急性毒性实验内容课件
合集下载
《动物毒理实验》课件：实验一 小鼠经口急性毒性试验
2. 设备与器械 吸管、烧杯、灌胃器、电子天 平（感量0.1 g）、外科手术剪、5 mL注射器、 10 mL注射器、干棉球 3. 实验动物 成年健康小鼠，18-22g，雌雄 各半
四、实验步骤
1. 剂量选择： 查阅文献，估计预期毒性中值；
预试验，求出受试化学物的0～100%或 10～90%大致致死范围，设计正式试验的剂 量和分组。
体重增加：低水平的化学毒物促进动物 生长，动物体重增长率大于对照组。
观察指标（3）
死亡数和死亡时间 十分重要的中毒机理研究信息；重
点观察和记录各个剂量组动物的死亡数； 每只动物死亡的时间（尤其是最早出现 死亡的时间）。
观察指标（4）
病理学检查及其他指标
及时剖检：对死亡动物的主要脏器进行肉眼观察， 重点检查主要脏器的大小、外观、色泽、有无充血、 出血、水肿等；
（2） 配制方法的选择：等浓度稀释法和等 容量稀释法。
等浓度稀释法：将受试化学物配制成一 种浓度，不同剂量组实验动物单位体重所给 受试化学物的体积不同，剂量越高，所用的 体积越大；剂量越低，所用的体积越小。
等容量稀释法
将受试化学物配制成不同浓度，不同剂量 组实验动物单位体重所给受试化学物的体 积相同，剂量越大，受试化学物配制的浓 度越高。
为避免操作误差，等容量稀释的传统方法 常用1︰K系列稀释法（K=各组剂量比值）。
根据实验设计要求确定最高剂量组所需受 试化学物的浓度和总体积，配制母液。
（3）等容量稀释法配制6个剂量组的染毒溶液
➢ 求母液浓度C1 绝对致死剂量为2500mg/kg，最低中毒剂
量为800mg/kg，每10g体重小鼠灌胃0.2mL C1=2500mg/kg×10g/0.2mL＝125mg/mL ➢ 求公比r
四、实验步骤
1. 剂量选择： 查阅文献，估计预期毒性中值；
预试验，求出受试化学物的0～100%或 10～90%大致致死范围，设计正式试验的剂 量和分组。
体重增加：低水平的化学毒物促进动物 生长，动物体重增长率大于对照组。
观察指标（3）
死亡数和死亡时间 十分重要的中毒机理研究信息；重
点观察和记录各个剂量组动物的死亡数； 每只动物死亡的时间（尤其是最早出现 死亡的时间）。
观察指标（4）
病理学检查及其他指标
及时剖检：对死亡动物的主要脏器进行肉眼观察， 重点检查主要脏器的大小、外观、色泽、有无充血、 出血、水肿等；
（2） 配制方法的选择：等浓度稀释法和等 容量稀释法。
等浓度稀释法：将受试化学物配制成一 种浓度，不同剂量组实验动物单位体重所给 受试化学物的体积不同，剂量越高，所用的 体积越大；剂量越低，所用的体积越小。
等容量稀释法
将受试化学物配制成不同浓度，不同剂量 组实验动物单位体重所给受试化学物的体 积相同，剂量越大，受试化学物配制的浓 度越高。
为避免操作误差，等容量稀释的传统方法 常用1︰K系列稀释法（K=各组剂量比值）。
根据实验设计要求确定最高剂量组所需受 试化学物的浓度和总体积，配制母液。
（3）等容量稀释法配制6个剂量组的染毒溶液
➢ 求母液浓度C1 绝对致死剂量为2500mg/kg，最低中毒剂
量为800mg/kg，每10g体重小鼠灌胃0.2mL C1=2500mg/kg×10g/0.2mL＝125mg/mL ➢ 求公比r
《动物毒理实验》课件：实验一 小鼠经口急性毒性试验
为避免操作误差，等容量稀释的传统方法 常用1︰K系列稀释法（K=各组剂量比值）。
根据实验设计要求确定最高剂量组所需受 试化学物的浓度和总体积，配制母液。
（3）等容量稀释法配制6个剂量组的染毒溶液
➢ 求母液浓度C1 绝对致死剂量为2500mg/kg，最低中毒剂
量为800mg/kg，每10g体重小鼠灌胃0.2mL C1=2500mg/kg×10g/0.2mL＝125mg/mL ➢ 求公比r
三、实验试剂和材料
1. 药物与试剂 盐酸二甲硝咪唑、苦味酸酒精 饱和溶液和中性红溶液、记号笔
2. 设备与器械 吸管、烧杯、灌胃器、电子天 平（感量0.1 g）、外科手术剪、5 mL注射器、 10 mL注射器、干棉球 3. 实验动物 成年健康小鼠，18-22g，雌雄 各半
四、实验步骤
1. 剂量选择： 查阅文献，估计预期毒性中值；
式中，K：各组剂量的比值，K＝1/r。 取母液m mL置一容器中，供最高剂量组染毒用；加入
