蓝氏贾第鞭毛虫感染的免疫学诊断方法
《寄生虫学检验》课件——阴道毛滴虫、蓝氏贾第鞭毛虫、杜氏利什曼原虫
✓ 繁殖方式 二分裂增殖
✓ 致病阶段 滋养体
致病性
1.致病机理 （1）致病力与虫株毒力、宿主生理状况及阴道内
正常菌群有关。 （2）正常妇女的阴道自净作用: （3）当妊娠、经期、妇科疾患、绝经期等，阴道
内环境改变，pH趋于中性，利于滴虫及细菌的 侵袭及生长。
致病性
2.病理变化 阴道黏膜充血、水肿、上皮细胞变性脱落， 白细胞浸润。
（3）皮肤型黑热病，病变多为结节型。 （4）蛋白尿及血尿。 （5）肾
黑热病患者除已证明有 淀粉样变，肾小球系膜 内有免疫复合物的沉积。
（6）淋巴结 黑热病死者的淋巴结副皮
质区内，小淋巴细胞也几乎全 部丧失，并有巨噬细胞浆细胞 和大淋巴样细胞的浸润。
（7）患者常发生鼻觑和齿龈 出血。
诊断
1.病原检查 （1）穿刺物检查
流行与防治
1.分布 世界性分布，各地感染率不一，女性以20～40 岁感染率为高。 2.流行因素 ➢传染源 患者和带虫者 ➢传播方式 直接传播、间接传播 ➢抵抗力强
流行与防治
3.防治 ➢ 加强健康宣传教育,注意个人卫生、经期卫生、
公共卫生; ➢ 使用淋浴、蹲式厕所; ➢ 治疗病人和带虫者首选,口服甲硝唑，夫妻同时
治疗,局部用药滴维净。
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蓝氏贾第鞭毛虫
蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia)寄生于小肠， 胆囊，主要在十二指肠，引起腹泻等症状。
贾第虫病又称为“旅游 者腹泻”。贾第虫易合 并HIV的感染，在临床实 践中应给与高度关注。
形态
1.滋养体 外形 梨形，背面隆起 大小 9.5～14μm ×5～15μm 运动特点 直线翻滚式运动 结构 吸盘、细胞核、鞭毛、轴柱
形态
新鲜标本 虫体无色透明，似 水滴样，具折光性， 活动力强，体态多 变。
蓝氏贾第鞭毛虫病(外科)
蓝氏贾第鞭毛虫病（外科）【概述】人体感染贾第虫后，无临床症状者称带虫者。
本病主要症状是腹痛、腹泻、腹胀、呕吐、发热和厌食等，典型病人表现为以腹泻为主的吸收不良综合征，腹泻呈水样粪便，量大、恶息、无脓血。
儿童患者可由于腹泻，引起贫血等营养不良，导致生长滞缓。
若不及时治疗，多发展为慢性，表现为周期性稀便，反复发作，大便甚臭，病程可长达数年。
【诊断】㈠临床诊断：由于没有特殊的临床症状，因此没有确切的诊断方法。
可询问有无旅游腹泻症状，并观察粪便特征，有无脓血、粘液，再作进一步检查。
㈡病原学检查：病原学检查本虫滋养体和包囊是最可靠的诊断方法。
1.粪便检查：⑴生理盐水直接涂片法：在粥样或水样粪便里可查到左右翻滚、瓢形的滋养体，运动活泼。
注意粪样必须新鲜。
⑵碘液直接涂片法：取半成形或成形粪便少许与少量卢戈氏碘液混匀，作成涂片，好可镜检包囊。
⑶硫酸锌（33%）漂浮法浓集包囊：常用接种环取上浮物于载玻片上镜检，此法检出率高。
⑷汞磺醛（MIF）沉淀法浓集包囊：离心取沉淀作涂片镜检。
由于粪便中包囊时有无，故应隔日检查，连续3次以上。
2.十二批肠引流法：取十二指肠内容物，涂片镜检滋养体及包囊。
㈢免疫诊断：1.酶联免疫吸附试验（ELISA）：是诊断蓝氏贾鞭毛虫病灵敏度高、特异性强的方法。
有症状者诊断阳性率为73.5%，具有快速、操作简便等优点，仅有少数交叉反应。
不仅可以检查现症患者的抗体，对已往有过感染现已不排虫者，因其血内抗体可持续存在一段时间，因此也可检查。
2.间接血凝（IHA）：由于IHA操作简单，无须昂贵设备，是诊断蓝氏贾鞭毛虫病比较好的方法，阳性率73.4%。
3.间接荧光抗体（IFA）：优于IHA，血清阳性率为83.3%。
4.对流免疫电泳（CIF）试验：简便有效，适应于现场大规模流行病学调查。
采用患者的新鲜粪便（其中有该虫抗原）或低温保存时间较短者，检出率较高。
【治疗措施】此病较顽固，用抗生素治疗无效。
㈠灭滴灵（metronidazole）：Green(1974)报道大剂量应用，每日2g，疗程3天，疗效100%，一般可达90%以上。
蓝氏贾第鞭毛虫(CAI教学)
(二)包囊
1,外形:椭圆形 外形: 大小: 2,大小: 10～14×7.5～9μm 10～14×7.5～ 结构: 3,结构: 未成熟包囊有2 未成熟包囊有2个核 成熟包囊有4 成熟包囊有4个核 核多位于前部 轴柱和鞭毛等丝状物
二,生活史
(一)发育过程: 发育过程:
二分裂
体外
随肠内容物下移
四核包囊
(二)临床表现: 临床表现:
1.无症状带虫者: 1.无症状带虫者: 无症状带虫者 2.有症状病人: 2.有症状病人:胃肠道症状 有症状病人 胆道症状 全身症状 典型腹泻:暴发性恶臭水样泻,量大,无脓血, 典型腹泻:暴发性恶臭水样泻,量大,无脓血, 含脂肪颗粒. 含脂肪颗粒. 引起胆囊炎或胆管炎 全身性症状主要有失眠,头痛,眩晕,乏力等. 全身性症状主要有失眠,头痛,眩晕,乏力等. 慢性期表现为周期性稀便反复发作. 慢性期表现为周期性稀便反复发作) 十二指肠,胆道)
体外
(二)生活史要点: 生活史要点:
1,宿主关系:人是唯一宿主 ,宿主关系: 2,感染期及途径:四核包囊;经口 ,感染期及途径:四核包囊; 3,寄生部位:十二指肠,胆总管及胆囊 ,寄生部位:十二指肠,
三,致 病
(一)致病机制
竞争营养 机械性损伤 宿主的免疫状态 为机会致病原虫: 为机会致病原虫:免疫功能 低下或爱滋病患者, 低下或爱滋病患者,均易发 生重度感染. 生重度感染.
