酵母双杂交试剂及培养基的配置
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主要试剂及培养基的配置
1、40％葡萄糖：121℃灭菌15min。
2、YPDA液体培养基(1L)：
20g/L peptone
10g/L yeast extract
定容至935ml，PH调至5.8(调之前大约6.6左右)，121℃灭菌15min，
待冷却至55℃时，加入50ml 40％葡萄糖及15ml Ade。
●YPDA固体培养基另加18g/L agar。
3、－Trp－Leu液体培养基（100ml）：
0.67g 基础培养物（w/o）
0.154g －Trp－Leu
定容至95ml，PH调至5.8，121℃灭菌15min，待冷却至55℃时，
加入5ml 40％葡萄糖。
●固体培养基另加入1.2-1.5% Agar，以下同上。
注：配缺陷型培养基时，加入缺陷型氨基酸具体的量还要参考药品商标的注明，不同厂家及批次的药品加入的量不同。
4、－Trp液体培养基（100ml）：
0.67g 基础培养物（w/o）
0.154g －Trp－Leu
定容至93ml，PH调至5.8，121℃灭菌15min，待冷却至55℃时，
加入5ml 40％葡萄糖及2ml 50×Leu。
5、－Trp－Leu－His固体培养基（100ml）：
0.67g 基础培养物（w/o）
0.062g －Trp－Leu－His
1.2-1.5% Agar
定容至95ml，PH调至5.8，121℃灭菌15min，待冷却至55℃时，
加入5ml 40％葡萄糖。
6、－Trp－His固体培养基（100ml）：
0.67g 基础培养物（w/o）
0.062g －Trp－Leu－His
1.2-1.5% Agar
定容至93ml，PH调至5.8，121℃灭菌15min，待冷却至55℃时，
加入5ml 40％葡萄糖及2ml 50×Leu。
7、鲑鱼精DNA（ssDNA）：5mg/ml
8、50％PEG：需滤灭。
9、1M LiAc：
10、Z buffer：16.1g/L Na2HPO4.7H2O
5.50g/L NaH2PO4.H2O
0.75g/L KCl
0.246g/L MgSO4.7H2O
PH调至7.0，灭菌室温保存。
11、X-gal solution：用二甲基亚砜溶至20mg/ml。