本,覆盖测量范围,至 少4个样本测量结果偏移<±7、5% )
使用留样再测结果进行判别(5个样本,覆盖测量范围,至 少4个样本测量结果偏移<±7、5% )
标本采集时间
1、血清(浆):无特别要求
2、如用泌尿生殖道分泌物做CT、NG项目:应在抗生素应用前或停 药两周后采集标本,如不能停用抗生素,应于下次抗生素应用前采 集。
3、如用痰做TB:应在抗结核药物应用前或停药两周后采集标本,如 不能停用抗结核药物,应于下次抗结核药物应用前采集。
因为PCR方法所检测的靶物质为核酸,不受标本生物活性的限制, 关于差不多死亡的病原体仍可检测出来,即感染后在药物治疗有 效的情况下,患处仍会有少量已死亡的病原体存在。
泌尿生殖道分泌物 一次性采样管(含保养液) 配套棉拭子(不含保养液)
痰液 结核分枝杆菌DNA检测标本:用4%NaOH摇匀,室温下放置30分钟左右液化, 转移至1、5ml灭菌离心管,离心,去上清,留沉淀用于核酸提取。需注意的是 液化时不能加热,液化时间不能过长。 非结核分枝杆菌DNA检测标本:痰标本在室温悬浮于灭菌生理盐水中,充分震 荡混匀,促使大块黏状物下沉,取上清离心,去上清,留沉淀用于核酸提取。切记 不能用NaOH液化痰标本。
实验室仪器设备
分册建立仪器档案
仪器卡、仪器运行状态标识
定期维护保养
定期校准/检定
相同检测项目在不同的仪器或系统上进行检测时,应做比对 (2次/年, 每次至少20份标本,计算回归方程,系统误差应<7、5%)
并记录相关分析、处理意见
检测、验证方法(适用于定量项目)
可校准的项目实施校准
质控品检测结果在允许范围内
与其他仪器的检测结果比较(5个样本,覆盖测量范围,至 少4个样本测量结果偏移<±7、5% )
使用留样再测结果进行判别(5个样本,覆盖测量范围,至 少4个样本测量结果偏移<±7、5% )
标本采集时间
1、血清(浆):无特别要求
2、如用泌尿生殖道分泌物做CT、NG项目:应在抗生素应用前或停 药两周后采集标本,如不能停用抗生素,应于下次抗生素应用前采 集。
3、如用痰做TB:应在抗结核药物应用前或停药两周后采集标本,如 不能停用抗结核药物,应于下次抗结核药物应用前采集。
因为PCR方法所检测的靶物质为核酸,不受标本生物活性的限制, 关于差不多死亡的病原体仍可检测出来,即感染后在药物治疗有 效的情况下,患处仍会有少量已死亡的病原体存在。
泌尿生殖道分泌物 一次性采样管(含保养液) 配套棉拭子(不含保养液)
痰液 结核分枝杆菌DNA检测标本:用4%NaOH摇匀,室温下放置30分钟左右液化, 转移至1、5ml灭菌离心管,离心,去上清,留沉淀用于核酸提取。需注意的是 液化时不能加热,液化时间不能过长。 非结核分枝杆菌DNA检测标本:痰标本在室温悬浮于灭菌生理盐水中,充分震 荡混匀,促使大块黏状物下沉,取上清离心,去上清,留沉淀用于核酸提取。切记 不能用NaOH液化痰标本。
实验室仪器设备
分册建立仪器档案
仪器卡、仪器运行状态标识
定期维护保养
定期校准/检定
相同检测项目在不同的仪器或系统上进行检测时,应做比对 (2次/年, 每次至少20份标本,计算回归方程,系统误差应<7、5%)
临床PCR检验的室内质控课件
44
标本间交叉污染的概率计算
• 如在一次检测100个标本的HBV DNA检测中，所有两个阳 性结果连续出现的概率为： P=(100-2+1)/[100!/2!(100-2)!]=99/4950=0.02 概率为2.0%。 因此，如在100个标本中，连续出现两个为阳性次数有3次， 即概率为3.0%，则为失控。