四,实验诊断
(一)病原诊断 1.粪便检查 2.十二指肠引流液或胆汁检查 3.肠检胶囊法 4.小肠粘膜活检法 (二)免疫诊断
五,流行和防治
易感人群:儿童,旅游者,男同性恋者, 易感人群:儿童,旅游者,男同性恋者, 胃切除病人, 胃切除病人,胃酸缺乏者等 易感季节: 易感季节:夏秋季节
蓝氏贾第鞭毛虫诊断
蓝氏贾第鞭毛虫诊断高正琴;贺争鸣;岳秉飞【摘要】Objective Giardia lamblia is an important pathogen of zoonosis giardiasis , it poses a potential threat to the quality of SPF (specific pathogen-free) laboratory animals cannot be ignored.The aim of this study is to establish the method of rapid diagnosis of Giardia lamblia, and analyze the test results of 516 batches form 17 manufactures.Methods Direct microscopy, Giemsa-fast staining and multiplex polymerase chain reaction (multiplex PCR) were applied to detect Giardia lamblia.Results Numerous of Giardia lamblia trophozoites and cysts were detected in SPF laboratory animals by using direct microscopy and Giemsa-fast staining, and multiplex PCR were performed to identify 18S rDNA,β-giardin, TPI and GDH genes of DNA extracted from these trophozoites and cysts identified Giardia lamblia.Direct microscopy, Giemsa-fast staining, and multiplex PCR methods can be used to detect Giardia lamblia.Of the 2562 SPF laboratory animals studied, 22.9%(586/2562) were positive for Giardialamblia.Conclusions Direct microscopy , Giemsa-fast staining , and multiplex PCR were effective techniques with high sensitivity and specificity for rapid diagnosis of Giardia lambliain.It is not satisfactory that the results of Giardia lamblia examination in 516 batches form 17 manufactures failed to meet the requirements 100%.%目的：蓝氏贾第鞭毛虫作为一种重要的人兽共患寄生虫病贾第虫病的病原，其对SPF实验动物质量造成的潜在威胁不容忽视。
蓝氏贾第鞭毛虫
? 甲硝咪唑（灭滴灵）内服、外用 ? 1/100乳酸水或1/5000高锰酸钾水外用 ? 中药：荚竹桃叶、猪胆汁等
– 注意检查、治疗配偶
利什曼原虫
? 生物学地位
– 属动鞭纲动基体目（Kinetoplastida)、锥虫科
（Trypansomatidae) 、利什曼属（Leishmania)
? 生活史特点
– 无鞭毛体寄生于人及犬等哺乳动物的巨噬细 胞内
– 前鞭毛体寄生于媒介宿主 ——白蛉的消化道 内
– 前鞭毛体是感染阶段 – 经白蛉叮咬吸血而感染
杜氏利什曼原虫的致病
? 发病机制
– 由于无鞭毛体的大量繁殖，使大量巨噬细胞 遭到破坏，反应性幼稚巨噬细胞增生，由此 产生一系列的病理变化
– 免疫抑制
– 组织穿刺涂片镜检无鞭毛体
? 骨髓穿刺：安全、常用，检出率85% ? 淋巴结穿刺：常用于疗效考核 ? 肝穿、脾穿：检出率高，但危险性大 ? 皮肤结节刮片：用于检查皮肤型黑热病
– 穿刺物培养： 常用N.N.N培养基
? 免疫学检查：用于疗效考核
黑热病的流行
? 世界三大流行区
– 中国、印度、地中海盆地
又称：黑热病原虫
杜氏利什曼原虫
? 寄生于人和哺乳动物内脏巨噬—单核细 胞系统
? 临床上引起 内脏利什曼病
