DEAE琼脂糖凝胶FF的详细资料
GST琼脂糖凝胶FF
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北京卓冠科技有限公司 北京市西城区德外大街 2 号 512 室
邮政编码:100011
TEL:62364123
FAX:62360884
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产品名称
CS-A03-00 GST 琼脂糖凝胶 FF
CS-A03-01 CS-A03-02 CS-A03-03 CS-A03-04
GST 琼脂糖凝胶 FF GST 琼脂糖凝胶 FF GST 琼脂糖凝胶 FF GST 琼脂糖凝胶 FF
联系人:韦新桂
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1、除去因离子交换作用吸附的蛋白,用 2-3 倍柱床体积 2M 的 NaCl 溶液淋洗柱子, 再反向淋洗。 2、除去蛋白沉淀、疏水性蛋白,用 1M 的 NaOH 以 100cm/h 的速度淋洗柱子 1-2h, 再 反向淋洗。 3、所有操作中,都要用至少 3 倍柱床体积的初始缓冲液洗柱子。 4、除去强的疏水性蛋白和脂质等,用 4 倍柱床体积的 70%的乙醇或者 30%的异丙醇洗 柱子,再反向淋洗。 八、保存 在 20%乙醇,4℃下长期保存。
包装 1ml (预装 柱) 25ml
100ml
500ml
大包装
载量 mg/ml
≤10mg/ml
≤10mg/ml ≤10mg/ml ≤10mg/ml ≤10mg/ml
特性 及应用
平均粒 径(μm)
GST 及 GST 融 合蛋白
90
GST 及 GST 融 合蛋白
90
GST 及 GST 融 合蛋白
90
琼脂糖凝胶法
琼脂糖凝胶法琼脂糖凝胶法是一种常见的生物学分离和纯化技术,通常用于分离蛋白质、核酸等生物大分子。
本文将详细介绍琼脂糖凝胶法的原理、步骤、优缺点及应用。
一、琼脂糖凝胶法的原理琼脂糖凝胶法利用琼脂糖为基质制成凝胶,生物大分子在凝胶中按照大小形状等物理化学特性进行分离。
具体来说,琼脂糖凝胶法通过静电吸附和筛分作用,将生物大分子分离出来。
其中,静电吸附指分子与凝胶间的两种相互作用,即极性作用和疏水作用,从而形成复杂的蛋白质凝胶;筛分作用指由于凝胶的孔径大小不同,使分子以不同的速率通过凝胶,从而分离出不同大小的分子。
二、琼脂糖凝胶法的步骤1. 准备琼脂糖凝胶:将琼脂糖与缓冲液混合,加热至琼脂糖完全溶解,然后冷却凝固成凝胶。
2. 加载样品:将待分离的样品溶解在缓冲液中,加在凝胶上。
3. 电泳:将凝胶放在膜上,样品与电极相连接,通电使蛋白质、核酸等生物大分子向电极移动。
4. 取样:电泳结束后,将凝胶切割出感兴趣的区域,取出样品作进一步分析。
三、琼脂糖凝胶法的优缺点1. 优点:琼脂糖凝胶法分离速度快,分离效果明显,平稳可靠,适用于分离不同大小的生物大分子,具有较好的灵敏度和特异性。
2. 缺点:琼脂糖凝胶法分离准确性较低,受制于分子量、电荷等因素的复杂性,分离时易产生假阳性或假阴性等问题;此外,琼脂糖本身易受菌污染或批号不一致等因素的影响,从而影响凝胶质量等问题。
四、琼脂糖凝胶法的应用琼脂糖凝胶法广泛用于蛋白质、核酸、多糖等生物大分子的分离和纯化,特别适用于分离蛋白质,如分离血清蛋白、抗体、酶、激素等。
此外,琼脂糖凝胶法还可以用于生物分子的筛选、活性和空间结构的研究、药物筛选等领域。
总之,琼脂糖凝胶法是一种优秀的生物学分离和纯化技术,具有广泛的应用前景和研究价值。
硼酸琼脂糖凝胶 FF使用说明
硼酸琼脂糖凝胶FF使用说明货号:CS-A08-01简介硼酸琼脂糖凝胶FF将硼酸类化合物偶联到交联及活化的琼脂糖凝胶上,该填料具有很高的化学稳定性。
硼酸能和1,2顺式二醇结合,所以硼酸琼脂糖凝胶可以用于糖类、核苷、核苷酸、核酸、肽及酶类的分离纯化,特别适合糖蛋白的分离纯化。
硼酸琼脂糖凝胶FF稳定性好,基团脱落少,使用寿命长,使用方便,应用广泛。
亲和填料特性:特点基团脱落少,结合特异性强基质4%的交联琼脂糖凝胶配基硼酸盐配基密度20μmol/ml吸附载量10mg亲和填料的颗粒大小45-165μm最大流速300cm/hpH范围3-10,在位清洗时pH范围可到2-13使用温度4℃~常温保存温度+4~8℃保存液体20%乙醇适用范围硼酸琼脂糖凝胶用于各种糖类、核苷、核苷酸、核酸、肽及酶类的分离纯化,特别适合糖蛋白的分离纯化。
亲和填料应用的注意事项:1、该凝胶从冷室或冰箱中取出后最好在室温下缓慢振摇恢复到室温,然后再装柱,以免产生气泡影响柱效。