m mL溶剂，稀释后的浓度为C2，C1︰C2＝1︰K，取出 m mL供第二组动物染毒用；再加入m mL溶剂，稀释后的 浓度为C3，C2︰C3＝1︰K，取出m mL供第三组动物染 毒用。依次类推，配制其它不同剂量组的试液。
可能的中毒表现： 兴奋，活动增加、骚动、窜跑、跳跃、呼吸加深加快； 抑制，活动减少、呆立、静卧、步态不稳、呼吸困难等； 刺激症状：搔鼻、尖叫、出汗、流涎、眼耳鼻等的出血。
观察指标（2）
体重 观察期间的体重变化可以反映动物中毒
后的整体变化，应3-5天测量一次； 体重减轻：可能是动物食欲下降、摄食
量减少；也可能是化合物干扰代谢系统，影 响食物吸收、利用；
（1） 动物的禁食和复食：灌胃前禁食6～10h，使 动物保持空腹状态，且不至因禁食时间过长影响肝 脏，进而影响实验结果。灌胃后至少2～3h后才能 复食，灌服油剂比水剂要求复食时间更长； （2） 灌胃体积：小鼠每10g体重灌胃0.1～0.2mL， 最多不超过0.4mL。小鼠灌胃量的极限是0.5～1mL； （3） 灌胃方法和注意事项。
根据实验设计要求确定最高剂量组所需受 试化学物的浓度和总体积，配制母液。
（3）等容量稀释法配制6个剂量组的染毒溶液
➢ 求母液浓度C1 绝对致死剂量为2500mg/kg，最低中毒剂
量为800mg/kg，每10g体重小鼠灌胃0.2mL C1=2500mg/kg×10g/0.2mL＝125mg/mL ➢ 求公比r
三、实验试剂和材料
1. 药物与试剂 盐酸二甲硝咪唑、苦味酸酒精 饱和溶液和中性红溶液、记号笔
2. 设备与器械 吸管、烧杯、灌胃器、电子天 平（感量0.1 g）、外科手术剪、5 mL注射器、 10 mL注射器、干棉球 3. 实验动物 成年健康小鼠，18-22g，雌雄 各半
四、实验步骤
1. 剂量选择： 查阅文献，估计预期毒性中值；
式中，K：各组剂量的比值，K＝1/r。 取母液m mL置一容器中，供最高剂量组染毒用；加入
m mL溶剂，稀释后的浓度为C2，C1︰C2＝1︰K，取出 m mL供第二组动物染毒用；再加入m mL溶剂，稀释后的 浓度为C3，C2︰C3＝1︰K，取出m mL供第三组动物染 毒用。依次类推，配制其它不同剂量组的试液。
可能的中毒表现： 兴奋，活动增加、骚动、窜跑、跳跃、呼吸加深加快； 抑制，活动减少、呆立、静卧、步态不稳、呼吸困难等； 刺激症状：搔鼻、尖叫、出汗、流涎、眼耳鼻等的出血。
观察指标（2）
体重 观察期间的体重变化可以反映动物中毒
后的整体变化，应3-5天测量一次； 体重减轻：可能是动物食欲下降、摄食
量减少；也可能是化合物干扰代谢系统，影 响食物吸收、利用；
（1） 动物的禁食和复食：灌胃前禁食6～10h，使 动物保持空腹状态，且不至因禁食时间过长影响肝 脏，进而影响实验结果。灌胃后至少2～3h后才能 复食，灌服油剂比水剂要求复食时间更长； （2） 灌胃体积：小鼠每10g体重灌胃0.1～0.2mL， 最多不超过0.4mL。小鼠灌胃量的极限是0.5～1mL； （3） 灌胃方法和注意事项。
《急性毒性试验》课件
食品安全性评价
急性毒性试验：评 估食品中化学物质 的急性毒性
应用：用于食品添 加剂、农药残留、 食品包装材料等安 全性评价
意义：保障食品安 全，降低食品安全 风险
法规要求：各国食 品安全法规对急性 毒性试验有明确要 求
Part Six
急性毒性试验的局 限性
实验动物和人体的差异
物种差异：实验动物与人类在生理、 生化、遗传等方面存在差异
急性毒性与其他毒性试验的整合
整合目的：提高毒性试验的准确性和效率 整合方法：采用多学科、多领域的交叉研究 整合优势：降低试验成本，提高试验质量 整合挑战：需要解决不同毒性试验之间的差异和矛盾
急性毒性试验在特殊领域的应用
药物研发：评估药物的毒 性和副作用
环境监测：评估化学物质 对环境的影响
食品安全：评估食品添加 剂的安全性
代谢差异：不同物种对同一种物质的代谢能力可能不同 生理差异：不同物种的生理结构、功能可能不同，对同一种物质的反应可 能不同
实验条件和实际条件的差异
单击添加项标题
实验条件：实验室环境，可控因素较多
单击添加项标题
实验条件：单一剂量，单一时间
单击添加项标题
实验条件：单一物种，单一环境
单击添加项标题
实验条件：短期观察，短期影响
毒性反应的机制分析
毒性反应的类型：急性、亚急性、慢性 毒性反应的机制：细胞毒性、组织毒性、器官毒性 毒性反应的影响因素：剂量、时间、个体差异 毒性反应的检测方法：生物标志物、病理学检查、生理学检查