（visceral leishmaniasis ）
又称：黑热病（kala-azar ）
杜氏利什曼原虫形态
? 无鞭毛体（利杜体）
amastigote,
Leishman-Donovan body, L.D 小体 微鞭毛体 micromastigote
? 中国流行区的划分及流行现状
– 平原型： 人源型，病犬少见，媒介为家栖性中华
蓝氏贾第鞭毛虫
本病呈世界性分布，以往在旅游者中发病率较
高，曾有“旅游者腹泻”之称。
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蓝氏贾第鞭毛虫（Giardia lamblia ）
一、形态
1
滋养体 (trophozoite)
呈纵切为半的倒置梨形，大小（9~21）µ × m （ 5~15）µ ×（ 2~4）µ m m 两侧对称，背凸腹平，腹面前半部向内凹陷成2个 吸盘 有4对鞭毛，分为前侧、后侧、腹、尾鞭毛各1对 有1对并列细胞核在吸盘底部 1对呈爪锤状的中体与轴柱1/2相交
人体寄生虫学
蓝氏贾第鞭毛虫（Giardia lamblia ）
蓝氏贾第鞭毛虫（Giardia lamblia ）
概述
一、形态
二、生活史
三、致病 四、实验诊断 五、流行与防治
蓝氏贾第鞭毛虫（Giardia lamblia ）
3
概述
蓝氏贾第鞭毛虫（Giardia lamblia ）简称贾第虫。
寄生于人体小肠（主要为十二指肠），偶可寄
17
虫体的细胞核被荧光染料染成蓝色（间接荧光抗体试验）
蓝氏贾第鞭毛虫（Giardia lamblia ）
五、流行与防治
1
流行与分布
贾第虫病呈全球性分布，据WHO估计全世界感染率为1%~20% 左 右。不仅多见于发展中国家，发达国家也有不同程度流行。我国分布也 很广泛，各地感染率不等，农村高于城市，儿童高于成人，夏秋季节发 病率较高。Байду номын сангаас
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蓝氏贾第鞭毛虫（Giardia lamblia ）
一、形态
1
滋养体 (trophozoite)
6
贾第虫病的诊断提示及治疗措施
贾第虫病的诊断提示及治疗措施
贾第虫病(giardiasis)是由蓝氏贾第鞭毛虫引起的肠道寄生虫病。
临床上以无症状排包囊者为多，部分可有肠道症状。
【诊断提示】
1流行病学有不洁饮食史，或与患者和原虫包囊携带者有密切接触史。
2.临床表现潜伏期7~14d o根据病情可分急性、亚急性和慢性。
急性起病者，主要表现为暴发性腹泻、水样或糊状脂肪便、有恶臭、上腹饱胀、纳差、腹痛。
鞭毛虫大量寄生在阑尾，可有急性阑尾炎表现，侵及胆管，可有胆囊炎、黄疸及肝大表现。
儿童患者生长滞缓、营养不良、贫血。
3.实验室检查粪便及十二指肠引流液中可查到鞭毛虫滋养体和包囊，血清鞭毛虫抗体阳性。
【治疗措施】
(1)甲硝嗖0.2〜0.4g,儿童酌减，3次/d服，连用5〜7d0吠喃嗖酮(痢特灵)0.1g,儿童5mg∕(kg∙d),3次/d,连服IOdo 氯喳0.25g,3次/d,儿童7〜IO1ng/(kg∙d),分3次服，连用5〜7d。
替硝嘎:成人2g,儿童50〜60mg∕(kg∙d),1次/d。
(2)对症治疗。
蓝氏贾第鞭毛虫
腹面前半部向内凹陷成2个吸盘 有4对鞭毛，分为前侧、后侧、腹、尾鞭毛 有1对并列细胞核在吸盘底部 1对羊角状的中体与轴柱1/2相交
蓝氏贾第鞭毛虫（Giardia lamblia ）
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一、形态
1
滋养体 (trophozoite)
5
三色染色
瑞氏染色
铁苏木素染色
二、生活史 生活史要点
繁殖阶段： 滋养体，二分裂法繁殖
感染期： 四核包囊 寄生部位： 主要寄生在十二指肠内，借吸盘吸附肠壁
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感染途径与方式：经口，误食被包囊污染的食物和饮水
蓝氏贾第鞭毛虫（Giardia lamblia ）
三、致 病 性
（一）致病机制 1、吸盘的吸附 2、虫体分泌与代谢产物的化学性刺激 损坏
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蓝氏贾第鞭毛虫（Giardia lamblia ）
蓝氏贾第鞭毛虫（Giardia lamblia ）
蓝氏贾第鞭毛虫（Giardia lamblia ）
四、实验诊断
（二）免疫学检查
ELISA
间接荧光抗体试验
17
虫体的细胞核被荧光染料染成蓝色（间接荧光抗体试验）
蓝氏贾第鞭毛虫（Giardia lamblia ）
五、流行与防治
1
流行与分布
贾第虫病呈世界性分布，据WHO估计全世界感染率为 1%~20% 左右。不仅多见于发展中国家，发达国家也有不同 程度流行。我国分布也很广泛，各地感染率不等，农村高于 城市，儿童高于成人，夏秋季节发病率较高。