些物品比如放置扩增反应管的盘必须从污染区转回到清洁区时， 在转回之前，应将其置于2％~10％的次氯酸钠溶液中过夜，并充 分冲洗。 • 紫外照射：实验台面、仪器设备、实验室空间 • UNG
14
仪器设备及管理
• PCR仪、离心机、加样器、恒温设备等应建立技术档 案，并定期维护;PCR仪、加样器、恒温设备应定期进 行校准
• 1-[P(0)+P(1)+P(2)+P(3)+P(4)]=1-[(1-0.1)25+25(1-0.1)240.1+300(10.1)230.12+2300(1-0.1)220.13+12650(1-0.1)210.14+53130(10.1)200.15]=0.0334
• 则在这个实验室一次检测25个标本获得6个或6个以上阳性结果的概 率为3.34%，小于5%，属于小概率事件，即发生的可能性很小，可 能有污染所致假阳性结果的可能。
• 当一个小概率事件发生时，则可能有误差存在，有必要对其发生 的原因进行分析。
• 对每天的日常病人结果中阳性率出现的概率进行计算，如果这种 结果出现的概率小于5%时，则可判为失控。
39
根据二项式分布的概率计算
• 在一个实验室中某检测项目结果的阳性率为p,计算在n 个血液样本中有k个阳性结果的概率。根据二项式分布 的概率计算公式如下： P(X=k)=n!/[k!(n-k)!]pk(1-p)n-k (1) 其中n为当次实验检测标本数，k为阳性个数，p为阳性 率。
标本间交叉污染的概率计算
• 如在一次检测100个标本的HBV DNA检测中，所有两个阳 性结果连续出现的概率为： P=(100-2+1)/[100!/2!(100-2)!]=99/4950=0.02 概率为2.0%。 因此，如在100个标本中，连续出现两个为阳性次数有3次， 即概率为3.0%，则为失控。
些物品比如放置扩增反应管的盘必须从污染区转回到清洁区时， 在转回之前，应将其置于2％~10％的次氯酸钠溶液中过夜，并充 分冲洗。 • 紫外照射：实验台面、仪器设备、实验室空间 • UNG
14
仪器设备及管理
• PCR仪、离心机、加样器、恒温设备等应建立技术档 案，并定期维护;PCR仪、加样器、恒温设备应定期进 行校准
• 1-[P(0)+P(1)+P(2)+P(3)+P(4)]=1-[(1-0.1)25+25(1-0.1)240.1+300(10.1)230.12+2300(1-0.1)220.13+12650(1-0.1)210.14+53130(10.1)200.15]=0.0334
• 则在这个实验室一次检测25个标本获得6个或6个以上阳性结果的概 率为3.34%，小于5%，属于小概率事件，即发生的可能性很小，可 能有污染所致假阳性结果的可能。
• 当一个小概率事件发生时，则可能有误差存在，有必要对其发生 的原因进行分析。
• 对每天的日常病人结果中阳性率出现的概率进行计算，如果这种 结果出现的概率小于5%时，则可判为失控。
39
根据二项式分布的概率计算
• 在一个实验室中某检测项目结果的阳性率为p,计算在n 个血液样本中有k个阳性结果的概率。根据二项式分布 的概率计算公式如下： P(X=k)=n!/[k!(n-k)!]pk(1-p)n-k (1) 其中n为当次实验检测标本数，k为阳性个数，p为阳性 率。
实验室质量控制PPT课件
要对常规条件下的操作水平采取措施予以改进。
这20批次的测定值间的变异即称为批间变异！
23
基本概念
* 精密度是指在规定条件下相互独立的检测结果间的一致程度。它表示测量结
果中的随机误差大小。 它分三种：
（1）批内精密度（批内变异） 是指对同一标本用同一方法在相同条件
下多次重复测定所 得的各次结果之间或各次结果与均值之间的符合程度。在重复检测时它的变异性是最小的。