Part Five
急性毒性试验的应 用和意义
药物研发和安全性评价
药物研发：急性 毒性试验是药物 研发过程中的重 要环节，用于评 估药物的安全性 和有效性
常见急性中毒新版培训课件
鉴别诊断 应与中暑、急性胃肠炎、脑炎等鉴 别外，必须与拟除虫菊酯类中毒相鉴别，前 者的口腔和胃无特出臭味，胆碱酯酶活力正 常，后者以嗜睡、发绀、出血性膀胱炎为主 要表现而无瞳孔缩小、大汗淋漓、流涎等。
常见急性中毒新版
41
治疗
★一般处理
迅速清除尚未吸收的毒物，防止毒物的继 续吸收。
立即离开现场,脱去污染的衣服,用肥皂水
低钾血症，考虑钡盐中毒 酒味提示甲醇或乙醇中毒。 昏迷、反复抽搐，考虑有机氟杀鼠剂、毒鼠强中毒 面色潮红、皮肤干燥，心动过速、烦躁谵妄，考虑莨菪类中毒 出现嗜睡、发绀、出血性膀胱炎考虑杀虫脒中毒
诊断
用试验治疗可帮助诊断。 毒物特异性检测可确诊
剩余食物、毒物、药物。 含毒标本：如呕吐物、胃内容物、血液、
低毒类 LD501000～5000mg/kg, 马拉硫磷 、辛硫磷。
常见急性中毒新版
20
有机磷杀虫药中毒的常见原因
生产性中度 使用性中毒 生活性中毒
常见急性中毒新版Biblioteka 21有机磷杀虫药中毒的常见原因
使用性中毒 是在使用过程中，施药人员喷洒杀虫 药时，药液污染皮肤或衣服后再由皮肤吸收，以及 吸入空气中杀虫药所致。
常见急性中毒新版
31
临床表现
反跳 出现AOPP患者经积极抢救治疗，症
状明显缓解的恢复期，病情突然恶化重新出 现AOPP的胆碱能危象，这种现象称为“反 跳”，多在中毒后2-9日。
常见急性中毒新版
32
临床表现
反跳原因是：目前不很清楚。
①毒物：氧化乐果、对硫磷等，
②毒物清除不彻底致残毒吸收，进食过早，
常见急性中毒新版
24
发病机制
OP主要是抑制乙酰胆碱(Ach)，OP的毒性 作用是与胆碱酯酶（ChE）的酯解部位结合 成磷酰化胆碱酯酶(中毒酶)，后者比较稳定 无分解Ach的能力；引起Ach蓄积，使胆碱 能神经受到持续冲动，导致先兴奋后衰竭的 一系列毒蕈碱样、烟碱样和中枢神经系统等 症状；严重患者因昏迷和呼吸衰竭而死亡。
常见急性中毒新版
41
治疗
★一般处理
迅速清除尚未吸收的毒物，防止毒物的继 续吸收。
立即离开现场,脱去污染的衣服,用肥皂水
低钾血症，考虑钡盐中毒 酒味提示甲醇或乙醇中毒。 昏迷、反复抽搐，考虑有机氟杀鼠剂、毒鼠强中毒 面色潮红、皮肤干燥，心动过速、烦躁谵妄，考虑莨菪类中毒 出现嗜睡、发绀、出血性膀胱炎考虑杀虫脒中毒
诊断
用试验治疗可帮助诊断。 毒物特异性检测可确诊
剩余食物、毒物、药物。 含毒标本：如呕吐物、胃内容物、血液、
低毒类 LD501000～5000mg/kg, 马拉硫磷 、辛硫磷。
常见急性中毒新版
20
有机磷杀虫药中毒的常见原因
生产性中度 使用性中毒 生活性中毒
常见急性中毒新版Biblioteka 21有机磷杀虫药中毒的常见原因
使用性中毒 是在使用过程中，施药人员喷洒杀虫 药时，药液污染皮肤或衣服后再由皮肤吸收，以及 吸入空气中杀虫药所致。
常见急性中毒新版
31
临床表现
反跳 出现AOPP患者经积极抢救治疗，症
状明显缓解的恢复期，病情突然恶化重新出 现AOPP的胆碱能危象，这种现象称为“反 跳”，多在中毒后2-9日。
常见急性中毒新版
32
临床表现
反跳原因是：目前不很清楚。
①毒物：氧化乐果、对硫磷等，
②毒物清除不彻底致残毒吸收，进食过早，
常见急性中毒新版
24
发病机制
OP主要是抑制乙酰胆碱(Ach)，OP的毒性 作用是与胆碱酯酶（ChE）的酯解部位结合 成磷酰化胆碱酯酶(中毒酶)，后者比较稳定 无分解Ach的能力；引起Ach蓄积，使胆碱 能神经受到持续冲动，导致先兴奋后衰竭的 一系列毒蕈碱样、烟碱样和中枢神经系统等 症状；严重患者因昏迷和呼吸衰竭而死亡。
急性毒性试验PPT课件
编辑版pppt
12
(二)安全性评价
(1)根据急性毒性试验结果判断供试药物毒性的强弱、类型。国内尚无统—规 定。
(2)急性毒性试验结果对临床研究有指导意义，可以为临床研究时探索安全有 效剂量避免出现急性不良反应提供依据。
但是，鉴于人体与各种动物对各类化合物的吸收、分布、代谢、排泄以及各 类型毒性反应的差异，尚无规律可循，现有化学药品统计数据表明，在进行临 床研究时，仍应根据实验结果参考文献资料报道进行由低到高的安全治疗剂量 的探索。
