(新)高中生物1.1DNA重组技术的基本工具导学案2无解答新人教版选修3
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DNA重组技术的基本工具
学习目标:
1.简述基因工程基本操作程序的四个步骤。
2.说出目的基因的获得、运载体的构建、目的基因的导入与检测等常用的方法及其基本原理。
学习重点:基因购买您构成基本操作程序的四个步骤。
学习难点:(1)从基因文库中获取目的基因。
(2)利用PCR技术扩增目的基因。
一、目的基因的获取
1.目的基因主要是指,可以是各种性状相关的基因也可以是一些。
2.目的基因的获取途径有哪些?
(1)从中获取目的基因;
(2)利用扩增目的基因;
(3)用化学方法直接。
3.什么是基因文库?基因文库包括哪两种?
(1)基因文库:将含有某种生物的许多DNA片段,导入的群体中储存,各个分别含有这种生物的不同的基因。
(2)种类:和
文库类型cDNA文库基因组文库
文库大小
基因中启动子
基因中内含子
基因多少
物种间的基因
交流
6.怎样从基因文库中得到我们所需要的目的基因呢?
根据基因的序列、基因的功能、基因在上的位置、基因的转录产物mRNA、及基因的表达产物等的特性来获取目的基因。
7.什么是PCR技术?PCR技术的全称?目的是什么?原理是什么?特点是什么?需要哪些物质和条件?过程是怎样的?
PCR:
目的:
原理:
物质和条件:
过程:第一步:
第二步:
第三步:
PCR过程可以在中自动完成。
8.如果基因比较小,核苷酸序列又已知,可以通过用化学方法直接人工合成。
二、基因表达载体的构建(基因工程的)
1.基因表达载体构建的目的是什么?
目的:使在受体细胞中,并且可以,同时,使目的基
因能够作用。
2.一个基因表达载体的组成原件有哪些?各自有何功能?
(1)基因表达载体的组成原件:
(2):位于基因的首端,是识别和结合的部位,有了它才能
终止子:位于基因的尾端,使在所需要的地方停止下来。
:为了鉴别受体细胞中是否含有,从而将含目的基因的细胞筛选出来。
三、将目的基因导入受体细胞
1.什么是转化?
2.将目的基因导入植物细胞的方法有哪些?适用范围如何?
3. 农杆菌转化法为什么不能用于单子叶植物?
4.农杆菌感染双子叶植物和裸子植物过程是怎样的?
5.将目的基因导入动物细胞的最为有效的方法是什么?基本操作程序是什么?
6.早期基因工程都用原核生物作为受体细胞的原因是什么?
7.大肠杆菌细胞最常用的转化方法是怎样的?
首先,用处理细胞,使细胞处于一种的生理状态,这种细胞
称;第二步将重组表达载体DNA分子溶于中与混合,在一定的温度下促进吸收分子,完成转化过程。
四、目的基因的检测与鉴定(检验基因工程是否的一步)
1.为什么要对目的基因进行检测与鉴定?
2.(1)怎样检测转基因生物染色体上是否插入了目的基因?
(2)怎样检测目的基因转录出了mRNA?
(3)怎样检测目的基因是否翻译成蛋白质?
(4)以上检测都是在什么水平上的检测?检测的原理分别是什么?可不可以在个体水平上鉴定?举例说明。
五、重难点剖析
1.PCR中的DNA聚合酶和普通DNA聚合酶有何异同?
2.利用反转录法得到的目的基因有何特点?
3.为什么不把目的基因直接导入受体细胞,而是要构建表达载体?
4.目的基因与质粒结合形成重组质粒的步骤是怎样的?基因表达载体的构建都是一样的吗?
5.转基因植物的受体细胞可以是什么?转基因动物呢?为什么?
6.基因工程中,为什么目的基因能与质粒形成重组质粒?
7.目的基因为什么能在受体细胞中得到表达?
8.基因工程的四步操作中,哪些步骤涉及到了碱基互补配对?