四、有效减少假阴性结果
SAT技术采用M-MLV逆转录酶和T7 RNA多聚酶进行核酸扩增，相对于其它核酸扩 增技术，反应抑制物更少，有效减少假阴性结果。
五、有效的解决了扩增产物的污染问题
扩增产物的污染是核酸检测的控制难点。SAT技术采用实时荧光闭管检测，使污 染得到有效控制；即使污染产生，由于扩增产物为RNA ，环境中极易降解，从而大幅度 提高检测结果的可靠性。 13
结合遗传科实验室 分析相关“质量管理”
1
* 临床实验室为了保证检验结果实事求是的反映客观存在而建立
的操作程序体系
*
2
*
我们往往过分紧盯检验人员“实验过程”（分析中）的质量
情况！
3
*
*采好血的管最好不要放置到最后统一离心处理。除非有要求，否
则不冷藏，更不可过夜！
*综上我想到的„
„
①用正确的容器；
⑴室温放置应在8小时以内。 ⑵冷藏放置应在48小时内。 ⑶而48小时以外需-20℃冷冻保存。 ⑷我们九联检的标本有的需要过夜保存的，应及时分离血清，冷藏保存！
5 而染色体冷藏时间越长肯定会越难培养。
*
硬件设备和技术对实验室未来关系重大（不进则退）
国内外类似技术
基于核算序列扩增检测技术
这20批次的测定值间的变异即称为批间变异！
23
基本概念
* 精密度是指在规定条件下相互独立的检测结果间的一致程度。它表示测量结
果中的随机误差大小。 它分三种：
（1）批内精密度（批内变异） 是指对同一标本用同一方法在相同条件
下多次重复测定所 得的各次结果之间或各次结果与均值之间的符合程度。在重复检测时它的变异性是最小的。
四、有效减少假阴性结果
SAT技术采用M-MLV逆转录酶和T7 RNA多聚酶进行核酸扩增，相对于其它核酸扩 增技术，反应抑制物更少，有效减少假阴性结果。
五、有效的解决了扩增产物的污染问题
扩增产物的污染是核酸检测的控制难点。SAT技术采用实时荧光闭管检测，使污 染得到有效控制；即使污染产生，由于扩增产物为RNA ，环境中极易降解，从而大幅度 提高检测结果的可靠性。 13
结合遗传科实验室 分析相关“质量管理”
1
* 临床实验室为了保证检验结果实事求是的反映客观存在而建立
的操作程序体系
*
2
*
我们往往过分紧盯检验人员“实验过程”（分析中）的质量
情况！
3
*
*采好血的管最好不要放置到最后统一离心处理。除非有要求，否
则不冷藏，更不可过夜！
*综上我想到的„
„
①用正确的容器；
⑴室温放置应在8小时以内。 ⑵冷藏放置应在48小时内。 ⑶而48小时以外需-20℃冷冻保存。 ⑷我们九联检的标本有的需要过夜保存的，应及时分离血清，冷藏保存！
5 而染色体冷藏时间越长肯定会越难培养。
*
硬件设备和技术对实验室未来关系重大（不进则退）
国内外类似技术
基于核算序列扩增检测技术
临床PCR实验室的设计及管理体系的建立PPT课件
谁来做(Who)： 责任人 做什么(What)：适用范围 何时（When）：适用范围 何地（Where）：适用范围 为什么做（Why）：目的 如何做（How）：操作步骤
实验室清洁SOP要点
目的:为了使实验室台面、地面和仪器设备
在使用后，处于洁净和无感染性状态，以防 止出现因仪器设备不洁影响检测或仪器使用 寿命；防止因实验室台面、地面和仪器设备 的生物传染危险性造成实验室人员感染，以 及防止实验室交叉污染而出现假阳性结果 等。 适用范围应包括实验室地面、台面和仪 器设备等的清洁。
结果正常
结果仍低
检测质控样本及3~5份已知 阳性样本
质控样本 测定正常 且阳性样 本有些值 增加
质控及已 知阳性样 本测定仍 异常
按系统误 差途径分 析
进行扩增 仪孔温度 校准后再 检测
阴性质控样本测定为阳性
同时检测的标本情况