编辑版pppt
10
三、近似致死量试验
国外近年来有采用少量动物进行近似致死量测定的方法。其中有的类似 LD50的预试验或霍恩氏法。每组用3—4只动物，设多组，详细观察并汜 录动物毒性反应井进行血液学，血液生化以及病理组织学观察。有的采用 剂量递增法即—只动物一个剂量以几何级数递增，根据前个剂量的反应， 决定下—个剂量。或采用剂量累积法，同一批动物间隔一定时间、剂量由 小到大给药，观察毒性反应，同时结合血药浓度的测定，确定动物的急性 毒性反应、靶器官、中毒或致死剂量、毒性反应时的血药浓度。剂量递增 法类似于LD50测定的阶梯法(或称序贯法、上下法)，适用小动物而且毒性 反应出现快的试验，10—20只动物即可测定。剂量累积法则适用大动物， 利用大约6只合格动物即可进行急性毒性试验的全面观察。另外，国外还 有采用固定剂量给药观察近似致死剂量，以决定药物毒性大小者。
编辑版pppt
11
四、急毒试验结果评价 (一)可靠性评价
为保证急毒结果，实验条件应符合GLP的要求，供试品质量稳定， 动物合格，实验方案，实验原始记录，标准操作规程，总结报告应 符合要求。总结报告中应包括摘要、供试品、试验动物，试验环境、 给药方法、观察方法、毒性反应症状、体重变化、病理组织学变化、 雄性反应和死亡出现的时间、LD50和LD5及其可信限的计算方法、 结果讨论等。根据试验结果对急性毒性进行全面评价。
发光细菌法急性毒性实验课件
实验目的与内容
一、实验目的
1.掌握发光细菌毒性测试的标准方法； 2.根据发光细菌发光强度的变化判断
受试化合物的毒性； 3.初步了解发光细菌毒性测试的影响因素。
二、实验内容
1.发光细菌的复苏； 2.发光细菌发光强度的测定； 3.受试化合物毒性的计算。
实验目的与内容
发光细菌是一种非致病性的普通细菌，具有发光能力，在正 常条件下经培养后能发出肉眼可见的兰绿色光，这种发光过程 是细菌体内一种新陈代谢反应，是氧化呼吸链上的一个侧支。 发光细菌的发光反应模式图(1)所示。发光细菌发光反应途径可 简单概述为:
3. 仪器： 生物发光光度计，配制2或5 ml测试管，当氯化汞标
准液浓度为0.10 mg/L时，发光细菌的相对发光度为50 ％，其误差不超过10％。2或5 ml 测试样品管，具标准 磨口塞，为制造比色管的玻璃料制作，由专业玻璃仪 器厂制造，分别适用于相应型号的生物放光光度计。 注射器(1 ml)、微量注射器(10 μl)、定量加液瓶(5 ml)、 吸管(2.10、25 ml)、试剂瓶(100 ml)、量桶(100、500 ml)、棕色容量瓶(50、250、1000 ml)、半微量滴定管 (配磨口试液瓶，全套仪器均为棕色，10 ml)等若干。
发光细菌的复苏 从冰箱内取出含有0.5 g 发光细菌冻干粉和氯化钠
溶液, 置于含有冰块的小号保温瓶, 用1 ml注射器吸取 0.5 ml冷的氯化钠2.0 g/100 ml溶液(适用于5ml的测试 管)或1 ml 冷的氯化钠2.5％溶液(适用于2 ml的测试管) 注入冻干粉中, 充分混匀。2 min后菌即复苏发光, 可在 暗室观察, 肉眼可见微光。备用。
简介
采用现代光电检测手段(生物发光光度计)的发光菌生物 毒性实验是毒理学中生物测定的方法之一。 该方法快速、 简便、灵敏、廉价,在有毒物质的筛选, 环境污染生物学评 价等方面有重要的意义, 因而备受各国有关研究者的关注。
PPT课件-急性中毒
9
中毒的途径
呼吸道 消化道 皮肤、粘膜 注射等途径摄人体 内。
10
中毒的原因
(1)生产性中毒 主要发生在毒物的生产、贮存、转运过程中毒 (2)生活性中毒 毒物污染了食物、水源、空气所造成的中毒 (3)自杀与投毒 因身患顽疾、情感破裂等因素所致的自我服毒 和敌视者的人为投毒。 (4)医源性中毒 医务人员在治疗患者疾患时超大剂量用药时所 致的中毒。 (5)各种恐怖性袭击 (6)误食、误服有毒动植物所致的中毒。
根据来源和用途将毒物分为以下
1.工业毒物： ①窒息性化合物 氰化物、一氧化碳、硫 化氢 等。 ②刺激性气体 氮氧化物、氨、氯等。 ③有 机化合物 甲醇、四氯化碳、苯、酚等。 ④金属、类金属及其化合物 砷、汞、鉛、钡等 。
4
根据来源和用途将毒物分为以下
1.工业毒物： ①窒息性化合物 氰化物、一氧化碳、硫 化氢 等。②刺激性气体 氮氧化物、氨、氯等。 ③有机化合物 甲醇、四氯化碳、苯、酚等。 ④金属、类金属及其化合物 砷、汞、铅、钡等 。
