ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)
PCR扩增缓冲液(10×,pH8.3)
北京雷根生物技术有限公司
PCR 扩增缓冲液(10×,pH8.3)
简介:
Tris(三羟甲基氨基甲烷)为弱碱,分子式为C 4H 11NO 3,相对分子量为121.14, 在25℃下pKa 为8.1,Tris 缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0~9.2之间,用来作为各种缓冲液的基础成分,调节酸碱度。
PCR 扩增缓冲液(10×,pH8.3)由Tris-HCl 缓冲液(pH8.3)、Mg 2+、500mM KCl 等组成,经高压灭菌处理,作为Taq 酶等扩增酶类的反应缓冲液。
组成:
操作步骤(仅供参考):
1、 按实验具体要求操作。
2、 PCR 扩增缓冲液(10×,pH8.3)工作浓度。
注意事项:
1、 注意避免反复冻融,否则扩增效率容易下降。
2、 并且避免微生物污染。
3、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:12个月有效。
相关:
编号 名称 NP0024 Storage PCR 扩增缓冲液(10×,pH8.3) 10ml -20℃ 使用说明书 1份
编号 名称 CS0001 ACK 红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer) DF0111 中性福尔马林固定液(10%) DM0007
瑞氏-姬姆萨复合染色液 PE0080
Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH6.8) PW0040
Western blot 一抗稀释液 TC1213 总胆固醇(TC)检测试剂盒(COD-PAP 单试剂比色法)。
红细胞裂解液(RBC Lysis Buffer,10×)
红细胞裂解液(RBC Lysis Buffer ,10×)简介: 红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液,其主要有效成分为NH 4Cl 。
RBC Lysis Buffer(10×)配方经过优化不同于ACK Lysis Buffer ,在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(Lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。
使用1×RBC Lysis Buffer 处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测,尤其适用于流式细胞检测或需要高浓度裂解液的情况。
组成:操作步骤(仅供参考):注意:绝大多数情况下,应使用无菌去离子水稀释RBC Lysis Buffer(10×)至1×使用,流式细胞术除外。
(一)组织细胞样本的常规操作1、制备细胞悬液,离心弃上清。
2、裂解: 加入1×RBC Lysis Buffer ,轻柔吹打混匀,裂解。
本操作步骤在4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。
3、离心: 4℃离心,弃红色上清。
本步骤亦可在室温下操作。
4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3各一次。
5、洗涤:根据实验要求加入适量PBS 、HBSS 、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀重悬沉淀。
4℃,离心,弃上清,该离心步骤亦可在室温下操作。
6、如有必要,重复上述步骤5一次,共洗涤1~2次。
7、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,进行计数、培养等后续实验。
(二)组织细胞样本的快速操作(无需洗涤)1、制备细胞悬液:新鲜组织经胰蛋白酶或胶原酶等消化处理,制备细胞悬液,离心弃上清。
2、裂解:加入1×RBC Lysis Buffer ,轻柔吹打混匀,裂解。
本操作步骤在4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。
磷酸盐缓冲液(0.2molL,pH7.2-7.4)
北京雷根生物技术有限公司 PS 磷酸盐缓冲液(0.2mol/L,pH7.2~7.4)简介:平衡盐溶液(Balanced Salt Solution ,BSS)与细胞生长状态下的pH 值、渗透压等环境状态一致,具有维持渗透压、控制酸碱平衡、供给细胞生存代谢所必需的能量和无机盐成分等作用,可满足体外实验中细胞生存并维持一定的代谢的基本需要。
Leagene PB 磷酸盐缓冲液(0.2mol/L,pH7.2-7.4)主要由磷酸氢二盐、磷酸二氢盐组成,不含氯化钠,不含钙离子和镁离子,pH 值为7.2~7.4,主要用于免疫组化、组织切片或其他常规用途。
该试剂浓度0.2mol/L 是指磷酸根的总浓度为0.2mol/L ,可直接使用,亦可稀释后至恰当浓度使用。
组成:操作步骤(仅供参考):1、 无需配制,直接使用,亦可稀释后至恰当浓度使用。
注意事项:1、 PS 磷酸盐缓冲液由于不含有钙离子,不易产生沉淀,出现该种情况后,一般置于温浴至沉淀溶解即可, 如果产生较多沉淀应弃用。
2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期: 12个月有效。