2、吸附:pH8.5-10为避免离子交换的干扰,盐浓度10mM-500mM,缓冲液或者样品中不能有Tris及三乙醇胺类的物质,一些二价阳离子可以增加目标物质的吸附力。
一些非离子表面活性剂也可以加目标物质和填料的作用力。
3、洗脱:可以用pH4-6的缓冲液洗脱,也可以用1-100mM糖类竞争线性或阶段洗脱,例如用山梨醇、甘露醇等,其中Tris最有效4、上样样品必须与平衡柱子的缓冲液的pH、电导相同。
5、硼酸琼脂糖凝胶FF亲和填料的再生处理方法:先用0.1M Tris-HClpH5.0缓冲液洗3个柱床体积,然后用0.5M NaOH含2M NaCl流洗3个床体积,最后用20%乙醇洗3个床体积即可。
6、该亲和填料保存条件为20%乙醇,+4~8℃。
deae琼脂糖凝胶 电泳
deae琼脂糖凝胶电泳
DEAE琼脂糖凝胶电泳是一种常用的离子交换层析技术,用于分离和纯化带有不同电荷的生物大分子(如蛋白质和核酸)。
下面是该技术的基本原理和步骤:
1. DEAE琼脂糖:DEAE(二乙氨乙基)琼脂糖是一种具有阳离子交换性质的树脂。
它可以与带有负电荷的生物大分子发生静电相互作用。
2. 样品加载:首先将待分离的样品加载到经过预处理的DEAE琼脂糖凝胶柱中。
样品中带有负电荷的生物大分子会被DEAE树脂吸附。
3. 洗脱:通过以逐渐增加浓度或pH值的缓冲溶液,洗脱在DEAE琼脂糖上吸附的目标生物大分子。
这样,不同带电性质的生物大分子就可以被分离开来。
4. 收集分馏:根据样品中目标生物大分子的特点和需求,收集分离出的纯化目标物。
DEAE琼脂糖凝胶电泳是一种常见且有效的离子交换技术,广泛应用于生物化学、分子生物学和生物医学研究中。
它可以实
现对生物大分子的分离和纯化,有助于深入了解生物分子的结构和功能。
DEAE-琼脂糖凝胶FF
DEAE-琼脂糖凝胶FF货号:S8801规格:100mL 产品简介:DEAE-琼脂糖凝胶FF 是将二乙胺基乙基键合在快流速琼脂糖凝胶上形成的一种弱阴离子交换介质,具有优异的流动性能,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的离子交换制备。
1理化指标项目指标离子交换基团-O-CH 2CH 2-N +(C 2H 5)2H离子交换类型弱阴离子,可交换离子Cl -基质6%交联琼脂糖蛋白质吸附容量95mgHSA/ml 介质总离子交换容量0.09~0.13mmol/ml 介质粒径45~165μm 最大流速*300cm/h 工作温度4~40℃耐压0.3MPapH 稳定性1~14(短时间);3~12(长时间)pH 工作范围2~9化学稳定性所有常用的水相缓冲液;0.1mol/L 氢氧化钠;*检测条件:层析柱16mm×100mm *柱床高5cm,25℃,流动相为0.1mol/LNaCl。
2贮存产品应密封贮存在4℃~25℃(保存溶液为20%乙醇),通风、干燥、清洁的地方。
不能冷冻。
用过的柱子贮存在4℃(20%乙醇)。
3应用本产品具有高化学稳定性、高流速、高载量、好的机械性能、可在位清洗、多次重复使用等特点,非特异性吸附低,回收率高,适用于工业规模生产,适用于在pH工作范围内可形成负离子的生物大分子的分离纯化,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的离子交换制备。
4使用方法4.1装柱1)将所有实验材料均需平衡至进行色谱层析操作的温度;2)实验所需要用到的缓冲液以及洗脱液进行脱气处理;3)DEAE-琼脂糖凝胶FF的储存液为20%乙醇,需要用去离子水彻底清洗掉保存液。
4)在柱子下端加入纯水装柱子,以排除气泡,将填料连续倒入柱子时,要用玻璃棒紧靠柱子内壁引流,以减少气泡的产生,让填料先自然沉降到填料体积不再变化,用上样的平衡液平衡柱后即可上样。
4.2平衡让平衡缓冲液以一定流速流过柱子,到流出液电导和pH不变。
蓝色琼脂糖凝胶6FF使用说明
蓝色琼脂糖凝胶6FF使用说明1.简介:蓝色琼脂糖凝胶6FF是一种高亲和力树脂,可用于从复杂混合物中富集蓝色亲和结合的蛋白质。
它基于琼脂糖凝胶的基础上改性而来,通过染色剂与蛋白质之间的非共价相互作用实现蛋白质的富集。
蓝色琼脂糖凝胶6FF的独特之处在于其特定的电荷和碱基结构,可以与蛋白质中的亚甲蓝酸、负荷硫酸氨基糖苷酸或负荷正聚乳酸等带负电的结构相结合。
2.成分和特性:-孔隙率:低孔隙率(通道直径为30到40纳米)-细胞尺寸:45微米至165微米(平均值为90微米)- 动态吸附容量:2-5mg蛋白质/mL凝胶-pH稳定范围:从2至14(长时间操作适宜pH范围为3至13)-化学稳定性:抗生素、有机溶剂和洗涤剂不会影响其性能3.使用前的处理:-悬浮剂混匀:使用前需充分摇匀瓶中的蓝色琼脂糖凝胶6FF悬浮剂,确保悬浮剂均匀分布。