40
实验室检查作为辅助诊断
毒物定性定 量检查
毒物体内代谢 产物检查
毒物选择性对器官损 害的机能检查
毒物中毒 机理检查
病情严重程度评估
1
有生命危险
2
3
有症状但 尚稳定
4
症状较轻 无症状
严重且情况 不稳定
急性中毒轻重程度的判断与预测病情危重指标
中毒可产生器官损害，引起多脏器功能失常和衰 竭。如出现下列情况者，说明病人的中毒进入危重期 ，必须严密观察病情变化，积极维持机体器官的功能 ： ①中枢神经系统抑制 出现昏迷、呼吸抑制、 血压下降、惊厥、抽搐。 ②肺水肿 ③严重的心律失常 ④心脏骤停 ⑤发绀 ⑥急性溶血性贫血，血红蛋白尿 ⑦急性肾衰、少尿、尿毒症 ⑧肝性脑病 ⑨烧伤、化学灼伤、眼灼伤 43
中毒的途径
呼吸道 消化道 皮肤、粘膜 注射等途径摄人体 内。
10
中毒的原因
(1)生产性中毒 主要发生在毒物的生产、贮存、转运过程中毒 (2)生活性中毒 毒物污染了食物、水源、空气所造成的中毒 (3)自杀与投毒 因身患顽疾、情感破裂等因素所致的自我服毒 和敌视者的人为投毒。 (4)医源性中毒 医务人员在治疗患者疾患时超大剂量用药时所 致的中毒。 (5)各种恐怖性袭击 (6)误食、误服有毒动植物所致的中毒。
根据来源和用途将毒物分为以下
1.工业毒物： ①窒息性化合物 氰化物、一氧化碳、硫 化氢 等。 ②刺激性气体 氮氧化物、氨、氯等。 ③有 机化合物 甲醇、四氯化碳、苯、酚等。 ④金属、类金属及其化合物 砷、汞、鉛、钡等 。
4
根据来源和用途将毒物分为以下
1.工业毒物： ①窒息性化合物 氰化物、一氧化碳、硫 化氢 等。②刺激性气体 氮氧化物、氨、氯等。 ③有机化合物 甲醇、四氯化碳、苯、酚等。 ④金属、类金属及其化合物 砷、汞、铅、钡等 。
40
实验室检查作为辅助诊断
毒物定性定 量检查
毒物体内代谢 产物检查
毒物选择性对器官损 害的机能检查
毒物中毒 机理检查
病情严重程度评估
1
有生命危险
2
3
有症状但 尚稳定
4
症状较轻 无症状
严重且情况 不稳定
急性中毒轻重程度的判断与预测病情危重指标
中毒可产生器官损害，引起多脏器功能失常和衰 竭。如出现下列情况者，说明病人的中毒进入危重期 ，必须严密观察病情变化，积极维持机体器官的功能 ： ①中枢神经系统抑制 出现昏迷、呼吸抑制、 血压下降、惊厥、抽搐。 ②肺水肿 ③严重的心律失常 ④心脏骤停 ⑤发绀 ⑥急性溶血性贫血，血红蛋白尿 ⑦急性肾衰、少尿、尿毒症 ⑧肝性脑病 ⑨烧伤、化学灼伤、眼灼伤 43
急性中毒PPT课件
（二）毒物分类
1.化学品中毒： 工业毒物:氰化物、亚硝酸盐、甲醇、乙醇中毒 农药:有机磷农药、杀鼠剂、除草剂 药物:任何药物过量，有毒药物（包括毒品） 2.生物品中毒： 微生物：葡萄球菌肠毒素、大肠杆菌肠毒素、肉毒梭菌毒素、 植物：毒蕈、乌头、马钱子、发芽马玲薯、未煮熟的四季豆、 动物：鱼胆、河豚、海蛰、毒蛇、毒虫、毒蜂等
“三大”诊断要素
1、相关毒物接触史 2、特征性中毒表现 3、实验室检查
13
（一）、相关毒物接触史
14
1、集体发病
对诊断中毒最有提示价值，如有共同的毒物接触史， 尔后出现集体发病，则应首先想到并可确诊为中毒事件。 集体发病具有“五同”的特性： 在同一时间（相近） 同一地点（相邻） 同一经历（相似） 的同一人群 有同样的症状
常见的毒物：一氧化碳、氰化物、硫化氢、亚硝酸盐、 硝酸盐、杀虫脒等化学品
7
3、感染性毒：
主要表现为胃肠道和全身菌毒血症的中毒症状，往往死 于感染性休克和多脏器功能衰竭， 常见毒物：细菌性食物中毒， 微生物毒素性食物中毒
4、神经性毒：
主要作用于神经系统使神经未梢失能，严重者造成胸 廓呼吸运动被抑制，伴有全身神经和肌肉麻痹，往往死于急 性呼吸衰竭。 常见的毒物:有机磷农药中毒 莨菪碱类植物 肉毒杆菌中毒 毒蛇咬伤中毒 河豚中毒 毒鼠强中毒
4、直接进入血液循环：
中毒出现的时间最快，症状最重，往往由直接静脉注射方 式或动物蛰咬伤造成
6
（二）、毒理机制
1、腐蚀性毒：
主要表现为接触局部的腐蚀性损害和全身 吸收中毒症状，往往死于其后的全身并发症，
常见毒物：强酸或强碱类
2、窒息性毒：
主要表现为全身缺氧（组织细胞缺氧），往 往死于严重的低氧血症，
急性毒性实验内容
如：丙烯腈，过氧化二碳酸二环己酯
ppt课件完整
4
急性毒性试验目的
了解外源化学物急性毒性的强度，求出LD50 了解外源化学物毒作用的性质、毒效应的特征