相关:编号 名称 IH0132 IH0132 Storage PB 磷酸盐缓冲液(0.2mol/L,pH7.2~7.4) 500ml 5L RT 使用说明书 1份编号 名称 CC0005 磷酸缓冲盐溶液(1×PBS,无钙镁) CS0001 ACK 红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer) DF0111 中性福尔马林固定液(10%) DM0007瑞氏-姬姆萨复合染色液 TC0699葡植物总糖和还原糖检测试剂盒(硝基水杨酸法) TC1167 尿素(Urea)检测试剂盒(脲酶波氏比色法)。
HEPES裂解缓冲液
北京雷根生物技术有限公司
HEPES 裂解缓冲液
简介:
为了分离酵母亚细胞组分,细胞壁较厚的酵母菌必须经过裂解。
差速离心法能够依照原生质体中各个亚细胞组分的大小,粗略的将他们分开,获得较多的细胞器或膜成分,并去除多余组分或减少样品体积。
Leagene HEPES 裂解缓冲液主要由HEPES 、乙酸钾、mM 山梨醇、EDTA 组成,高压灭菌,用于裂解原生质体,获得亚细胞组分。
组成:
操作步骤(仅供参考):
1、根据实验要求操作。
注意事项:
1、 注意无菌操作,避免反复冻融。
2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期: 3个月有效。
相关:
编号 名称 CS0041 Storage HEPES 裂解缓冲液 100ml 4℃ 使用说明书 1份 编号 名称
CC0007 磷酸缓冲盐溶液(10×PBS,无钙镁)
CC0130 胰蛋白酶-EDTA 溶液(0.25%:0.02%)
CS0001 ACK 红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)
DC0032 Masson 三色染色液
NR0003 Lezol(总RNA 提取试剂)
PW0053 Western 抗体洗脱液(碱性)
TO1013 丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA 比色法)。
核酮糖1,5-二磷酸羧化酶检测试剂盒(RuBP比色法)
核酮糖1,5-二磷酸羧化酶(Rubisco)检测试剂盒(RuBP比色法)简介:植物光合作用的中,C3途径是所有植物共有的光合碳同化途径,核酮糖1,5-二磷酸羧化酶(Ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase,Rubisco或RuBPCo或RuBPCase)是一种酶(EC 4.1.1.39),又称1,5-二磷酸核酮糖羧化酶,分子量约为53kD,由8个大亚基和8个小亚基组成,是光合作用中决定碳同化速率的关键酶,该酶活力的大小反应了植物光合能力的强弱,RUBP羧化酶是光合作用碳代谢中的重要的调节酶,主要存在于叶绿体的可溶部分,总量占叶绿体可溶蛋白50-60%。
在植物叶片发育过程中,此酶活性呈规律性的变化。
Leagene核酮糖1,5-二磷酸羧化酶(Rubisco)检测试剂盒(RuBP比色法)检测原理是在Rubisco催化核酮糖1,5-二磷酸(RuBP),1分子后者与1分子的CO2结合,产生2分子的3-磷酸甘油酸(PGA),后者通过3-磷酸甘油酸激酶和甘油醛-3-磷酸脱氢酶的作用,产生甘油醛-1,3-二磷酸,并使NADH氧化。
因此1分子CO2被固定,伴随2分子NADH氧化,由NADH氧化的量就可计算Rubisco的活性,通过分光光度比色法(分光光度计)测定340处吸光度的变化,计算出NADH的消耗速率进一步推算出核酮糖1,5-二磷酸羧化酶活性水平。
该试剂盒主要用于检测植物样本、血清等中核酮糖1,5-二磷酸羧化酶活性,25T规格的试剂盒可检测23-24个样本。
组成:编号名称TE044925TStorage试剂(A): Rubisco Lysis buffer 250ml 4℃试剂(B): Rubisco Assay buffer15ml 4℃试剂(C): ATP Solution 3ml -20℃试剂(D): CP Solution 1.5ml -20℃试剂(E): CPK Solution 1ml -20℃试剂(F): PGK Solution 1ml -20℃试剂(G): GAPD Solution 1ml -20℃试剂(H): NADH 1支-20℃试剂(I): 碱性基液3ml RT 使用说明书1份自备材料:1、研钵或匀浆器2、离心管3、低温离心机4、恒温箱或水浴锅5、比色杯6、分光光度计操作步骤(仅供参考):1、准备样品:①植物样品:取植物组织清洗干净,切碎,按植物组织:Rubisco Lysis buffer按一定比例,加入预冷的Rubisco Lysis buffer,冰浴情况下充分匀浆或研磨。
C3702 红细胞裂解液(碧云天)
红细胞裂解液产品简介:碧云天生产的红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer),也称ACK Lysis Buffer,是一种用于从人或鼠等的血液或组织样品中裂解并去除无细胞核红细胞的溶液。
本裂解液经过优化配方,在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。
本裂解液的主要有效成分为氯化铵。
本裂解液不适用于有细胞核红细胞的裂解,例如鸟或禽类的红细胞。
本裂解液经过无菌处理,处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。
保存条件:4℃保存,一年有效。
室温保存, 3个月有效。
注意事项:本裂解液为无菌产品,请注意保持无菌,使用本产品时宜在超净工作台内进行。
如果经过红细胞裂解液处理后的样品后续用于总RNA的提取,在处理细胞时不必使用经过DEPC处理过的溶液。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:对于组织细胞样品:1.新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液,离心弃上清。