-预处理:将凝胶悬浮剂转移到离心管中,离心5分钟以除去胶粒。
然后将上清转移到新离心管中,以准备使用。
-储存条件:凝胶悬浮剂应存放在4°C下,并避免光照。
4.工作条件:-缓冲液:通常使用PBS(磷酸盐缓冲液)或TRIS缓冲液。
缓冲液pH应调整到蓝色琼脂糖凝胶6FF最佳工作范围内。
-调节离心速度:在操作过程中,应根据蓝色琼脂糖凝胶6FF的体积来调整离心机的转速。
通常,在使用小尺寸离心管时以1000×g离心,使用大尺寸离心管时以500×g离心。
-使用管柱:建议使用适量的硅胶管柱来提高分离纯度和减少非特异性结合。
5.操作步骤:-第一步:根据需要的操作规模,将合适的量的蓝色琼脂糖凝胶6FF悬浮剂移入离心管中。
-第二步:离心,以去除胶粒。
将上清转移到新离心管中。
-第三步:将上清与样品混合,允许接触20至30分钟。
在混匀期间,染色剂和蛋白质发生非共价相互作用。
-第四步:离心混合物并收集上清液。
收集到的上清液中富集有蓝色亲和力的蛋白质。
-第五步:如需要,再次重复步骤三和步骤四,以提高纯度。
DEAE
DEAE-琼脂糖凝胶FF产品说明书DEAE-琼脂糖凝胶FF是将二乙胺基乙基键合在快流速琼脂糖凝胶上形成的一种弱阴离子交换介质。
广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的离子交换制备。
1. 外观本品呈白色,球状、无嗅、无味、无肉眼可见杂质。
2. 理化指标项目指标离子交换基团-O-CH2CH2-N+(C2H5)2H离子交换类型弱阴离子,可交换离子Cl-基质6%交联琼脂糖蛋白质吸附容量110mgHSA/ml介质总离子交换容量0.11~0.16 mmol/ml 介质形状球形粒径45~165μm流速*300~600 cm/h;最大流速750 cm/h工作温度4~40℃耐热pH7水中120℃30min耐压0.3 MPapH稳定性1~14 (短时间 ,在位清洗);2~12 (长时间)pH工作范围2~9化学稳定性在以下液体中稳定:所有常用的水相缓冲液;1mol/L 氢氧化钠;8mol/L 尿素;6mol/L 盐酸胍;70% 乙醇*检测条件:层析柱10mm×300mm *柱床高15cm,25℃, 流动相为0.1mol/LNaCl3.包装产品以聚胺酯瓶密封包装,外贴标签,注明“品名、体积、颗粒大小”等内容。
4.运输运输中应避免日晒、雨淋、重压,严禁与有毒、有害物品混运。
5.贮存产品应密封贮存在4℃~25℃(保存溶液为20% 乙醇),通风、干燥、清洁的地方。
不能冷冻。
用过的柱子贮存在4℃(20% 乙醇)。
6.注意事项本产品避免与氧化剂接触;避免在pH值< 4时长时间暴露(一周,20℃)。
7.保质期:5年。
8.应用本产品具有高化学稳定性、高流速、高载量、好的机械性能、可在位清洗、多次重复使用等特点,非特异性吸附低,回收率高,适用于工业规模生产,适用于在pH工作范围内可形成负离子的生物大分子的分离纯化,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的离子交换制备。
下面简要介绍介质的使用过程。
8.1 装柱⑴让所有的材料和试剂达到室温。
琼脂糖凝胶的主要性能指标
注意事项:
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制胶和加样过程中要防治气泡的产生。 紫外光对人眼有害,观察时加盖玻璃罩,观察时间不宜太长。 EB具有强诱变性,可致癌。必须戴手套操作,严格注意防护。 加样时,Tip头不宜插入样品孔太深,也不要穿破胶孔壁,否则样品渗漏或DNA 带型不整齐。 配胶和灌电泳槽需使用同一批缓冲液。因为pH 或离子强度很小的差别也会在凝 胶前部造成紊乱,影响DNA 片段的泳动。 梳板的选用 一般每个制胶模具均配有多个齿型不同的梳板,梳齿宽厚,形成的点 样容积较大,用于DNA 片段回收实验等;相反,梳齿窄而薄,形成的点样容积就 较小,用于PCR产物、酶切产物鉴定等。一般来说,上样量小时尽量选择薄的梳 板制胶,此时电泳条带致密清晰,便于结果分析。 凝胶一定要加热熔解完全,均匀,可以对着光亮的地方看看清澈不清澈 ; 一般情况下,梳子越薄而长,条带越好看 ; 上样量不宜过多,会造成条带的相互挤压; 如果点样孔多余,将样点到中间,尽量避免边缘效应 ,中间电场比较均匀 ; 做胶的缓冲液和跑胶的缓冲液浓度应该一致; 加样时不要太快,让其自然沉底,均匀分布在电泳孔内 ; 电泳开始时可以采用低电压使其跑出孔后,再调高电压。