临床标本亦全为阳性
临床标本中有阳性也有阴性
扩增产物 “污染”
试剂“污染”
投诉处理 SOP
明确投拆第一接触人对投拆的处理流程， 即如何记录、如何针对相关投诉的进一步 处理程序、是否需要报告和如何报告、以 及如何向投拆人返回处理意见等。可将投 拆分为不同类如对检验结果正确性、服务 态度、报告单填写错误等分别编写处理流 程
投拆有效时的如何改进和采取何种措施的 具体流程。应非常具体并具有可操作性
核酸提取用离心管质检的基本方面
带滤心吸头的质检主要是滤芯的密封性
项目检测、结果判断、解释和报告 SOP
标本进入实验程序后的操作编号方式 根据所用试剂盒确定的详细操作流程 仪器编程及文件名的编写规则 结果判读的流程和规则 结果分析解释的流程 结果报告流程
实验室清洁SOP要点
目的:为了使实验室台面、地面和仪器设备
在使用后，处于洁净和无感染性状态，以防 止出现因仪器设备不洁影响检测或仪器使用 寿命；防止因实验室台面、地面和仪器设备 的生物传染危险性造成实验室人员感染，以 及防止实验室交叉污染而出现假阳性结果 等。 适用范围应包括实验室地面、台面和仪 器设备等的清洁。
结果正常
结果仍低
检测质控样本及3~5份已知 阳性样本
质控样本 测定正常 且阳性样 本有些值 增加
质控及已 知阳性样 本测定仍 异常
按系统误 差途径分 析
进行扩增 仪孔温度 校准后再 检测
阴性质控样本测定为阳性
同时检测的标本情况
临床标本亦全为阳性
临床标本中有阳性也有阴性
扩增产物 “污染”
试剂“污染”
投诉处理 SOP
明确投拆第一接触人对投拆的处理流程， 即如何记录、如何针对相关投诉的进一步 处理程序、是否需要报告和如何报告、以 及如何向投拆人返回处理意见等。可将投 拆分为不同类如对检验结果正确性、服务 态度、报告单填写错误等分别编写处理流 程
投拆有效时的如何改进和采取何种措施的 具体流程。应非常具体并具有可操作性
核酸提取用离心管质检的基本方面
带滤心吸头的质检主要是滤芯的密封性
项目检测、结果判断、解释和报告 SOP
标本进入实验程序后的操作编号方式 根据所用试剂盒确定的详细操作流程 仪器编程及文件名的编写规则 结果判读的流程和规则 结果分析解释的流程 结果报告流程
PCR质量控制演示文稿
第31页，共63页。
Westgard多规则控制方法
由12S ，13S ，22S ，R4S ，41S ，10X 等规x则组成，其中既有对 随机误差检出敏感的，也有对系统误差敏感的。结合在一起 ，假失控和假告警概率低，误差检出能力增强，大大提高了 失控的检出率。
能再次投入使用
3)实验室应检查由于上述缺陷对以前所进行的检测工作的影响， 并记录相关分析、处理意见
第14页，共63页。
检测、验证方法（适用于定量项目）
• 可校准的项目实施校准 • 质控品检测结果在允许范围内
• 与其他仪器的检测结果比较（5个样本，覆盖测量范围， 至少4个样本测量结果偏移<±7.5% ）
校准参数：光路部分、背景荧光、温控部分（温度准确 度、均一性、温度升降速率）
第17页，共63页。
恒温金属浴
• 维护：75%乙醇擦拭加热孔 • 校准：
校准单位：厂家、计量院、内部校准
温度准确度（±1℃ ）（应涵盖试验过程中所涉及的温度） 孔间温度的均一性（±1℃ ）（内部校准应规定测定孔的选择、测
量时间、各孔温度偏差允许范围）
第9页，共63页。
标本运送
• 实验室应根据待测靶核酸的特性，对各种临床标本的运送条件（温度、 时间）作出相应规定。
• 靶核酸为DNA的标本，如在无菌条件下，则可以在室温下运送，建议采集
后8h之内送至实验室；