及可能的靶器官，初步评价外源化学物的危险 性。
探求外源化学物的剂量-反应（效应）关系， 为亚慢性毒性、蓄积毒性和慢性毒性及特殊毒 性试验染毒剂量的设计和观察指标的选择提供 参考。
初步了解动物致死的原因，为研究毒作用的机
制提供线索，进而为制定中毒急救治疗措施提
供依据。
ppt课件完整
5
由急性毒性试验可得到两类毒性参数
上限参数 是以死亡为终点的毒性，包 括绝对致死量、半数致死量、最小致 死量、最大耐受量等；
下限参数 是以非致死性急性毒作用 为终点的毒性，包括急性阈剂量和无 作用剂量等。
适用于大、小鼠。
ppt课件完整
18
烙印法： 将铸铁号码加热后，在动物体表部位烧烙，以 破坏毛囊，留下印记。适用于大动物。
挂牌法： 用金属或塑料制成号牌，固定在动物的耳部或 系于其颈部。适用于较大动物。
ppt课件完整
19
实验动物分组
目的：减少个体差异对实验结果的影响；原 则：按统计学原则随机分组，使非处理因素 最大限度地保持一致，提高每组实验动物间 的均衡性。
ppt课件完整
41
校正公式
ppt课件完整
42
LD50的标准误
ppt课件完整
43Βιβλιοθήκη LD50 的95 %可信限
LD50 的95 %可信限 =log-1(log LD50±1.96×Sx50)
ppt课件完整
44
i—组距，即相邻两组剂量对数剂量之差
Xm—最大剂量对数 P—各剂量组死亡率(死亡率均用小数表示)
ppt课件完整
4
急性毒性试验目的
了解外源化学物急性毒性的强度，求出LD50 了解外源化学物毒作用的性质、毒效应的特征
及可能的靶器官，初步评价外源化学物的危险 性。
探求外源化学物的剂量-反应（效应）关系， 为亚慢性毒性、蓄积毒性和慢性毒性及特殊毒 性试验染毒剂量的设计和观察指标的选择提供 参考。
初步了解动物致死的原因，为研究毒作用的机
制提供线索，进而为制定中毒急救治疗措施提
供依据。
ppt课件完整
5
由急性毒性试验可得到两类毒性参数
上限参数 是以死亡为终点的毒性，包 括绝对致死量、半数致死量、最小致 死量、最大耐受量等；
下限参数 是以非致死性急性毒作用 为终点的毒性，包括急性阈剂量和无 作用剂量等。
适用于大、小鼠。
ppt课件完整
18
烙印法： 将铸铁号码加热后，在动物体表部位烧烙，以 破坏毛囊，留下印记。适用于大动物。
挂牌法： 用金属或塑料制成号牌，固定在动物的耳部或 系于其颈部。适用于较大动物。
ppt课件完整
19
实验动物分组
目的：减少个体差异对实验结果的影响；原 则：按统计学原则随机分组，使非处理因素 最大限度地保持一致，提高每组实验动物间 的均衡性。
ppt课件完整
41
校正公式
ppt课件完整
42
LD50的标准误
ppt课件完整
43Βιβλιοθήκη LD50 的95 %可信限
LD50 的95 %可信限 =log-1(log LD50±1.96×Sx50)
ppt课件完整
44
i—组距，即相邻两组剂量对数剂量之差
Xm—最大剂量对数 P—各剂量组死亡率(死亡率均用小数表示)
食品的测定实验急性毒性实验
食品的测定实验急性毒性实验
n 致死量的测定常以半数致死量为标准。半数致死量是指能 够引起试验动物一半死亡的剂量，妈药物致死量对数值， 用符号LD50表示。由于LD50的测定较简便、可靠，而且 稳定，现已成为标志动物急性中毒程度的重要常数。 LD50测定的方法有多种，如Bliss法、改进寇氏法、简化 机率单位法、累积插值法、机率单位-加权直线加归法等 等。以上方法虽各有特点，但都有共同的要求：
食品的测定实验急性毒性实验
n 分组完毕和各组剂量算出后，分组灌服或注射不同剂量的 受试药物。为能得到理想的结果，实验最好从中间剂量开 始，以便从最初几个剂量组动物接受药物后的反应来判断 两端剂量是否合适，便于调整剂量和组数。为了提高实验 的精确度和节省药物，受试药物可按“低比稀释法”配置。 即使每只动物的用药体积相等（0.2ml/10g），而溶质不 等。给药后逐日观察并记录中毒反应、死亡率和死亡情况。
食品的测定实验急性毒性实验
五、实验结果记录与计算
组 剂量 Logd(X) 死亡数 死亡率 P2
别 g/kg(d)
（P）
P-P2
1
2
3
4ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
食品的测定实验急性毒性实验