2.加入3-5倍细胞体积的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解1-2分钟。
例如细胞沉淀的体积为1ml,则加入3-5ml的红细胞裂解液。
本步骤在室温或4度操作均可。
3.400-500g离心5分钟,弃红色上清。
4℃离心效果更佳。
4.如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。
通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。
5.洗涤1-2次:加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,重悬沉淀,400-500g离心2-3分钟,弃上清。
可再重复1次,共洗涤1-2次。
洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。
4℃离心效果更佳。
6.根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
对于组织细胞样品无需洗涤的快速操作步骤:1.新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液,离心弃上清。
红细胞裂解液使用说明书
红细胞裂解液使用说明书产品货号:SL1070储存条件:2-8度保存,有效期1年。
产品内容:产品内容SL1070-100ml SL1070-500ml 红细胞裂解液100ml500ml说明书1份产品简介:红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer),也称ACK Lysis Buffer,是一种用于从人或鼠等的血液或组织样品中裂解并去除无细胞核红细胞的溶液。
本产品经过优化配方,在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。
不适用于鸟或禽类等有细胞核红细胞的裂解。
本产品主要成分为氯化铵,经过无菌处理。
经过处理的血液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养、细胞融合,核酸或蛋白的提取,及各种常规的分析和检测。
使用说明:组织细胞样品常规操作步骤:.1、新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液,离心弃上清。
2、加入3-5倍细胞体积的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解1-2分钟。
室温或4度操作均可。
3、400-500g离心5分钟,弃红色上清。
4℃离心效果更佳。
4、如果红细胞裂解不完全,可以重复步骤2和步骤3。
一般极微量的红细胞不影响后续检测。
5、加入5-8倍细胞体积的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,重悬沉淀,400-500g离心2-3分钟,弃上清。
4℃离心效果更佳。
洗涤1-2次。
6、根据实验需要,选用适当溶液重悬细胞沉淀,随后进行计数等后续实验。
组织细胞样品快速操作步骤:1、新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液,离心弃上清。
2、加入5倍细胞体积的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解1-2分钟。
室温或4度操作均可。
3、加入15-20倍红细胞裂解液体积的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,混匀。
4、400-500g离心5分钟,弃红色上清。
4℃离心效果更佳。
5、如果红细胞裂解不完全,可以重复步骤2和步骤3。
硼酸溶液(4molL)
北京雷根生物技术有限公司
硼酸溶液(4mol/L)
简介:
硼酸(Orthoboric acid)分子量为61.83,分子式H 3BO 3,水溶液为弱酸性。
硼酸溶液(4mol/L)由硼酸、去离子水组成。
组成:
操作步骤(仅供参考):
1、 按实验具体要求操作。
注意事项:
1、 注意密闭保存,避免挥发。
2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:12个月有效。
相关:
编号 名称 IH0206 Storage 硼酸溶液(4mol/L) 500ml RT 使用说明书 1份
编号 名称
CC0005 磷酸缓冲盐溶液(1×PBS,无钙镁)
CS0001 ACK 红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)
DF0111 中性福尔马林固定液(10%)
DM0007 瑞氏-姬姆萨复合染色液
IH0143 PBS 磷酸盐缓冲液(0.1mol/L,pH7.2-7.4)
PE0080 Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH6.8)
PT0013 考马斯亮蓝快速染色液
TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 比色法)。
氯化钠溶液(5molL,无菌)
北京雷根生物技术有限公司
氯化钠溶液(5mol/L,无菌)
简介:
氯化钠(Sodium chloride)俗称食盐,分子量为58.5,分子式为NaCl ,是多种科研试剂的基础成分,用途极为广泛。
氯化钠溶液(5mol/L,无菌)由氯化钠、去离子水组成,经高压灭菌处理。
组成:
操作步骤(仅供参考):
1、 按实验具体要求操作。
注意事项:
1、 注意无菌操作,避免微生物污染。
2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:12个月有效。