• 靶核酸为RNA的标本，如在无菌条件下，可在室温下运送，如为较 长时间，则应在加冰条件下运送，建议采集后4h之内送至实验室；
第19页，共63页。
生物安全柜
• 清洁: 75%乙醇擦拭,不宜用次氯酸钠溶液清洁
• 检定：有资质的第三方检测机构
• 检定参数：高效过滤器完整性、流入气流流速、下降气流 流速、气流模式
Westgard多规则控制方法
由12S ，13S ，22S ，R4S ，41S ，10X 等规x则组成，其中既有对 随机误差检出敏感的，也有对系统误差敏感的。结合在一起 ，假失控和假告警概率低，误差检出能力增强，大大提高了 失控的检出率。
能再次投入使用
3)实验室应检查由于上述缺陷对以前所进行的检测工作的影响， 并记录相关分析、处理意见
第14页，共63页。
检测、验证方法（适用于定量项目）
• 可校准的项目实施校准 • 质控品检测结果在允许范围内
• 与其他仪器的检测结果比较（5个样本，覆盖测量范围， 至少4个样本测量结果偏移<±7.5% ）
校准参数：光路部分、背景荧光、温控部分（温度准确 度、均一性、温度升降速率）
第17页，共63页。
恒温金属浴
• 维护：75%乙醇擦拭加热孔 • 校准：
校准单位：厂家、计量院、内部校准
温度准确度（±1℃ ）（应涵盖试验过程中所涉及的温度） 孔间温度的均一性（±1℃ ）（内部校准应规定测定孔的选择、测
量时间、各孔温度偏差允许范围）
第9页，共63页。
标本运送
• 实验室应根据待测靶核酸的特性，对各种临床标本的运送条件（温度、 时间）作出相应规定。
• 靶核酸为DNA的标本，如在无菌条件下，则可以在室温下运送，建议采集
后8h之内送至实验室；
• 靶核酸为RNA的标本，如在无菌条件下，可在室温下运送，如为较 长时间，则应在加冰条件下运送，建议采集后4h之内送至实验室；
第19页，共63页。
生物安全柜
• 清洁: 75%乙醇擦拭,不宜用次氯酸钠溶液清洁
• 检定：有资质的第三方检测机构
• 检定参数：高效过滤器完整性、流入气流流速、下降气流 流速、气流模式
实验室质量控制与管理ppt课件
临床医师合理选择实验项目是使检验结果发挥临
床价值的前提。不同的ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ病有其不同的病因,同一 种疾病的不同阶段亦有不同的病理生理表现。 与临床医师沟通的第二个问题是提供每项检验结 果的参考值、临界值和危及生命值,及如何准确判 断分析化验结果。 临床医师沟通的第三个问题是需要医师认真、完 整地填写检验申请单,特别是患者存在有可能干扰 检查结果的服药史、特殊的病理变化、与检验有 关的既往史,以及留取标本和送检标本的时间等
实验室管理
实验室必须建立检验报告发放制度，保证检验报告的
准确、及时，注意保护患者隐私。检验报告是实验室 生产的最终产品，所有的质量控制和质量保证过程都 是为了出具准确、可靠、有效的检验报告，检验报告 是进行预防、诊断、治疗或健康检查的重要依据，也 可能成为实验室引起医疗纠纷的源头，其重要性是不 言而喻的。检验报告必须及时送达申请人或申请单位， 实验室应对每一检验项目自标本接受时间至报告发出 时间做出明确规定；实验室应有保密措施保证检验报 告只给申请检验或者负责使用检验结果的人员，不向 无关人员泄漏；实验室必须建立危及生命检测结果的 报告程序，当检验结果提示存在紧急危及生命情况时， 实验室必须立即报告申请检验的或者负责使用检验结 果的人员或单位；实验室还须妥善保存检验原始报告 或者复印件，以便查阅和确认。
实验室管理
实验室应当参加开展的临床检验项目的室