滋养体吸附在小肠黏膜
上皮细胞的微绒毛
影响 小肠的吸收功能（尤其是对可溶性脂肪性物质吸收）
蓝氏贾第鞭毛虫（Giardia lamblia ）
蓝氏贾第鞭毛虫
(Giardia lamblia; Giardia intestinalis, 贾第虫)
寄生于十二指肠和小肠上段，引起肠道感染 全球性分布，易引起爆发流行，旅游者人群发病率高，引 起“旅游者腹泻”
滋养体（trophozoite）
包囊（cyst）
生活史
四核包囊（经口） 十二指肠/小肠上段逸出滋养体 吸附肠粘膜二分裂增殖 形成包囊随粪便排出
Байду номын сангаас
临床表现
以腹泻为主的营养不良综合征，腹泻为恶臭水样便，量大，无脓 血。伴有腹痛，上腹不适等症状。
病原学诊断 粪便检查包囊/滋养体：
生理盐水涂片法 碘液染色法
未染色包囊
碘液染色显示包囊和滋养体
流行与防治
• 传染源：治疗药物 甲硝唑、巴龙霉素 • 传播途径：水源，粪-口，动物源性 • 易感人群：旅游者、免疫力低下人群
/parasites/giardia/pathogen.html
致病机制 致病与虫株致病力和宿主免疫力都有关系，但主要还是由于虫体吸 附肠壁，造成肠内容物与肠壁机械阻隔，营养竞争
肠绒毛萎缩、变短
吸附于肠壁上的滋养体
一次腹泻粪便中滋养体可有 100亿个；
一次正常粪便中可有包囊9 亿个
蓝氏贾第鞭毛虫
生活史图解
下移 滋养体 包囊随成形便排出
污染食物、水 四核包囊
经口 十二指肠 结肠
4～9亿个/次
随稀便排出
腹泻
140亿个/次
生活史小结
寄生部位：小肠及胆囊 感染期：四核包囊（成熟包囊） 感染途径与方式：食入四核包囊污染的食物 和水等，经口感染。 保虫宿主：家畜，野生动物
三、致病 1.致病机制
十二 指肠 引流
肠 检 胶 囊 法
（二）免疫学检查：ELISA /IFA /CIE 有较高敏感和特异性
ELISA
（三）分子生物学方法：
IFA
CIE
用生物素标记的贾第虫滋养体全基因组DNA或用放射性物质标 记的DNA片段制成的DNA探针，有较高敏感和特异性。
五、流行
1.分布：
全球性分布，感染率1～20％。儿童高于成人，并有家庭聚
碘液染色： 黄绿色， 核常偏于虫体一端， 未成熟包囊2个核， 成熟包囊4个核， 囊内可见鞭毛、轴柱 等结构。
铁苏木素染色
囊壁不着色，细胞核中有核仁， 无染色质粒，丝状物染成黑色， 并有弯曲的中体
二、生活史
• 滋养体为营养繁殖阶段， • 包囊为传播阶段。 • 滋养体寄生人体小肠，主要在十二指肠,也 可寄生于胆囊。滋养体以二分裂法进行繁 殖，外界环境不利时，滋养体分泌囊壁形 成包囊随宿主粪便排出体外 。
• 旅游者、胃酸缺乏者、儿童、年老体弱者 及免疫缺陷者尤其易感染。
六、防治
• 加强粪便管理，防止水源污染。 • 搞好饮食卫生和个人卫生。 • 治疗药物： 甲硝唑（灭滴灵） 呋喃唑酮（痢特灵） 替硝唑 巴龙霉素
寄生部位、感染期、 感染途径、感染方式 致病机制
丙种球 蛋白缺乏
导致小肠粘膜病变加重，致腹泻的主要 原因。
检验类之临床医学检验技术(师)考试专项刷题训练
检验类之临床医学检验技术（师）考试专项刷题训练1、放射免疫技术的优点不包括A.灵敏度高B.特异性强C.重复性好D.无污染E.样品及试剂用量小正确答案：D2、配制瑞氏染料时用来溶解伊红、亚甲蓝的溶剂是A.联苯胺B.乙醇C.二甲苯D.甲醇E.乙醚正确答案：D3、免疫印迹技术属于A.双向免疫扩散B.对流免疫电泳C.固相免疫电泳D.膜载体酶免疫技术E.荧光免疫技术正确答案：D4、患者男，发热，左下肢皮肤有痈，为明确诊断是否为金黄色葡萄球菌感染，可进行（）。
A.Coombs试验B.协同凝集试验C.玻片凝集试验D.试管凝集反应E.自身红细胞凝集试验正确答案：B5、免疫学技术中的亲和层析法，利用抗原抗体反应哪个特点来纯化抗原或抗体A.比例性B.特异性C.可逆性D.亲和力E.疏水作用力正确答案：C6、怀疑某人有蓝氏贾第鞭毛虫感染时，确诊方法为A.痰液找虫卵B.肛门周围查成虫C.粪便中查包囊或滋养体D.粪便中查卵囊或滋养体E.尿液查滋养体正确答案：C7、当患者已诊断为红白血病时，骨髓巨核细胞极度增生，全片达1100个，其中幼稚型巨核细胞占10％，病态巨核细胞占30％，应考虑的诊断为A.急性巨核细胞白血病B.全髓白血病C.骨髓增生异常综合征D.急性混合细胞白血病E.红白血病的白血病期正确答案：B8、（）患者男，50岁，3年前诊断为萎缩性胃炎。
近一个月头晕、乏力、心慌加重。
血常规检查结果：血红蛋白58g/L，红细胞1.6×1012/L，MCV120fl，MCH35pg，MCHC340g/L，白细胞3.3×109/L，PLT70×109/L，网织红细胞0.1%。