电泳缓冲液
电泳缓冲液是指在进行电泳时所使用的缓冲溶液,用以稳定体系 酸碱度。常见的核酸电泳缓冲液有:TAE、TBE、TPE和MOPS等。
作用 :
①缓冲液在电泳过程中的一个作用是维持合适的pH。电泳时正极与负 极都会发生电解反应,正极发生的是氧化反应,负极发生的是还原反 应,长时间的电泳将使正极变酸,负极变碱。一个好的缓冲系统应有 较强的缓冲能力,使溶液两极的pH保持基本不变。 ②电泳缓冲液的另一个作用是使溶液具有一定的导电性,以利于DNA分 子的迁移,例如,一般电泳缓冲液中应含有0.01-0.04mol/L的钠离子 ,钠离子的浓度太低时电泳速度变慢;太高时就会造成过大的电流使 胶发热甚至熔化。 ③电泳缓冲液还有一个组分是EDTA,加入浓度为1-2mmol/L,目的是螯 合Mg2+ 等离子,防止电泳时激活DNA酶,此外还可防止镁离子与核酸 生成沉淀。
苯甲脒琼脂糖凝胶4FF使用说明
苯甲脒琼脂糖凝胶4FF使用说明货号:S9400规格:25mL产品简介:苯甲脒类物质是丝氨酸蛋白酶的广谱抑制剂,所以将这类物质偶联到琼脂糖凝胶上,可以从各种来源的样品中一步纯化胰蛋白酶、凝血酶、尿激酶、激肽释放酶、前激肽释放酶等丝氨酸蛋白酶。
苯甲脒琼脂糖凝胶由于应用新的活化方法所以流速高,非特异吸附少,而且填料粒度均匀,所以分离效果好,是纯化丝氨酸蛋白酶类最适合的填料。
亲和填料特征:特点载量大,分辨率好,流速高,使用方便。
基质4%的交联琼脂糖凝胶配基苯甲脒配基密度7µmol/ml吸附载量13mg胰蛋白酶/ml填料的颗粒大小45-165µm最大流速300cm/hpH范围3-10,在位清洗时pH范围可到2-11保存温度+4~8℃保存液体20%乙醇适用范围:一步从各种样品中纯化丝氨酸蛋白酶类物质。
应用实例:实验名称:苯甲脒琼脂糖凝胶FF分离尿激酶。
实验步骤:(1)苯甲脒琼脂糖凝胶FF装柱,1.6×20m,柱床体积为10ml(2)用缓冲液1平衡2-5个床体积,流速为2ml/min(3)取尿激酶粗品200mg溶解在20ml的缓冲液1中,用0.45µm的滤膜过滤,上样,流速为1ml/min(4)用缓冲液1再洗2-5个床体积,流速为2ml/min(5)最后缓冲液2进行洗脱,流速为2ml/min,收集洗脱峰,用SDS-PAGE纯化后的效果。
(6)用纯水洗5个柱床体积,然后分别用100mM,pH8.0Tris-HCl缓冲液含1M NaCl 和100mM,pH4.0的醋酸缓冲液含1M NaCl交替洗涤3次,再用纯水洗3个柱床体积,然后再用20%的乙醇流洗3个柱床体积,流速为2ml/min,柱子置于+4~8℃环境中保存。
(7)色谱图见图1,SDS-PAGE结果见图2。
缓冲液组成:缓冲液1:100mM pH7.4的PBS缓冲液;缓冲液2:100mM醋酸缓冲液,pH4.0。
也可以用这个填料特异去除各种融合蛋白酶切后的丝氨酸蛋白酶,例如凝血酶以及胰蛋白酶类蛋白酶。
DEAE-产品说明
Bestarose DEAE-琼脂糖凝胶FF产品说明书DEAE-琼脂糖凝胶FF是将二乙胺基乙基键合在快流速琼脂糖凝胶上形成的一种弱阴离子交换介质。
广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的离子交换制备。
1. 外观本品呈白色,球状、无嗅、无味、无肉眼可见杂质。
2. 理化指标*3.包装产品以聚胺酯瓶密封包装,外贴标签,注明“品名、体积、颗粒大小”等内容。
4.运输运输中应避免日晒、雨淋、重压,严禁与有毒、有害物品混运。
5.贮存产品应密封贮存在4℃~25℃(保存溶液为20% 乙醇),通风、干燥、清洁的地方。
不能冷冻。
用过的柱子贮存在4℃(20% 乙醇)。
6.注意事项本产品避免与氧化剂接触;避免在pH值< 4时长时间暴露(一周,20℃)。
7.保质期:5年。
8.应用本产品具有高化学稳定性、高流速、高载量、好的机械性能、可在位清洗、多次重复使用等特点,非特异性吸附低,回收率高,适用于工业规模生产,适用于在pH工作范围内可形成负离子的生物大分子的分离纯化,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的离子交换制备。
下面简要介绍介质的使用过程。
8.1 装柱⑴让所有的材料和试剂达到室温。
配制初始缓冲液(平衡液)和洗脱缓冲液。
⑵根据柱子大小取所需量的凝胶,清洗掉20%乙醇,抽干,用初始缓冲液(按凝胶:缓冲液=3:1的比例)配成匀浆。