相关:
编号 名称 R00493 Storage 氯化钠溶液(5mol/L,无菌) 500ml RT 使用说明书 1份
编号 名称
CS0001 ACK 红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)
DF0111 中性福尔马林固定液(10%)
DM0007 瑞氏-姬姆萨复合染色液
PT0013 考马斯亮蓝快速染色液
PW0040 Western blot 一抗稀释液
TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 比色法)。
红细胞裂解液说明书
产品说明书红细胞裂解液产品货号:H9032产品规格:100mL储存条件常温避光保存,有效期见产品外包装。
产品介绍本裂解液有别于市场上销售的其它红细胞裂解液,其配方经过本公司优化在裂解红细胞的同时不损伤并在一定程度上保护淋巴细胞(lymphocyte)或其它有细胞核的细胞,所获得的细胞可保持完好的生物活性和完整的细胞形态。
另外,本裂解液中无DNA及RNA酶,配合细胞分离液使用所提细胞可广泛用于细胞培养及分子生物学实验,请广大用户从优选择。
红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer),也称ACK Lysis Buffer,是一种用于从人或鼠等的血液或组织细胞样品中裂解并去除无细胞核红细胞的溶液。
本裂解液不适用于有细胞核红细胞的裂解,例如鸟或禽类的红细胞。
本裂解液经过无菌处理,处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。
使用方法裂解过程及离心需在4℃的条件下进行。
对于细胞悬液样品:1.第一次裂解,加入5-8倍细胞体积的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解2min。
2.300g离心10min,弃红色上清。
3.如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤1、2步进行短时多次裂解。
但后续每次加入的红细胞裂解液为上一次的一半,但最少不能低于2mL。
裂解液减少到只剩余2mL 时,每次裂解结束,需先加入10mL PBS进行终止,并300g 离心10min,弃红色上清。
直至红细胞裂解完全,裂解结束。
通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。
4.洗涤1-2次:加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,重悬沉淀,300g离心5min,弃上清。
洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。
5.根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
对于血液样品:1.取新鲜抗凝血,400-500g离心5min,离心弃血浆。
2.第一次裂解,加入5-8倍细胞体积的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解2min。
酮体粉试剂
酮体粉试剂简介:在肝脏中脂肪酸经β氧化生成乙酰辅酶A ,再合成酮体。
酮体是脂肪酸在肝脏进行正常分解代谢所生成的特殊中间产物,但肝脏不能利用酮体,必须经血液运送至肝脏外组织特别是肌肉、肾脏,再转变为乙酰辅酶A 而被氧化利用。
Leagene 酮粉试剂是组织酮体定性检测试剂盒(辛酸钾法)的成分之一,由亚硝酸铁氰化钠、硝酸钠、硫酸铵组成。
组织酮体定性检测试剂盒以辛酸钾为底物,所产生的酮体在有铵离子存在的碱性环境中,与酮粉试剂(其主要成分为亚硝酸铁氰化钠)作用生成紫色化合物组成:自备材料:操作步骤(仅供参考):1、 配制辛酸钾工作液:按辛酸钾溶液:蒸馏水=比例混合,即得辛酸钾工作液。
2、 取鼠或兔子1只,用剪刀断头处死,使血液流尽,立即取出肝脏、肌肉组织,用预冷的组织匀浆液冲洗数次,将其剪成碎末或用匀浆器匀浆备用。
3、 辛酸钾处理:按下表操作:试剂 1 2 3 肝脏 0.3g 肝脏+肌肉 0.3g 肌肉 0.3g 辛酸钾工作液3.0ml3.0ml3.0ml37℃温浴30min 。
酮体酸化液1.0ml1.0ml1.0ml4、 酮体测定:混匀,静置,取各管中上清液,分别放入3支试管或离心管,各加入蒸馏水,混匀后各加酮粉试剂0.3g ,静置后观察各管颜色变化。
编号 名称TC0017 50T Storage酮粉试剂 15gRT 使用说明书1份结果分析:肝脏管中呈紫色;肝脏+肌肉管呈淡紫色或红色;肌肉管颜色未有变化。
注意事项:1、酮体浓度高时,紫色明显;酮体浓度低时,出现淡紫色或红色。
2、处理肝脏的器皿不能与处理肌肉的器皿混用。
3、如果肝脏管与肝脏+肌肉管颜色无法区分,可再各加少许等量的酮粉。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:12个月有效。
相关:编号名称CC0007 磷酸缓冲盐溶液(10×PBS,无钙镁)CS0001 ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)DC0032 Masson三色染色液DF0135 多聚甲醛溶液(4% PFA)NR0001 DEPC处理水(0.1%)TC0699 葡植物总糖和还原糖检测试剂盒(硝基水杨酸法)。
氯化钙溶液(1molL)
北京雷根生物技术有限公司
氯化钙溶液(1mol/L)
简介:
氯化钙(Calcium chloride)分子量为110.98,分子式为CaCl ,CAS 号为25094-02-4,是典型的离子型卤化物,是多种科研试剂的基础成分,亦可用作干燥剂等。