A.异型红细胞增多B.可见巨红细胞C.可见点彩红细胞D.网织红细胞绝对数增多E.可见有核红细胞正确答案：D9、三羧酸循环中底物水平磷酸化的反应是A.柠檬酸→α-同戊二酸B.琥珀酰CoA→琥珀酸C.琥珀酸→延胡索酸D.延胡索酸→苹果酸E.苹果酸→草酰乙酸正确答案：B10、精液标本送检时间不能超过A.30分钟B.60分钟C.2小时D.3小时E.24小时正确答案：B11、多毛细胞白血病是一种少见的慢性( )增殖性疾病A.中性粒细胞B.淋巴细胞C.浆细胞D.幼红细胞E.单核细胞正确答案：B12、患者，男性，15岁。
蓝氏贾第鞭毛虫病的病因治疗与预防
蓝氏贾第鞭毛虫病的病因治疗与预防现在通常被称为蓝氏贾第鞭毛病（giardiasis），是蓝氏贾第鞭毛虫（giardialambila）寄生在人类小肠中的原虫性疾病。
临床上以腹泻、腹痛、腹胀为主要表现，可引起胆囊炎、胆管炎和肝损伤。
除了当地的流行外，这种疾病还会导致水源性的爆发性流行。
感染在游客中也很常见。
近年来，艾滋病患者经常可以结合这种昆虫感染。
感染动物（狗、猫、水、啮齿动物）的粪便可以发现这种原始昆虫。
饮用未消毒的地表水（池塘、湖泊、溪流）会增加感染的风险。
整个感染期都是传染性的。
它会再次被感染。
蓝色贾鞭毛虫病可发生水、电解质紊乱、贫血、营养不良、生长缓慢等。
也可继发性乳糖不耐受和维生素缺乏。
蓝色贾鞭毛虫病患者应根据肠道传染病隔离，控制饮食。
抗生素应与细菌感染相结合。
确诊患者和高度怀疑患者应给予抗病原体药物治疗。
蓝色贾鞭毛虫病一般通过药物治愈，预后良好。
每个年龄组都可以感染，尤其是儿童和中年轻人。
蓝氏贾第鞭毛虫分类学属于肉足鞭毛门，动鞭毛纲，六鞭虫科，双滴虫目，贾第属。
该属下除有寄生在人体的蓝氏贾第鞭毛虫（mblia）此外，还有各种贾第鞭毛虫寄生在哺乳动物、鸟类和两栖动物中，如牛贾第虫（G.bovis）、马贾第虫（G.egui）、鼠贾第虫（G.muris）等等。
滋养体寄生在小肠，尤其是十二指肠，胆囊、肝脏、胰腺等。
当昆虫寄生在胆道系统中时，可能会引起胆囊炎或胆管炎。
如上腹痛、食欲不振、肝肿大、脂肪代谢紊乱等。
一般认为，蓝氏贾第鞭毛虫病的发病率与昆虫毒性、身体免疫和共生内环境有关。
营养物质通过吸盘吸附在肠粘膜表面，导致机械刺激和损伤，导致粘膜炎症。
当昆虫大量繁殖时，它们可以覆盖大量的肠粘膜，影响脂肪和脂溶性维生素的吸收。
昆虫还与宿主竞争，以及肠道菌群的变化，这可能会导致不同程度的肠功能障碍。
昆虫可引起小肠微绒毛病变，导致乳糖酶、木糖酶等双糖酶缺乏，导致腹胀和乳糖耐受性差。
蓝氏贾第鞭毛虫病的潜伏期一般为1~3周，平均为9~15天。
第三十章 第三节 蓝氏贾第鞭毛虫
第三十章 原虫学
大连医科大学 崔昱
第三节 蓝氏贾第鞭毛虫
重点难点
1.掌握蓝氏贾第鞭毛虫的形态、生活史特点。 2.了解蓝氏贾第鞭毛虫致病机制、病原学诊断方法和流
行因素以及防治原则。
一、形态 二、生活史 三、致病 四、实验诊断 五、流行与防治
目录
概述
• 蓝氏贾第鞭毛虫（Giardia lamblia Stiles，1915）简称 贾第虫，寄生于人体小肠和胆囊，引起贾第虫病 （giardiasis）。该患者临床典型症状为暴发性腹泻和 消化不良。本病感染者多见于儿童和旅游者，故有 “旅游者腹泻”之称。
四、诊断
（一）病原诊断
1.粪便检查 • 生理盐水涂片，镜下查活动的滋养体。对成形粪便，
可采用碘染法或醛醚浓集法查包囊。由于包囊形成有 间歇性，故检查应隔日1次连续3次以上为宜。 2.十二指肠液或胆汁检查 • 粪检多次阴性，临床上又不能完全排除此虫感染。
3.肠检胶囊法 • 装有尼龙线的胶囊，线的游离端留于口外，胶囊溶解
3.预防本病的主要措施是加强粪便管理，保护好水源，注 意个人卫生和饮食卫生，消灭苍蝇、蟑螂等。
思考题
1.蓝氏贾第鞭毛虫生活史要点是什么？ 2.蓝氏贾第鞭毛虫患者主要临床表现是什么？ 3.蓝氏贾第鞭毛虫实验室病原学诊断方法是什么？
分裂中的蓝氏贾第虫滋养体
电镜扫描照片 吸附于小肠黏膜的滋养体
（二）包囊
1.外形：椭圆形 2.大小：(10～14) μm×(7.5～ 9)μm 3.虫囊结构 • 囊壁较厚，虫体与囊壁之
间有透明间隙，未成熟包 囊有2个核，成熟后有4个 核，多偏于一侧。
碘染色
铁苏木素染色
未染色
蓝氏贾第鞭毛虫包囊
学习_蓝氏贾第鞭毛虫
贾第虫滋养体 --鞭毛运动
• 滋养体依靠鞭毛摆动，做活泼的翻滚 运动
滋养体--铁苏木素染色
滋养体--瑞氏染色
滋养体特殊染色
2．包囊 Cysts
• 椭圆形 • 大小为10～14×7～
10µm • 囊壁较厚，囊壁与虫
体间有明显空隙 • 未成熟包囊2个核，成
熟包囊4个核，多偏于 一端
包囊（电镜图）
• 儿童患者可由于腹泻、脂肪泻，引起贫血 等营养不良，导致生长滞缓。
• 虫体寄生在胆道系统，可能引起胆囊炎或
四、诊断
• 1．病原诊断 • ⑴ 粪便检查： • 水样稀便：生理盐水涂片法查滋养体。 • 成形粪便：碘液染色涂片检查包囊。 • 由于包囊形成有间歇的特点，故检查
时以隔天粪检并连续3次以上为为宜。