匀浆作脱气处理。
⑶将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位(液面略高于滤膜),务必使底端无气泡。
⑷用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内,注意勿使产生气泡。
打开柱子出液口,使凝胶在柱内自由沉降,连结好柱子顶端柱头。
⑸打开蠕动泵,让缓冲液用使用时流速的1.33倍的流速流过,使柱床稳定。
用2~3倍柱体积的缓冲液平衡柱子。
8.2平衡让平衡缓冲液以一定流速流过柱子,到流出液电导和pH不变。
平衡液是低浓度的缓冲溶液,如Tris 、PBS等。
8.3上样⑴样品用平衡液配制,浑浊的样品要离心和过滤后上样。
deae琼脂糖凝胶洗脱原理
deae琼脂糖凝胶洗脱原理
琼脂糖凝胶是一种常用的固体分离材料,广泛应用于生物化学分离、纯化和分析等方面。
其洗脱原理可以简单描述为以下几个步骤:
1. 样品的吸附:将要分离的样品加入到琼脂糖凝胶柱或琼脂糖凝胶柱包装的实验室常用柱中,样品中的目标分子或离子会通过静电作用、水合作用等与琼脂糖凝胶颗粒表面的功能基团发生相互作用,从而被吸附在颗粒表面。
2. 洗脱缓冲液的加入:在吸附完成后,可以通过加入洗脱缓冲液来洗脱样品中的目标分子或离子。
洗脱缓冲液中的成分可以通过改变pH值、离子浓度、离子种类等来影响目标分子或离子与琼脂糖凝胶颗粒之间的相互作用,从而使其从琼脂糖凝胶表面解离。
3. 目标分子或离子的洗脱:在加入洗脱缓冲液后,目标分子或离子会与洗脱缓冲液中的成分发生相互作用,从而在洗脱缓冲液的驱动下逐渐从琼脂糖凝胶颗粒表面溶解并被洗脱出来。
整个过程中,洗脱缓冲液的选择和优化非常关键,不同的目标分子或离子可能需要不同的洗脱条件。
例如,某些目标物可能需要通过改变缓冲液的离子浓度或离子种类来实现洗脱,而某些其他目标物可能对缓冲液的pH值更敏感,因此需要调整pH值来实现洗脱。
琼脂糖凝胶的主要成分
琼脂糖凝胶的主要成分琼脂糖凝胶是一种常见的实验室材料,它具有良好的凝胶性能和化学稳定性,因此被广泛应用于分离、纯化、检测和分析生物分子。
琼脂糖凝胶的主要成分是什么?这是本文要探讨的问题。
一、琼脂糖的来源和性质琼脂糖是一种天然的多糖物质,主要来源于海藻和昆虫的外壳。
它是一种无色或微黄色的透明胶状物,具有良好的水溶性和凝胶性。
琼脂糖的化学结构是由多个半乳糖和葡萄糖单元组成的线性聚合物,它们之间通过1-3和1-4的糖苷键连接在一起。
琼脂糖的分子量较大,通常在10000到1000000之间。
二、琼脂糖凝胶的制备方法琼脂糖凝胶是通过加热琼脂糖溶液使其溶解,然后冷却凝胶化得到的。
具体操作方法如下:1.称取适量的琼脂糖,加入适量的缓冲液中,加热搅拌使其溶解。
2.将琼脂糖溶液倒入培养皿中,冷却凝胶化。
3.将凝胶切成所需的形状和大小,可以用于各种生物学实验。
三、琼脂糖凝胶的主要成分琼脂糖凝胶的主要成分是琼脂糖。
此外,还含有一些缓冲液和添加剂,以调节凝胶的性质和稳定性。
常用的缓冲液有Tris、HEPES、MES等,它们可以调节凝胶的pH值和离子强度。
添加剂包括硼酸、EDTA、Tween-20等,它们可以增强凝胶的稳定性和凝胶性能。
四、琼脂糖凝胶的应用琼脂糖凝胶具有良好的凝胶性能和化学稳定性,因此被广泛应用于分离、纯化、检测和分析生物分子。
它可以用于DNA、RNA、蛋白质等生物大分子的电泳分离和检测,也可以用于细胞和细胞器的分离和纯化。
此外,琼脂糖凝胶还可以用于制备凝胶柱、凝胶片和凝胶微球等实验室材料。
五、琼脂糖凝胶的优缺点琼脂糖凝胶具有以下优点:1.凝胶性能好,能够有效地分离和纯化生物分子。
2.化学稳定性好,不易受到外界环境的影响。
3.易于制备和使用,成本较低。
但是,琼脂糖凝胶也存在一些缺点:1.分辨率不高,不能有效地分离和检测分子之间的微小差异。
2.凝胶性能受到温度、pH值和离子强度等因素的影响,需要进行严格的控制。
琼脂糖凝胶制备材料
琼脂糖凝胶制备材料
琼脂糖凝胶是一种常用的实验室制备材料,它可以用于分离和纯化蛋白质、核酸等生物大分子。
琼脂糖凝胶的制备材料包括琼脂糖、缓冲液、交联剂等。
琼脂糖是一种多糖类物质,它是从海藻中提取的。
琼脂糖的主要成分是半乳糖和葡萄糖,它的分子量较大,可以形成凝胶。
缓冲液是用于调节溶液pH值的一种溶液,它可以稳定溶液的酸碱度,使得琼脂糖凝胶的制备过程更加稳定。
交联剂是一种化学物质,它可以将琼脂糖分子之间的化学键连接起来,形成凝胶。
制备琼脂糖凝胶的过程中,首先需要将琼脂糖和缓冲液混合,加热至琼脂糖完全溶解。