氯化钙溶液(1mol/L)由氯化钙、去离子水组成。
组成:
操作步骤(仅供参考):
1、 按实验具体要求操作。
注意事项:
1、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:6个月有效。
相关:
编号 名称 R00446 Storage 氯化钙溶液(1mol/L) 500ml 4℃ 使用说明书 1份
编号 名称 CS0001 ACK 红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer) DF0111 中性福尔马林固定液(10%) DM0007
瑞氏-姬姆萨复合染色液 PT0013
考马斯亮蓝快速染色液 PW0040
Western blot 一抗稀释液 TC1213 总胆固醇(TC)检测试剂盒(COD-PAP 单试剂比色法)。
NP-40溶液(10%)
北京雷根生物技术有限公司
NP-40溶液(10%)
简介:
Nonidet P 40也称Nonidet P-40,简称NP-40,中文名为乙基苯基聚乙二醇,常用做非离子性去污剂、表面活性剂,用途极为广泛。
NP-40溶液(10%)由NP-40、去离子水组成。
组成:
操作步骤(仅供参考):
1、 按实验具体要求操作。
注意事项:
1、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:12个月有效。
相关:
编号 名称 R00080 Storage NP-40溶液(10%) 100ml RT 使用说明书 1份
编号 名称
CC0005 磷酸缓冲盐溶液(1×PBS,无钙镁)
CS0001 ACK 红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)
DF0111 中性福尔马林固定液(10%)
PE0080 Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH6.8)
PT0013 考马斯亮蓝快速染色液
PW0040 Western blot 一抗稀释液
TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 比色法)。
磷酸钠缓冲液(1molL,pH5.8-8.0)
北京雷根生物技术有限公司
磷酸钠缓冲液(0.01mol/L,pH5.8-8.0)
简介:
平衡盐溶液(Balanced Salt Solution,BSS)与细胞生长状态下的pH 值、渗透压等环境状态一致,具有维持渗透压、控制酸碱平衡、供给细胞生存代谢所必需的能量和无机盐成分等作用,可满足体外实验中细胞生存并维持一定的代谢的基本需要。
磷酸钠缓冲液(0.01mol/L,pH5.8-8.0)由磷酸氢二钠和磷酸二氢钠按不同比例混合而得,磷酸根浓度为0.01mol/L,客户根据需要可选pH5.8、6.0、6.2、6.4、6.6、6.8、7.0、
7.2、7.4、7.6、7.8、8.0。
组成:
操作步骤(仅供参考):
1、根据实验具体要求操作。
注意事项:
1、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:12个月有效。
相关:编号
名称R00367
Storage 磷酸钠缓冲液(0.01mol/L,pH5.8-8.0)
500ml RT 使用说明书1份编号
名称CC0005
磷酸缓冲盐溶液(1×PBS,无钙镁)CS0001
ACK 红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)DC0032
Masson 三色染色液DH0006
苏木素伊红(HE)染色液DF0135
多聚甲醛溶液(4%PFA)NA0030
Tris-乙酸电泳缓冲液(50×TAE)NR0003
Lezol(总RNA 提取试剂)TC0699葡植物总糖和还原糖检测试剂盒(硝基水杨酸法)。
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ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)
产品简介:
去除红细胞的方法有多种,Leagene生产的ACK红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer),也称为ACK Lysis Buffer,是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液,其主要有效成分为氯化铵,ACK Lysis Buffer经过优化配方,在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。
Leagene ACK Lysis Buffer对于裂解、去除有细胞核红细胞,例如鸟或禽类的红细胞,效果不佳,裂解类似细胞时,不建议采用。
本裂解液经过滤除菌,经过ACK Lysis Buffer 处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。
产品组成:
主要成分:主要由NH4Cl组成,pH7.2。
自备材料:
1、胰蛋白酶,亦可采购Leagene的胰蛋白酶-EDTA溶液(0.25%:0.02%)(CC0130)
2、离心机
3、PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液
操作步骤(仅供参考):
(一)组织细胞样本的常规操作
1、制备细胞悬液: 新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理,通过适当方法制备成细胞悬液,离心弃上清。
2、裂解: 加入3~5倍细胞沉淀体积的ACK Lysis Buffer,轻柔吹打混匀,裂解1~2min。