间质量评价活动。室间质量评价是利用实 验室间的比对来确定实验室能力的活动， 它是为确保实验室维持较高的检验水平而 对其能力进行考核、监督和确认的一种验 证活动。所有实验室必须确保其已开展的 检测项目均已参加了由临床检验中心组织 的室间质量评价活动，实验室须对室间质 量评价结果、特别是不满意的室间质量评 价结果进行分析并采取相应措施予以改进。
床价值的前提。不同的ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ病有其不同的病因,同一 种疾病的不同阶段亦有不同的病理生理表现。 与临床医师沟通的第二个问题是提供每项检验结 果的参考值、临界值和危及生命值,及如何准确判 断分析化验结果。 临床医师沟通的第三个问题是需要医师认真、完 整地填写检验申请单,特别是患者存在有可能干扰 检查结果的服药史、特殊的病理变化、与检验有 关的既往史,以及留取标本和送检标本的时间等
实验室管理
实验室必须建立检验报告发放制度，保证检验报告的
准确、及时，注意保护患者隐私。检验报告是实验室 生产的最终产品，所有的质量控制和质量保证过程都 是为了出具准确、可靠、有效的检验报告，检验报告 是进行预防、诊断、治疗或健康检查的重要依据，也 可能成为实验室引起医疗纠纷的源头，其重要性是不 言而喻的。检验报告必须及时送达申请人或申请单位， 实验室应对每一检验项目自标本接受时间至报告发出 时间做出明确规定；实验室应有保密措施保证检验报 告只给申请检验或者负责使用检验结果的人员，不向 无关人员泄漏；实验室必须建立危及生命检测结果的 报告程序，当检验结果提示存在紧急危及生命情况时， 实验室必须立即报告申请检验的或者负责使用检验结 果的人员或单位；实验室还须妥善保存检验原始报告 或者复印件，以便查阅和确认。
实验室管理
实验室应当参加开展的临床检验项目的室
间质量评价活动。室间质量评价是利用实 验室间的比对来确定实验室能力的活动， 它是为确保实验室维持较高的检验水平而 对其能力进行考核、监督和确认的一种验 证活动。所有实验室必须确保其已开展的 检测项目均已参加了由临床检验中心组织 的室间质量评价活动，实验室须对室间质 量评价结果、特别是不满意的室间质量评 价结果进行分析并采取相应措施予以改进。
PCR实验室规范化管理与质量控制 ppt课件
PPT课件 15
c. 保存的文件夹及文件标识号：
d. 电子保存的软件备份要求：
每一个月进行一次电子报告的软件备份；
安排在每月的最后一个工作日完成。
PPT课件
16
(2) 记录保存 a.电子数据的保存: 将病例资料、样品资料、检测结果录入 报告系统，产生报告，同时保存记录，记 录人签名 b.书面记录的保存: 书面记录（病例资料和结果记录）装订 保存于报告系统旁的抽屉里，每月进行整 理，所有记录保存两年，两年后交科室统 一建档封存，封存记录的开启须经科主任 同意并委派档案管理人在场。
PCR或RT-PCR试剂盒的组成 PCR试剂盒的分类 影响PCR试剂盒质量的因素 PCR试剂盒质量指标 PCR试剂盒的选用原则
PPT课件
51
1、PCR或RT-PCR试剂盒的组成
核酸提取试剂
标准品与质控品 核酸扩增或逆转录-核酸扩增试剂
产物检测试剂（有些使用全自动分析仪的PCR方法
PPT课件
56
5、PCR试剂盒的选用原则
参考试剂生产厂家的信息广告 参考同行对有关试剂盒的使用效果 参考有关机构的综合评价 根据使用目的 根据所在实验室的技术特点 医院和患者的承受能力（收费）
PPT课件
48
优点
采用试剂盒标准曲线的斜率与截距以及荧光
背景的噪音和荧光曲线的陡度对其实施动态
质量监控，具有简捷、实用等优点
利用试剂盒标准曲线斜率与截距对定量PCR
进行室内质控，可有效控制因试剂分装质量