然后,将交联剂加入溶液中,搅拌均匀。
最后,将溶液倒入模具中,待凝固后即可得到琼脂糖凝胶。
在制备琼脂糖凝胶的过程中,需要注意以下几点。
首先,要选择适当的琼脂糖和缓冲液,以确保制备出的琼脂糖凝胶具有良好的稳定性和分离效果。
其次,要控制好交联剂的用量,过多或过少都会影响琼脂糖凝胶的性质。
最后,要注意制备过程中的卫生和安全,避免交叉污染和化学品接触。
总之,琼脂糖凝胶是一种常用的实验室制备材料,它的制备材料包括
琼脂糖、缓冲液、交联剂等。
在制备过程中需要注意选择适当的材料、控制好交联剂的用量以及注意卫生和安全。
制备出的琼脂糖凝胶可以
用于分离和纯化蛋白质、核酸等生物大分子,具有广泛的应用前景。
DEAE琼脂糖凝胶纯化龙胆多糖及其分子特性
Abstract: The molecular characterization of the polysaccharides purified from Gentianae Radix et Rhizoma was investigated
units along with a small portion of glucose, rhamnose, mannose and xylose. The molecular weights (Mw) and radii of gyration (Rg) of all three samples ranged from 67.2 × 103 to 788.4 × 103 u and from 90.2 to 321.1 nm, respectively, as determined by HPSEC-UV-MALLS-RI system. The results obtained in this study can provide the basis for further bioactivity studies.
20:1 (V/m). The crude polysaccharide was purified by DEAE sepharose fast flow chromatography to obtain two fractions,
F1 and F2, with a yield of 14.1% and 63.4%, respectively. All the crude polysaccharide and purified fractions were composed of neutral sugar, protein, sulfate and uronic acid with various ratios. Arabinose and galactose were the major monosaccharide
Epoxy活化琼脂糖凝胶FF
Epoxy 活化琼脂糖凝胶FFEpoxy-Activated Agarose产品编号:C500078包装规格:5 g/10 g产品简介Epoxy 琼脂糖凝胶FF 是活化好的填料,它采用平均粒径为90 μm 的4%高度交联琼脂糖凝胶,表面用大分子糖链接枝,使它有更高的比表面积和更好的生物兼容性,用它合成的亲和填料,可避免蛋白之间位阻以及蛋白和填料的位阻干扰,使其同等配基下有更高载量及更高的分辨率。
由于比表面积大,平衡和洗脱的时间也更短。
它经过接枝即使是纯化病毒,抗体等大分子的物质,载量基本保持不变。
可以在水相或者有机相中偶联,提供的该产品为半干粉填料。
产品特点1.偶联条件温和(pH 8~10,温度4~45°C ,时间1~16 h ),偶联效率高。
2.填料不需要处理,直接计算合适的量用于偶联,缩短时间。
3.保存时间长,-20°C 可以保存2年,不能受潮。
4.刚性强,耐压性好,流速快(最高流速300 cm/h ,可耐受3 bar 压强)。
5.可偶联含有氨基、巯基、羟基的多糖,蛋白,核酸,抗体等配基,应用范围广。
6. 偶联后制备的亲和填料寿命长,流速快,特异性高。
运输和保存条件室温运输,收到后-20°C 保存,保质期两年。
操作步骤用Epoxy 琼脂糖凝胶FF 偶联牛血清白蛋白(BSA )为例 1.取100 mg 的BSA 溶解于10 mL 的0.25M 的碳酸钠缓冲液(pH 9.0)中。
2.称取4 g 的Epoxy 琼脂糖粉末(4 g 干的活化的填料经完全溶胀为5~6 mL 凝胶树脂),然后用50 mL 水抽滤清洗三次。
3.将4 g 的溶胀后的Epoxy 琼脂糖加入溶解后的BSA 溶液中混合,在摇床上振荡,25°C 偶联6 h 。
4.然后加50 mg 甘氨酸,再反应6 h 已封闭剩余的基团。