本操作步骤在4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。
3、离心: 4℃,400~500g离心5min,弃红色上清。
如无低温离心机本步骤亦可在室温下操作。
4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3各一次。
5、洗涤:根据具体实验要求加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀重悬沉淀。
4℃,400~500g离心2~3min,弃上清,离心步骤亦可在室温下操作。
所加入的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液的量一般应大于细胞沉淀体积的5倍以上。
6、如有必要,重复上述步骤5一次,共洗涤1~2次。
7、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,进行计数、培养等后续实验。
(二)组织细胞样本的快速操作(无需洗涤)
1、制备细胞悬液:新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理,通过适当方法制备成细胞悬液,离心弃上清。
2、裂解:加入细胞5倍细胞沉淀体积的ACK Lysis Buffer,轻柔吹打混匀,裂解1~2min。
本操作步骤在4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。
3、 加入15~20ml的 PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀。
4、 离心:4℃,400~500g离心5min,弃红色上清,本步骤亦可在室温下操作。
5、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2~4各一次。
6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,进行计数、培养等后续实验。
(三)血液样本的常规操作
1、取新鲜抗凝血,400~500g离心5min,离心弃上清。
2、裂解: 加入6~10倍细胞沉淀体积的ACK Lysis Buffer,轻柔吹打混匀,裂解1~5min。
本操作步骤在4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。
(特别提醒:对于鼠的血液,裂解1~2min已经足够,对于人的外周血,宜延长裂解时间至4~5min,并且裂解过程中轻轻摇动以促进红细胞裂解)
3、离心: 4℃,400~500g离心5min,弃红色上清。
如无低温离心机本步骤亦可在室温下操作。
4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。
5、洗涤: 根据具体实验要求加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀重悬沉淀。
4℃,400~500g离心2~3min,弃上清,离心步骤亦可在室温下操作。
所加入的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液的量一般应大于细胞沉淀体积的5倍以上。
6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,进行计数、培养等后续实验。
注意: 对于微量或少量的血液样本,可以不用第1步操作,加入10倍血液体积的ACK Lysis Buffer进行第2步操作,并在4℃或室温裂解4~15min。
对于鼠的血液,裂解4~5min已经足够;对于人的外周血,宜延长裂解时间至10min,但通常不宜超过15min,并且裂解过程中宜适当摇动以促进红细胞裂解。
(四)血液样本的快速操作(无需洗涤)
1、新鲜抗凝血中加入10倍体积的ACK Lysis Buffer,轻轻吹打混匀,裂解4~15min。
本操作步骤在4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。
(特别提醒:对于鼠的血液,裂解4~5min已经足够,对于人的外周血,宜延长裂解时间至10min,但通常不宜超过15min,并且裂解过程中宜适当摇动以促进红细胞裂解。
2、加入20~30ml PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀。
3、400~500g离心5min,弃红色上清。
4℃离心效果更佳。
4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。
5、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,进行计数、培养等后续实验。
注意事项:
1、制备细胞悬液是应根据具体实验需要,不一定要制备成单细胞悬液。
2、后续试验如果是用于细胞培养,操作过程中应注意无菌操作,尽量在超净工作台内操作。
3、离心步骤尽量在4℃离心机上操作。
4、对于常规步骤与快速步骤的区别在于:常规步骤多了一步洗涤过程的离心,可以节省洗涤液的用量,并且洗涤效果也更好,不需要大体积的离心管;快速步骤少了一次离心过程,洗涤效果略差一些,同时需要大体积的离心管。
5、离心洗涤后,通常极微量的红细胞不会影响后续的检测。
6、如果经过ACK Lysis Buffer处理后的样品后续用于总RNA的提取,在处理细胞时不必使用DEPC处理的溶液,即无需在该操作中特意去除RNase。
7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:6个月有效。
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