n 公式1: （logLD50） X50=Xm-i(ΣP-05)
n
则LD50=log-1 X50
n 公式2： Sx50=i*
n 公式3：LD50的95%可信限=lg-1（X50±1.96S X50）
n （1）动物：均选用体重17～22克健康小鼠（同次试验体 重相差不得超过4克），或选用体重120～150克（同次试 验体重相差不得超过10克）健康大鼠作实验动物。性别相 同或雌雄各半。
食品的测定实验急性毒性实验
n 致死量的测定常以半数致死量为标准。半数致死量是指能 够引起试验动物一半死亡的剂量，妈药物致死量对数值， 用符号LD50表示。由于LD50的测定较简便、可靠，而且 稳定，现已成为标志动物急性中毒程度的重要常数。 LD50测定的方法有多种，如Bliss法、改进寇氏法、简化 机率单位法、累积插值法、机率单位-加权直线加归法等 等。以上方法虽各有特点，但都有共同的要求：
食品的测定实验急性毒性实验
n 分组完毕和各组剂量算出后，分组灌服或注射不同剂量的 受试药物。为能得到理想的结果，实验最好从中间剂量开 始，以便从最初几个剂量组动物接受药物后的反应来判断 两端剂量是否合适，便于调整剂量和组数。为了提高实验 的精确度和节省药物，受试药物可按“低比稀释法”配置。 即使每只动物的用药体积相等（0.2ml/10g），而溶质不 等。给药后逐日观察并记录中毒反应、死亡率和死亡情况。
食品的测定实验急性毒性实验
五、实验结果记录与计算
组 剂量 Logd(X) 死亡数 死亡率 P2
别 g/kg(d)
（P）
P-P2
1
2
3
4ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
食品的测定实验急性毒性实验
n 公式1: （logLD50） X50=Xm-i(ΣP-05)
n
则LD50=log-1 X50
n 公式2： Sx50=i*
n 公式3：LD50的95%可信限=lg-1（X50±1.96S X50）
n （1）动物：均选用体重17～22克健康小鼠（同次试验体 重相差不得超过4克），或选用体重120～150克（同次试 验体重相差不得超过10克）健康大鼠作实验动物。性别相 同或雌雄各半。
食品的测定实验急性毒性实验
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
PPT学习交流
15
PPT学习交流
16
染色法
优点： 简单方便，不痛苦，无损伤。
缺点： 时间较长时，染色剂易褪色； 标记容易模糊不清。
PPT学习交流
17
耳缘孔口法：
在耳缘先用针穿孔和用剪刀剪口，再用酒精墨 汁涂抹，使黑色渗入孔口，伤口愈合后不易脱 落，这种标号亦可标号１～９９。
适用于大、小鼠。
PPT学习交流
• 初步了解动物致死的原因，为研究毒作用的机
制提供线索，进而为制定中毒急救治疗措施提
供依据。
PPT学习交流
5
由急性毒性试验可得到两类毒性参数
上限参数 是以死亡为终点的毒性，包 括绝对致死量、半数致死量、最小致 死量、最大耐受量等；
下限参数 是以非致死性急性毒作用 为终点的毒性，包括急性阈剂量和无 作用剂量等。
PPT学习交流
9
实验动物的年龄与体重的关系
动物
大鼠 小鼠 豚鼠 兔 犬 猫
成年年龄（周） 3 2 2 3~4 3~4 3~4
体重（克） 150 15 250 1.5kg 7~15kg 1kg
寿命（年） 2~3 2~3 6~8 4~9 15~20 10~12
PPT学习交流
10
急性毒性试验的动物体重
四 3 11 16 17 20
PPT学习交流
27
随机区组设计
将动物称重，按体重顺序依次排列编号，分成若 干个区组，每一区组的动物体重相近，每一区组的 动物数即为组数。再从随机数字表上任意抄下随机 数字，依次标在每个动物的编号下，如欲将动物分 为４组，则将每一区组动物编号下的随机数字，按 顺序分别用４、３、２、１除之，根据余数大小将 动物分入各组。
7
急性毒性试验项目
• 急性半数致死量测定 • 半数耐受限量测定 • 7d喂养试验 • 其他：近似致死量试验、固定剂量法、急性毒
性分级法、阶梯法、金字塔法、限量试验、急 性系统毒性试验等。
PPT学习交流
8
急性毒性试验设计
▪ 实验动物选择
▪品种 ▪品系 ▪个体 性别 年龄 体重 生理病理状况
对外源化学物毒性反应与人近似； 易于饲养管理，方便实验操作； 原则 易于获得，品系纯化，价格低廉。
急性毒性试验方法