5. 偶联了BSA 的填料可以装在柱子中,然后用1 M 的NaCl 溶液洗10个柱床体积,收集装柱子的液体以及清洗柱子的溶液测定BSA 的总量,再用纯水冲10个柱床体积,最后将填料在20%乙醇溶液中保存。
DEAE-sepharose FF说明书准确翻译版
离子交换柱说明书翻译目录1.简介2.所需材料3.处理填料4.组装柱子5.填料装柱6.平衡7.样品处理8.操作流速9.吸附10.洗脱11.再生12.在位清洗(CIP)13.清洁14.保存附录A附录B附录C15.订货须知1.简介CM Sepharose Fast Flow, DEAE Sepharose Fast Flow, Q Sepharose Fast Flow和SP Sepharose Fast Flow这些都是离子交换色谱的填料,高效且具有优良的流动性能。
以下说明以在推荐柱子XK 16/20中填充填料为例,不同尺寸的柱子请参考“附录A”修改填柱方案。
Sepharose FF填料也可以装在Tricorn 高性能层析柱中。
请阅读并遵循装柱指示手册。
技巧详情请翻阅"Ion Exchange Chromatography and Chromatofocusing: Principles and Methods"2.所需材料填料、柱子、泵、梯度混合器、进样阀、量筒、烧杯、真空瓶、注射器、玻璃棒、缓冲液填料缓冲液应与初始缓冲液相同,缓冲液推荐见附录C中的表2和表3。
装柱时应避免使用高粘度的缓冲液,若使用,则需降低流速。
3.处理填料1)所有材料至室温2)倾倒填料,洗掉存储液,替换为缓冲液,配成的匀浆总体积为32.5ml(75%的填料,25%的缓冲液)注意:Sepharose Fast Flow离交柱CM, DEAE 和Q存储在20%的酒精中,SP Sepharose Fast Flow存储在20%的乙醇和0.2M的醋酸钠中3)给匀浆脱气4.组装柱子1)装柱前确保每个组件完好无损,特别是网2)柱底连接注射器或者泵3)柱底浸没在缓冲液,用泵或注射器将缓冲液润洗整柱体,确保装柱无气泡4)塞上出口,装上柱底5)用缓冲液冲洗柱子,使柱底保持一小段液位,并保持柱垂直5.填料装柱以下说明以XK 16/20柱为例,不同尺寸的柱子请参考“附录A”。
SP-琼脂糖凝胶 FF
SP-琼脂糖凝胶FF货号:S8861规格:100mL保存:产品应密封贮存在4℃~25℃(保存溶液为20%乙醇),通风、干燥、清洁的地方。
不能冷冻。
用过的柱子贮存在4℃(20%乙醇加0.2mol/L NaAC)。
本产品避免与氧化剂接触;避免在pH 值<4时长时间暴露(一周,20℃)。
保质期:3年。
产品简介:SP-琼脂糖凝胶FF 是将磺酸基丙基键合在高流速琼脂糖微球上形成的一种强阳离子交换介质。
广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的离子交换制备。
本品为白色球状凝胶,无嗅、无味、无杂质。
本产品具有高化学稳定性、高流速、高载量、好的机械性能、可在位清洗、多次重复使用等特点,非特异性吸附低,回收率高,适用于工业规模生产,适用于在pH 工作范围内可形成正离子的生物大分子的分离纯化,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的离子交换制备。
理化指标:项目指标化学基团-CH 2CH 2CH 2SO 3―,可交换离子Na +离子交换类型强阳离子型基质6%交联琼脂糖蛋白质吸附容量80mg 溶菌酶/mL 介质**70mg RNase A 总离子交换量0.18-0.25mmol/mL 介质形状球形粒径45~165μm 最大流速300cm/h 工作温度4~40℃耐压0.3MPa pH 值稳定性3~14(短时间,在位清洗),4~13(长时间)pH工作范围4~13化学稳定性在以下液体中稳定:所有常用的水相缓冲液;1mol/L氢氧化钠;8mol/L尿素;6mol/L盐酸胍;70%乙醇*检测条件:层析柱10mm×300mm*柱床高15cm,25℃,流动相为0.1mol/LNaCl。
操作说明:1.装柱(1)让所有的材料和试剂达到室温。
配制初始缓冲液(平衡液)和洗脱缓冲液。
(2)根据柱子大小取所需量的凝胶,清洗掉20%乙醇,抽干,用初始缓冲液(按凝胶:缓冲液=3:1的比例)配成匀浆。
(3)将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位(液面略高于滤膜),务必使底端无气泡。
琼脂糖凝胶的主要成分
琼脂糖凝胶的主要成分琼脂糖凝胶是一种常见的实验室试剂,用于分离和纯化生物大分子如蛋白质、核酸等。
