三黄片中黄芩苷和盐酸小檗碱的含量测定

三黄片中黄芩苷和盐酸小檗碱的含量测

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【摘要】目的：观察高效液相色谱法(HPLC)测定三黄片中黄芩苷和盐酸小檗碱的含量。方法：采用HPLC法对方中黄芩苷和盐酸小檗碱同时测定。结果：采用波长265nm可同时测定两种组分。结论：本法测定结果准确，操作简便。

【关键词】 HPLC法 @三黄片黄芩苷盐酸小檗碱

三黄片中含有大黄、盐酸小檗碱、黄芩浸膏等成分。黄芩苷、盐酸小檗碱是处方中起主要药理作用的成分，药典标准中对黄芩苷和盐酸小檗碱只作了定性鉴别。我们用HPLC法同时测定了三黄片中黄芩苷和盐酸小檗碱的含量，方法准确、简便，可用于本品质量控制。

1 仪器与试剂

HP1100高效液相色谱仪(美国)，SB5200超声振荡器，TU1200紫外分光光度计；黄芩苷对照品和盐酸小檗碱对照品均由中国药品生物制品检定所提供；三黄片(河南三门峡门第三制药厂)；甲醇、乙腈为色谱纯，其它试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件大连依利特产Hypersil C18色谱柱，4.6mm×150mm,5μm；流动相：甲醇乙腈0.025mol/L磷酸溶液(用三乙胺调节PH

3.0±0.1)=25：20：55，流速0.8ml/min；紫外检测波长为265nm；柱温35℃。

2.2 供试品溶液及对照品溶液的制备供试品溶液的制备：取本品20片，除去包衣，精密称定，研细，精密称取1.8g，置100ml量瓶中，加50%甲醇适量，超声处理25min，用50%的甲醇稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。对照品溶液的制备：精密称取黄芩甙和盐酸小檗碱对照品适量，用50%的甲醇溶解并定容，制成含黄芩甙130μg/ml，盐酸小檗碱32μg/ml的混合对照品溶液。

2.3 线性关系的考察分别精密量取对照溶液5，10，15，20，25μl过样，以进样量X(μg)为横坐标，以对照品峰面积积分值Y为纵坐标绘制标准曲线。得回归系数：黄芩苷y=449.99x+251

3.78,r=0.993，线性范围：0.65-3.27μg；盐酸小檗碱y=11

4.18x+5354.55,r=0.996，线性范围：0.16-0.81μg。

2.4 精密度试验精密量取对照品溶液10μl注入色谱仪，重复测定5次，黄芩苷和盐酸小檗碱对照品溶液的峰面积积分值的RSD分别为1.2%和1.0%。

2.5 加样回收率试验称取已测知含量的同批样品5份，分别精密加入对照品溶液，按供试品溶液的制备方法并适当稀释，测定含量，计算回收率，结果黄芩苷的平均回收率为99.0%，RSD为0.73%；盐

酸小檗碱的平均回收率为99.3%，RSD为0.67%。

2.6 样品测定结果见表1。

表1 样品中黄芩苷和盐酸小檗碱含量测定结果（略）

3 小结

3.1 实验中比较了甲醇磷酸溶液，乙脯磷酸溶液等多种流动相体系，结果发现只有本实验的流动相比例，黄芩苷和盐酸小檗碱可同时测定，且达到完全分离。黄芩苷保留时间为 3.4min，盐酸小檗碱保留时间为

4.6min。柱效均在4000以上，分离度为4.97。

3.2 为了使盐酸小檗碱有较好的响应值，采用波长265nm可同时测定两种组分的含量。

【参考文献】

［1］魏宝，胡嵘，徐多多，等.高效液相色谱法测定肺清颗粒中黄芩苷含量［J］.长春中医药大学学报，22(1)：51-52.

［2］孙尚志，张青青，张辉.高效液相色谱法测定妇康灵胶囊中盐酸小檗碱含量［J］.长春中医药大学，2007，23(2)：71-72.