PPT学习交流
1
一、急性毒性
急性毒性指人或动物一次或24 h之 内多次接触外源化学物后，在短期内 所发生的毒性效应，包括致死效应。
PPT学习交流
2
一次：指瞬间给实验动物染毒，如经 口、经静脉注射染毒。 24 h之内多次：指外源化学物毒性过 低，需给予动物较大剂量。
PPT学习交流
3
PPT学习交流
12
实验动物的标记
➢ 染色法 ➢ 耳缘孔口法 ➢ 烙印法 ➢ 挂牌法
PPT学习交流
13
染色法
用不同颜色的染料涂擦于动物不同部位来 表示不同号码，适用于大鼠、小鼠和豚鼠。 常用染料： 3％～5％苦味酸酒精饱和液，呈黄色； 甲基紫酒精饱和液，呈紫色； 0.5％中性红或品红溶液，呈红色等。
PPT学习交流
14
实验动物的标记
方法一：
6
按右前肢、右肋、右后肢、颈部、背中、尾根、左
前肢、左肋、左后肢，顺序编号为1～9号，不染色
为10号。在动物相同部位涂染另一种颜色染料表示
十位，两种颜色可编1～99号。
方法二：
以头部为1号，顺时针方向依次从右耳、右前肢、右
后肢、颈部、背中、尾根、左耳、左前肢、左后肢
急性毒性效应出现的快慢和毒性反应的强度与外 源化学物的性质和染毒剂量的大小有关。
如：丙烯腈，过氧化二碳酸二环己酯
PPT学习交流
4
急性毒性试验目的
• 了解外源化学物急性毒性的强度，求出LD50
• 了解外源化学物毒作用的性质、毒效应的特征 及可能的靶器官，初步评价外源化学物的危险 性。
• 探求外源化学物的剂量-反应（效应）关系，为 亚慢性毒性、蓄积毒性和慢性毒性及特殊毒性 试验染毒剂量的设计和观察指标的选择提供参 考。
PPT学习交流
6
用小动物试验可求出外源化学物对一种或几种 实验动物的急性LD50或LC50; 用大动物试验可求出近似致死剂量 （approximate lethal dose, ALD）;
根据LD50（LC50）值可进行急性毒性分级，以 初步评价外源化学物对机体急性毒性大小和急性
毒作用的强度。
PPT学习交流
• 大鼠 120～150ｇ
• 小鼠 18～22ｇ
• 豚鼠 200～250ｇ
• 家兔 2～2.5 kg
• 犬 10～15kg（成年）
• 变异范围不得超过所用动物平均体重
的10％。
PPT学习交流
11
急性毒性试验的动物要求
• 动物数量：小动物4～6组，每组至 少10只；犬等大动物每组6只。 • 性别：雌雄各半，也有例外，如，致 畸试验的剂量准备，只作雌性动物 LD50。 • 年龄：刚成年，未曾受孕、交配
常用方法：完全随机和随机区组
PPT学习交流
20
完全随机设计
将实验动物编号，从随机数字表上任意横行或 纵行的任意数字开始，顺序取下数字，标于每个 动物号下，然后用计划组数去除随机数字，所得 余数即为所属组别。如将２０只动物分为４组， 从随机数字表的第１１行开始，顺序取２０个数 字，用４除的余数即为组别。
PPT学习交流
21
20只动物的完全随机分配
PPT学习交流
22
完全随机分配后各组所属动物号
PPT学习交流
23
20只动物完全随机分配的结果
PPT学习交流
24
20只动物的完全随机分配
动物编号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 随即数字 54 83 80 53 90 75 53 78 93 47 72 09 54 66 95 44 68 67 67 86 除4后余数 2 3 0 1 2 3 1 2 1 3 0 1 2 2 3 0 0 3 3 2 所属组别 二 三 四 一 二 三 一 二 一 三 四 一 二 二 三 四 四 三 三 二
18
烙印法： 将铸铁号码加热后，在动物体表部位烧烙，以 破坏毛囊，留下印记。适用于大动物。
挂牌法： 用金属或塑料制成号牌，固定在动物的耳部或 系于其颈部。适用于较大动物。
PPT学习交流
19
实验动物分组
目的：减少个体差异对实验结果的影响；原则： 按统计学原则随机分组，使非处理因素最大限度地 保持一致，提高每组实验动物间的均衡性。
PPT学习交流
25
完全随机分配后各组所属动物号
组别动Βιβλιοθήκη 编号一4 7 二1 59 12 8 13 20 14
三 2 6 10 15 18 19
四 3 11 16 17
PPT学习交流
26
20只动物完全随机分配的结果
组别
动物编号
一 4 7 9 12 19
二1 三2
5 8 13 14 6 10 15 18