它的主要成分是琼脂糖,但同时也包含其他辅助成分。
本文将详细介绍琼脂糖凝胶的主要成分及其特性。
一、琼脂糖琼脂糖,又称为明胶,是一种由动物骨、皮、软骨等组织提取的天然高分子物质。
它主要由蛋白质和多糖组成,其中多糖成分占比较大。
琼脂糖的分子量范围很广,一般在1万到10万之间。
它的特点是水溶性好,可以形成透明的胶状物质。
琼脂糖是琼脂糖凝胶的主要成分,它在凝胶中的作用是提供结构框架。
凝胶的稳定性和孔径大小都与琼脂糖的含量有关。
二、交联剂交联剂是琼脂糖凝胶中的另一个重要成分。
它的作用是将琼脂糖分子交联在一起,形成三维网络结构。
这种交联结构使得凝胶的孔径大小和孔隙度可以调节,从而实现对分子的分离和纯化。
常见的交联剂有二甲基亚砜(DMSO)、乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)、环氧化合物等。
它们的选择取决于凝胶的用途和要求。
三、缓冲剂缓冲剂是琼脂糖凝胶中的另一个重要成分。
它的作用是维持凝胶的pH值,防止凝胶中的酸碱度变化对分子的影响。
常见的缓冲剂有Tris-HCl、HEPES、MOPS等。
它们的选择取决于凝胶的用途和要求。
四、其他辅助成分除了上述三种主要成分外,琼脂糖凝胶中还可能含有其他辅助成分,如表面活性剂、抗氧化剂等。
这些成分的作用是防止凝胶的降解和污染,从而保证凝胶的稳定性和可靠性。
总之,琼脂糖凝胶的主要成分包括琼脂糖、交联剂和缓冲剂。
它们的比例和选择取决于凝胶的用途和要求。
理解琼脂糖凝胶的成分及其特性,对于正确选择和使用琼脂糖凝胶具有重要意义。
琼脂糖凝胶主要成分
琼脂糖凝胶主要成分
琼脂糖凝胶是一种常用的实验室试剂,广泛应用于生物学、化学等领域。
它是由琼脂糖和其他添加剂组成的一种凝胶状物质。
本文将重点介绍琼脂糖凝胶的主要成分,包括琼脂糖、硼酸、EDTA、Tris 等。
一、琼脂糖
琼脂糖是琼脂的水解产物,是一种天然高分子聚糖。
它是一种无色、透明、呈块状的物质,具有良好的凝胶性和稳定性,广泛应用于食品、制药、化妆品等领域。
在实验室中,琼脂糖主要用于制备凝胶、缓冲液等。
二、硼酸
硼酸是一种无机化合物,化学式为H3BO3。
它是一种白色结晶体,具有良好的溶解性和稳定性。
硼酸在琼脂糖凝胶中的作用是维持凝胶的稳定性,防止凝胶变形或失去凝胶性。
三、EDTA
EDTA是一种螯合剂,全称为乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid)。
它是一种无色晶体,具有良好的稳定性和螯合性。
在琼脂糖凝胶中,EDTA的作用是螯合金属离子,防止金属离子对凝胶的影响,从而保持凝胶的稳定性。
四、Tris
Tris是三羟甲基氨基甲烷(tris(hydroxymethyl)aminomethane)的缩写。
它是一种有机化合物,具有良好的缓冲性能。
在琼脂糖凝胶
中,Tris的作用是调节凝胶的pH值,使其处于最适合实验的pH范围内。
综上所述,琼脂糖凝胶的主要成分包括琼脂糖、硼酸、EDTA和Tris等。
这些成分在琼脂糖凝胶中发挥着不同的作用,共同维持凝胶的稳定性和性能,为实验提供了重要的支持。
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保 存:2~8℃
包 装:100毫升/瓶,500毫升/瓶、1升/瓶等
蛋白质吸附量:110mgHSA/ml凝胶
总离子交换量:0.11-0.16mmol/ml凝胶
交换载量:3.1mg Thyroglobulin/ห้องสมุดไป่ตู้l drained medium;110 mg HSA/ml drained medium;
100mg α-lactalbumin/ml drained medium
DEAE琼脂糖凝胶FF的详细资料:
英文名称:DEAE Sepharose FF
CAS号:57407-08-6
级 别:BR
凝胶类型:离子交换填料,弱碱型
结构成分:6%交联琼脂糖
粒 径: 45-165μm
配基基团:diethylaminoethyl (二乙氨乙基)
流 速:300~600 cm/h;最大流速750 cm/h
工作PH值:2-9
工作温度:4-40℃
PH稳定性:1~14 (短时间,在位清洗);2~12 (长时间)
耐 压:0.3MPa
性 状:白色微球,凝胶状、含20%乙醇,底部为乳白色胶体
用 途:生化研究、适用于各种带负性电荷生物大分子的浓缩纯化等、利用离子交换作用 ,应 用于蛋白等生物分子的快流速高产量纯化等