蓝氏贾第鞭毛虫
Giardia lamblia
前言
• 蓝氏贾第鞭毛虫（Giardia lamblia ） 简称贾第虫。
• 寄生人体小肠、胆囊，主要在十二 指肠，可引起腹痛、腹泻和吸收不 良等症状，致贾第虫病 （giardiasis）。
• 本病世界性分布，由于在旅游者中
一、形态
• 生活史有两个不同发育阶段：
习题
• 2. 用十二指肠引流法可检查： • A、溶组织内阿米巴 • B、布氏姜片吸虫卵 • C、蓝氏贾第鞭毛虫 • D、血吸虫卵 • E、钩虫卵
• 1 滋养体：致病阶段
• 2 包囊：感染阶段
1 滋养体
• 呈半个倒置梨形，9～ 21µm×
•
5～15µm × 2～
4µm
• 两侧对称，背凸腹平，腹面 前半部向内凹陷成吸盘。
• 鞭毛4对，分为前、后侧、 腹、尾鞭毛各1对
• 细胞核1对，并列在吸盘底 部
贾第虫病免疫学诊断方法研究进展
可检 出阳性 ； 而直 接涂 片 法 检测 到 冷藏 粪样 中贾 第 虫包囊 的 阳性 率为 ５ ， ６ 检测 到 冰冻粪 样 中 的贾 第 虫包囊 的 阳性 率 为 ９ ６ 检 测保 存 超 过 ２ ｎ粪 样 ３／， ９ ４Ｉ 中的贾第 虫包囊 为 阴性“ 。 １３ 免 疫磁性 分 离 法～ 接荧 光 抗体 测定 法 （ＭＳ ． 间 １ —
Ｉ Ａ） １ ９ 年 美 国开始 采 用 免 疫 磁分 离 法 （Ｓ Ｆ ９６ ＩＭ）
识 。贾第虫分 为 三大 类 ， 中的蓝 氏贾第 鞭 毛 虫 其 （ ．１ｍ ｌ ， Ｇ ａ ｂｉ 简称 贾 第 虫 ） 要 寄 生 于人 和 哺 乳 动 ａ 主
物 的小肠 ， 引起 以腹 痛 、 泻 、 收不 良为 临床 表 可 腹 吸
现 的贾第虫病 （ ｉｒｉｓ ）Ｃ３。贾第 虫 是机会 性 致 ｇａｄｏｉ ２３ ｓ －
病 寄生原虫 ， 呈世界性 分布 ， 发达 国家和 发展 中国家 均有 广泛流行 Ｈ 。贾第虫 病除 地方性 流行 、 暴发 外 ，
对贾第 虫进行检 测 ， 出单 独检测 贾第虫 的 １ ２ 提 ６ ３方 法， 这是 目前 国际 上 最 为常 用 的标 准 检测 方法 。其 原理是 利用带有 贾第 虫抗 体的磁 珠能专一 的与贾 第
中 图分 类 号 ： ５ １ ７ 文 献 标 识 码 ： Ｒ３ ． Ａ
贾 第 虫 （ ｉｒ ｉ ）由列 文 ・虎 克 （ ｅｕ ｎ Ｇａｄａ Ｌ ｅ ｗｅ Ｈｏ ｋ 于 １８ 年 发现 ， 为重 要 的人 畜共患 病病 原 ｅ） ６１ 作 体， 致病性 自 ２ 其 ０世 纪 ７ ０年 代 以来 才 逐 步 被 认
步骤ｎ 。”。Ｓ ｕ ａ等ｎ ｏｚ 首 次 报 道 了 Ｉ － Ａ 检 测 ＭＳＩ Ｆ
贾第虫病分子生物学诊断方法及其应用
２ 实 时 荧 光 定 量 Ｐ Ｒ Ｒ ａ—ｉｅ Ｐ Ｒ Ｃ （ｅｌ ｍ Ｃ ） ｔ
种 以腹 泻 为主要 症 状 的 肠 道疾 病 ， 也有 人称 蓝 氏鞭
毛虫病 （ ｍｂｉｓ ） 因贾 第 虫 病 曾在 国 际 旅 游 者 １ ｌ ｉ 。 ａ ａｓ
有 活性 的包 囊 ， 由于 Ｒ Ｐ Ｒ依 赖 于 ｍＲ Ｔ— Ｃ ＮＡ 的 完 整性 ， ｍＲ 而 ＮＡ 的 半 衰 期 通 常 较 短 ， 因此 完 整 的
ｍＲＮＡ 即 可 证 实 活 性 包 囊 的 存 在 。 应 用 ＲＴ Ｐ Ｒ —Ｃ
或延 误 了本 病 的治疗 ， 因此快 速 、 确诊 断对 本病 的 准 治疗 和 监控 起着 十 分 重 要 的作 用 ， 文就 贾 第 虫 病 本
第 虫包 囊 的粪便 标本 检测 ，０ １２份 阳性 ， 异 性 达 到 特
９ ． ； ８ １ 对贾 第 虫抗 原 阳性 的粪 便 标 本 进 行 检 测亦 呈 阳性 ］ ｉｚ等应 用 探 针 法荧 光 定 量 Ｐ Ｒ技 术 。Ｂ ｎ Ｃ 能够 检测 出 ０ ８个 贾 第 虫 滋养 体 ， 有 较 高 的特 异 ． 具 性 和敏 感性 。 ３ 反 转 录 Ｐ Ｒ（ Ｔ Ｐ Ｒ） Ｃ Ｒ ．Ｃ
的分子 生物 学诊 断方 法及 其应 用加 以综 述 。
１ 多聚酶 链反 应 （ Ｃ ） Ｐ Ｒ
对 贾 第 虫 进 行 鉴 定 和 基 因 分 型 的靶 基 因主 要
有 ： 亚单 位 ｒ ＮＡ 基 因 （ Ｓ ｒ 小 Ｒ Ｓ Ｕ—ＲＮＡ ） Ｂ 第 素基 、贾
因 （一ｉｒｉ） 谷 氨酸 脱 氢 酶 基 因 （ ｄ ）、一 Ｊｇａｄｎ 、 ３ ｇ ｈ 延伸 因 子 １基 因 （ ｆ１ 、 酸 丙 糖 异 构 酶 基 因 （ｐ） ｅ ）磷 一 ｔｉ 等 。 Ｒ ｂ ｃａ 应用 Ｐ Ｒ方法 检测 贾第 虫 小 亚单 位 ｒ ｅ ｅｃ 等 Ｃ Ｄ— ＮＡ基 因 和传统 的检 测方 法 对曼 谷 ２ ４份 人 粪便 和 ０ ２ ９份 犬粪 便进 行检 测 比较 ， 果 显 示 Ｐ Ｒ 方 法具 ２ 结 Ｃ
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Abstract