(反应液/酶加入量)及酶活性而引发的失控
PPT课件 49
PPT课件
50
四. 临床PCR试剂盒的选用
c. 保存的文件夹及文件标识号：
d. 电子保存的软件备份要求：
每一个月进行一次电子报告的软件备份；
安排在每月的最后一个工作日完成。
PPT课件
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(2) 记录保存 a.电子数据的保存: 将病例资料、样品资料、检测结果录入 报告系统，产生报告，同时保存记录，记 录人签名 b.书面记录的保存: 书面记录（病例资料和结果记录）装订 保存于报告系统旁的抽屉里，每月进行整 理，所有记录保存两年，两年后交科室统 一建档封存，封存记录的开启须经科主任 同意并委派档案管理人在场。
PCR或RT-PCR试剂盒的组成 PCR试剂盒的分类 影响PCR试剂盒质量的因素 PCR试剂盒质量指标 PCR试剂盒的选用原则
PPT课件
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1、PCR或RT-PCR试剂盒的组成
核酸提取试剂
标准品与质控品 核酸扩增或逆转录-核酸扩增试剂
产物检测试剂（有些使用全自动分析仪的PCR方法
PPT课件
56
5、PCR试剂盒的选用原则
参考试剂生产厂家的信息广告 参考同行对有关试剂盒的使用效果 参考有关机构的综合评价 根据使用目的 根据所在实验室的技术特点 医院和患者的承受能力（收费）
PPT课件
48
优点
采用试剂盒标准曲线的斜率与截距以及荧光
背景的噪音和荧光曲线的陡度对其实施动态
质量监控，具有简捷、实用等优点
利用试剂盒标准曲线斜率与截距对定量PCR
进行室内质控，可有效控制因试剂分装质量
(反应液/酶加入量)及酶活性而引发的失控
PPT课件 49
PPT课件
50
四. 临床PCR试剂盒的选用
实验室规范化管理 PPT课件
2
评审准则与质量体系文件
典型的管理体系文件层次
按评审准则和规定的质量 方针，目标描述管理体系 要素与职责及途径。
描述质量管理体系所涉及 到的各个部门的职能活动。
是某个具体作业指导工作 文件回答如何做的问题， 有具体操作执行人员使用。
记录，质量记录或技术记 录，包括表格、签名、原 始记录表格等。
3
《实验室资质认定评审准则》
2）根据本实验室所能投入的资金的多少；
3）根据实验室自身所能使用的人员技术能力；
农业环境（水、土、气）质量标准，重点为铜、锌、 铅、镉、铬、汞、砷等。
农产品质量安全标准。当前的蔬菜中农药残留（有
机磷、有机氯、拟除虫菊酯、氨基甲酸酯类杀虫、
实验室的5M1E质量管理工作
检测要素之五——环 Environment 第五，要求到区域隔离和进出关键区域授
权，主要是为了防止交叉污染。 第六，内务与安全，化学实验室是一个危
险性较高的地方，实验室管理层及所有员 工都要时刻注意，质量是关键，安全是前 提； 第七，实验室需要营造一种良好的工作氛 围，这可以激发员工的积极性和主观能动 性，有利于检测活动的开展。
17
实验室的5M1E质量管理工作
检测要素之六——测 Measure 这里的“测”，是指各检测过程和质量管 理体系运行过程中的监视和测量（为了提 高检测结果准确性和可靠性以及质量管理 体系运行有效性所采取的有关措施与活 动）。
常见的监视和测量方式有：内部审核、管 理评审、外部审核、投诉处理、客户满意 度调查、实验室比对与能力验证、纠正措 施验证、数据分析、方法比对、重复检测 及留样再测、定期使用标准物质进行监控 和使用次级标准物质进行内部质量控制等。
24
实验室资质认定准备－管理要求
评审准则与质量体系文件
