SOPSC049-04冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)维持液及培养液配制标准操作规程

冻干人用狂犬病疫苗（Vero细胞）维持液及培养液

配制标准操作规程

1 范围

本标准适用于车间维持液及培养液的配制。

2 职责

操作人员：严格按照该标准操作规程进行生产。

3 内容

3.1 操作前的检查

3.1.1 计量器具是否完好，性能与称量要求相符，并在检定有效期内。

3.1.2 检查水、电、气供应是否良好，纯化水及注射用水是否检验合格。

3.1.3 人员检查洁净室温度、湿度、压差是否符合要求。

3.1.4生产操作人员检查质量部门出示的尘埃粒子、沉降菌的检测报告是否符合相关规定，并在有效期内。

3.1.5 应对上一个班次的生产清场进行检查后，有QA下发的清场合格证，方可进行操作。

3.1.6检查高压灭菌柜、电子天平等设备状态标志，设备是否“完好”、“已清洁”。

3.1.7检查所需文件记录齐备，无与本批无关的指令及记录，无与本批无关的物料。

3.1.8 QA确认符合生产条件后，在批记录中签名准许生产。

3.1.9 及时填写并悬挂生产状态卡。

3.2 操作前的准备

3.2.1 设备与材料的准备

电子天平

配液罐

搅拌器

pH计

印度瓶

量筒

烧杯

3.2.2 物料的准备

199培养基

灭能小牛血清

人血白蛋白

碳酸氢钠

硫酸庆大霉素溶液

注射用水

3.3 配制过程

3.3.1 维持液配制

注射用水+199培养基+人血白蛋白+碳酸氢钠

3.3.1.1 方法一：印度瓶配制

3.3.1.1.1 将配制维持液所需的物品放在局部百级下的操作台上。

3.3.1.1.2 在火焰的保护下，用不锈钢止血钳启下原倍199培养液的瓶塞。（10倍浓缩199培养液用灭菌的注射用水稀释成原倍199培养液）

3.3.1.1.3靠近酒精灯火焰处，启下人血白蛋白的瓶塞，将人血白蛋白加入到原倍199培养液的瓶体中，摇匀。

3.3.1.1.4 靠近酒精灯火焰处。启下7.5%碳酸氢钠溶液的瓶塞，用吸管吸取7.5%碳酸氢钠溶液加入到原倍199培养液的瓶体中，用pH计测试溶液pH值应在7.6～7.8范围内。

3.3.1.1.5在火焰的保护下，将单头分液管线安装在配制完的维持液的瓶口上，轻摇印度瓶将液体混合均匀。

3.3.1.2 方法二：配液罐配制

3.3.1.2.1 配液罐注入90L注射用水（水温不超过30℃），将1袋199培养基干粉（依照所使用培养基配方进行配制）倒入配液罐中，通过搅拌器搅拌，使之充分溶解后，补加至100L。

3.3.1.2.2将人血白蛋白加入到配液罐内，通过搅拌使其充分混匀，使维持液中人血白蛋白的含量为0.1%。

3.3.1.2.3 用电子天平称取碳酸氢钠干粉，倒入配液罐内，通过搅拌器搅拌使其充分溶解，通过液位管道接取适量溶液于烧杯内，用pH计测试pH值，pH值应在7.6～7.8

范围内。

3.3.1.2.4 盖上配液罐罐口，移入无菌室待用。

3.3.2 培养液配制

注射用水+199培养基+灭能小牛血清+碳酸氢钠+硫酸庆大霉素

3.3.2.1 方法一：印度瓶配制

3.3.2.1.1 将配制培养液所需的物品放在局部百级下的操作台上。

3.3.2.1.2 在火焰的保护下，用不锈钢止血钳启下原倍199培养液的瓶塞。（转瓶用10倍浓缩199培养液用灭菌的注射用水稀释成原倍199培养液）

3.3.2.1.3 启下灭能小牛血清的瓶塞，将灭能小牛血清加入到原倍 199培养液的瓶体中，摇匀。

3.3.2.1.4 靠近酒精灯火焰处，启下7.5%碳酸氢钠溶液的瓶塞，用吸管吸取7.5%碳酸氢钠加入到原倍199培养液的瓶体中，用pH计测试溶液pH值应在7.2～7.4范围内。

3.3.2.1.5 靠近酒精灯火焰处，用吸管吸取硫酸庆大霉素溶液加入到原倍199培养液的瓶体中使其终浓度为100单位/ml。

3.3.2.1.6 盖好胶塞，封口待用。

3.3.2.2 方法二：配液罐配制

3.3.2.2.1 配液罐注入90L注射用水（水温不超过30℃），将1袋199培养基干粉（依照所使用培养基配方进行配制）倒入配液罐中，通过搅拌器搅拌，使之充分溶解后，补加至100L。

3.3.2.2.2 将灭能小牛血清加入到配液罐内，通过搅拌使其充分混匀，培养液的灭能小牛血清的含量为7%。

3.3.2.2.3 用电子天平称取碳酸氢钠干粉，倒入配液罐内，通过搅拌器搅拌使其充分溶解，通过液位管道接取适量溶液于烧杯内，用pH计测试pH值，pH值应在7.2～7.4范围内。

3.3.2.2.4用量筒量取硫酸庆大霉素溶液加入配液罐内，使其终浓度为100单位/ml。

3.3.2.2.5 盖上配液罐罐口，移入无菌室待用。