Giardia lamblia infection causes diahrea in human beings and other mammalians, and it is attracting more and more attention in recent years. In this article, we reviewed immunological methods for the diagnosis of Giardia lamblia infection, compared the advantages and disadvantages of several diagnostic approaches, and briefly introduced some commercial kits, which would bring lots of conveniences to clinical diagnosis, therapy, and prognosis of Giardiasis.
关键词: 蓝氏贾第鞭毛虫; 免疫学诊断; 感染
卫茹, 田喜凤, 阎静波, 杨志宏. 蓝氏贾第鞭毛虫感染的免疫学 诊断方法. 世界华人消化杂志 2006;14(36):3487-3492
■背景资料
Immunological diagnosis of Giardia lamblia infection
Ru Wei, Xi-Feng Tian, Jing-Bo Yan, Zhi-Hong Yang Ru Wei, Xi-Feng Tian, Zhi-Hong Yang, Division of Pathogenic Biology, Department of Biological Science, North China Coal Medical College, Tangshan 063000, Hebei Province, China Jing-Bo Yan, Division of Pathology, Department of Basic Medicine, North China Coal Medical College, Tangshan 063000, Hebei Province, China Supported by National Natural Science Foundation of China, No. 30670224 Correspondence to: Xi-Feng Tian, Division of Pathogenic Biology, Department of Biological Science, North China Coal Medical College, Tangshan 063000, Hebei Province, China. jean1957@ Received: 2006-09-08 Accepted: 2006-09-28
/1009-3079/14/3487.asp
蓝氏贾第鞭毛虫 寄生于人和哺乳 动物的小肠 , 引 起以腹泻为主要 症状的贾第虫病 (giardiasis), 贾第 虫病呈世界性分 布 , 是最常见的 胃肠道寄生虫. 贾第虫病的诊断 主要是通过粪便 检查 , 免疫学诊 断方法为贾第虫 病的流行病学调 查、疗效考核、 感染源的筛查提 供了捷径.
[18-20] [15]
.
1.1.1 斑点-ELISA (DOT ELISA) 以硝酸纤维素 (NC)多孔簿膜作为固相载体, 预先将贾第虫抗体 点涂于NC膜上, 以吸附粪便样本中的抗原, 阳性 反应在NC膜上呈现有色斑点, 阴性对照为无色. Rashid et al 用DOT-ELISA法检测200名1-13岁的 埃及患儿(主要是腹痛、 腹泻、 食欲减退、 体 重减轻和维生素缺乏等相关症状), 其阳性率为 24.5%、敏感性为100%、特异性为93.8% 且可保留结果以利复查, 适于现场调查. 1.1.2 双抗体夹心法-ELISA (double antibody sandwich ELISA) 应用色谱仪纯化抗溶组织阿米 巴、贾第虫、隐孢子虫的抗血清, 检测埃及90名 患者粪便样本中相应的抗原 . 40 名年龄相近的 对照组中, 20名是其他寄生虫的感染者(阳性对 照组), 另20名为无肠道寄生虫感染者(阴性对照 组). 该法检测溶组织阿米巴和贾第虫感染的阳 性率为 100%, 隐孢子虫感染的阳性率为 96.6%, 检测溶组织阿米巴、贾第虫、隐孢子虫粪抗 原的假阳性例数分别为 5(87.5%) 、 3(92.5%) 、 2(95%) . 粪抗原的平均值水平随感染的症状加 重而增加, 而与年龄无明显相关性 . 1.1.3 抗原捕获法 -E L I S A (a n t i g e n-c a p t u r e ELISA) 贾第虫的病原学诊断是在显微镜下查
.