典型的管理体系文件层次
按评审准则和规定的质量 方针，目标描述管理体系 要素与职责及途径。
描述质量管理体系所涉及 到的各个部门的职能活动。
是某个具体作业指导工作 文件回答如何做的问题， 有具体操作执行人员使用。
记录，质量记录或技术记 录，包括表格、签名、原 始记录表格等。
3
《实验室资质认定评审准则》
2）根据本实验室所能投入的资金的多少；
3）根据实验室自身所能使用的人员技术能力；
农业环境（水、土、气）质量标准，重点为铜、锌、 铅、镉、铬、汞、砷等。
农产品质量安全标准。当前的蔬菜中农药残留（有
机磷、有机氯、拟除虫菊酯、氨基甲酸酯类杀虫、
实验室的5M1E质量管理工作
检测要素之五——环 Environment 第五，要求到区域隔离和进出关键区域授
权，主要是为了防止交叉污染。 第六，内务与安全，化学实验室是一个危
险性较高的地方，实验室管理层及所有员 工都要时刻注意，质量是关键，安全是前 提； 第七，实验室需要营造一种良好的工作氛 围，这可以激发员工的积极性和主观能动 性，有利于检测活动的开展。
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实验室的5M1E质量管理工作
检测要素之六——测 Measure 这里的“测”，是指各检测过程和质量管 理体系运行过程中的监视和测量（为了提 高检测结果准确性和可靠性以及质量管理 体系运行有效性所采取的有关措施与活 动）。
常见的监视和测量方式有：内部审核、管 理评审、外部审核、投诉处理、客户满意 度调查、实验室比对与能力验证、纠正措 施验证、数据分析、方法比对、重复检测 及留样再测、定期使用标准物质进行监控 和使用次级标准物质进行内部质量控制等。
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实验室资质认定准备－管理要求
临床PCR检验的室内质控ppt课件
IQC是一个集体活动，不光是对实验室一次测 定的有效性的判断，也反应了实验室测定趋势 的变化。
IQC的失控不能做为处罚的依据，应建设性的 找出失控的原因，针对其采取措施加以改进。
对IQC应定期进行评价。
核酸提取中的随机误差。如核酸提取中的丢失、 有机溶剂的去除不彻底、标本中扩增抑制物的 残留、所用耗材如离心管有PCR抑制物等。
空气流向 缓冲间
空气流向 缓冲间
专用走廊
工作流向
各区独立 注意风向 因地制宜 方便工作
“十六字口诀”
产物分析区
扩增区
标本制备区 试剂准备区
传递窗
传递窗
传递窗
空气流向
空气流向
空气流向
空气流向
缓冲间
缓冲间
缓冲间
专用走廊
工作流向
“无基因”概念 实验室要有严格的人员 进入限制和程序
使用合格的试剂和消耗 品
曲线向上漂移：提示出现污染，污染 可能是由于某一天操作上的失误导致 实验室被污染如标本泄漏，产物泄漏， 试剂被污染等
向上的趋势性变化：可能存在累积性 的产物污染，实验室扩增产物逐渐累 积，从而使病人结果的阳性率逐渐增 高。此时实验室需要进行彻底清洁。
按统计学规律，一个事件发生的概率小于5%被 称为小概率事件，即发生的可能性很小。
如何培训：讲座、讨论、自学和参加培训班等。
培训的评估：书面考试、实验考核、讨论心得、论文、 综述等。
质控物浓度的选择
每次（批）测定质控物的数量及放 置
质控规则 Levey-Jennings质控图方法 “即刻法”质控方法 “假阳性”的统计质控方法
定量测定：测定线性范围内的高、 中、低三种浓度
定性测定：接近方法测定下限的 浓度
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