用哥伦比亚贾第虫病患者粪
便中的包囊 ( 包囊经蔗糖梯度离心法提纯 ) 和感 染贾第虫的长爪沙鼠体内的滋养体, 接种家兔以 获得不同阶段的抗贾第虫IgG抗体(经正辛酸和 硫酸铵沉淀法纯化)用于检测患者粪便中的抗原. 该法捕获贾第虫抗原最适多克隆抗体浓度为40 克/毫升, 最适的稀释倍比浓度为1∶100, 消光值 (OD)为0.24[16-17]. 对196份患者粪便样本的寄生虫 学检验, 69份粪便样本中查到了贾第虫包囊, 56 份粪便样本中未见贾第虫包囊 , 71 份粪便样本 中可见其他寄生虫, 其敏感性为100%(95% CI: 93.4-100%);特异性为95% (95% CI: 88.6-97.6%); 阳性预测(价)值为91% (95% CI: 81.4-95.9%);阴 性预测(价)值为100% (95% CI: 96.1-100%) . 故 认为ELISA法可提高诊断贾第虫的阳性率, 并且 可用于贾第虫治疗后的随访
异性为91.67%(Ali et al , 2003)[12]. 该检测法与患 者粪便中包囊的计数、粪便的性状 ( 血便、黏 液便、脂肪泻)及年龄无显著的相关性, 却与恶 心、 腹胀、 腹痛、 腹泻 、食欲减退、 体重减 轻、乏力 ( 除外呕吐及便秘 ) 等消化道症状呈正 相关, 贾第虫包囊在稀质粪便中计数较高 Nakaya et al
通讯作者�� : 田喜凤, 063000, 河北省唐山市, 华北煤炭医学院生 物科学系病原生物学学科. jean1957@ 电话: 0315-3726332 收稿日期: 2006-09-08 接受日期: 2006-09-28
物腹泻. 近年来, 贾第虫病的严重性和危害性 日益受到重视 . 本文对蓝氏贾第鞭毛虫感染 的免疫学诊断方法研究进行了综述 , 比较了 各种方法的优缺点 , 简要介绍了一些商品化 试剂盒的使用情况 . 贾第虫病免疫学诊断方 法的应用 , 对贾第虫病的临床诊断 、 治疗 、 预后将带来极大的方便.
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wcjd@
世界华人消化杂志 2006年12月28日; 14(36): 3487-3492 ISSN 1009-3079 CN 14-1260/R
文献综述 REVIEW
蓝氏贾第鞭毛虫感染的免疫学诊断方法宏, 华北煤炭医学院生物科学系病原生 物学学科 河北省唐山市 063000 阎静波, 华北煤炭医学院基础系病理学学科 河北省唐山市 063000 国家自然科学基金资助课题, No. 30670224
Key Words: Immunological diagnosis; Giardia lamblia ; Infection
Wei R, Tian XF, Yan JB, Yang ZH. Immunological diagnosis of Giardia lamblia infection. Shijie Huaren Xiaohua Zazhi 2006;14(36):3487-3492
[15] [13-14]
到贾第虫的包囊或滋养体 , 此法费时费力 , 而 且对操作人员的技术要求也较高, 容易漏检[24]. Jelinek et al [25]分别用显微镜(铁苏木素染色和 SAF浮聚法)和ELISA试剂盒检测795名德国慕尼 黑患者的粪便样本, 以便了解海外旅游者中贾第 虫病的患病率 , 其中 74 位患者确诊为贾第虫感 染. ELISA试剂盒(95.5%)较显微镜检查(81.8%) 更具敏感性, 其特异性为99.7%. 因此, 抗原捕获 法-ELISA试剂盒对于贾第虫感染的一次粪便样 本的阳性诊断率较高 , 而在一次粪便显微镜检 查结果阴性时并不能排除贾第虫感染的可能性, 故增加粪便显微镜检查的次数(至少3次)方可提 高阳性诊断率[26]. 但是, 由于ELISA试剂盒不能 检测出潜在病原体 , 因此他并不能取代寄生虫 显微镜检法. 1.2 检测抗体 1.2.1 IgG 检测血清中的特异性IgG抗体可作为 辅助诊断方法[27]. 用ELISA法和间接免疫荧光抗 体法检测巴西日托中心147名0-6岁年龄组的儿 童的滤纸血样和每名儿童的三份粪便样本 ( 每 份粪便样本独立包装 , 并经自然沉淀法和硫酸 锌漂浮法处理 ), 其中 , 93 名儿童的粪便样本查 到贾第虫包囊. ELISA法在100(68%)份血清样本 中测得抗贾第虫IgG抗体(其中粪检阳性病例为 67, 粪检阴性病例为33), 间接免疫荧光抗体法在 93(63.3%)份血清样本中测得抗贾第虫IgG抗体 ( 其中粪检阳性病例为 76, 粪检阴性病例为 17). ELISA法和间接荧光抗体法检测贾第虫抗体的 敏感性分别为72%和82%, 而间接荧光抗体法的 特异性(70%)强于ELISA法(39%). 对于三份粪检 贾第虫包囊均阴性的儿童 , ELISA 法有一定的 假阳性率[28]. 在贾第虫病的流行区内, 对于那些 无临床表现的大部分患者 , 间接荧光抗体法的 检出率较ELISA法高, 与显微镜检结果相符, 与 十二指肠引流液检查的符合率可达100%, 此法 一般只适用于个例的诊断, 不能替代病原检查; 而ELISA法一般只作为临床辅助诊断, 更适宜于 流行病学调查[29]. 1.2.2 IgA 应用ELISA法检测患者唾液内特异性 抗贾第虫IgA抗体也可作为一种诊断贾第虫感染 的筛选方法[30-32]. 对36名以腹泻为主要症状的埃 及患者粪便样本同时进行直接涂片检查和十二 指肠引流液检查, 其中94.4%粪检贾第虫阳性患 者的唾液内可测得特异性的抗贾第虫IgA抗体, 33.3%粪检贾第虫阴性患者的唾液内可测得特异 性的抗贾第虫IgA抗体. 十二指肠引流液检查为