微生物无菌室灭菌规程.
无菌室消毒灭菌操作规程
无菌室消毒灭菌操作规程无菌室是医疗和实验环境中非常重要的空间，其内部必须保持无菌状态以确保实验的准确性和研究的可靠性。
为了维护无菌室的洁净环境，以下是一份无菌室的消毒灭菌操作规程。
一、概述无菌室是为了保证实验的可靠性和研究的准确性而建立的，其主要功能是提供无菌环境、防止交叉污染。
无菌室的消毒灭菌操作规程是对无菌室内环境进行灭菌和消毒的操作流程进行规范化，以达到无菌室工作区域的最佳无菌状态。
二、消毒灭菌操作规程1. 打开无菌室的门前，请先用肥皂和流动水洗手，重点清洁指甲，并用75%酒精消毒。
2. 确保无菌室内部及工作台面干燥，座椅、工作台等物品无明显污染。
3. 使用具有高效消毒性能的消毒剂进行表面消毒。
消毒剂可选用过氧乙酸或乙酸烯丙酯等高效消毒剂，按照说明书的要求使用。
4. 消毒操作时，应准备好必要的防护措施，包括穿戴无菌手套、口罩和帽子等个人防护装备。
5. 将所需器具和试剂放在经过消毒处理的无菌室桌面上。
6. 操作前应将试验所需的器械、试剂等进行高温湿热灭菌处理，或使用已经灭菌的无菌装置进行操作。
7. 在操作过程中，不能将无菌室内的工作区域长时间暴露在外界空气中，以防止污染。
8. 消毒和灭菌操作结束后，及时清理无菌室内的废弃物，并用适当的消毒剂对工作区域进行再次消毒。
9. 定期对无菌室内和周围环境进行清洁和消毒，保持无菌室的干净整洁。
10. 若无菌室内出现明显污染或破损，请及时更换或修理，以确保无菌室的正确使用。
三、注意事项1. 消毒操作应严格按照规程进行，不得擅自增减或改动。
2. 涉及到的消毒剂和灭菌器材应符合相关行业标准。
3. 操作人员应经过相关培训，了解相关操作要求和流程。
4. 消毒剂应储存在干燥、通风的地方，避免阳光直射。
5. 操作过程中，应注意个人防护，避免操作失误导致交叉感染。
6. 定期检查无菌室内的设备设施是否正常工作，如有问题及时进行维修或更换。
7. 检查无菌室的温湿度和过滤装置的工作情况，保持合适的无菌室环境。
无菌实验室卫生管理规定
微生物实验室管理操作规程1.目的:规范微生物室管理规范,以保证微生物实验的顺利进行。
2.范围:微粒检测室、无菌室、微生物限度室、阳性间及灭活间3.依据:管理制度、《中国药典》四部4.操作方法4.1 人员控制4.1.1人员:实验人员应系统掌握实验方法和实验所依据的标准,了解实验过程。
不得将与实验无关人员带入实验室。
4.1.2人员进出流程:洗手并消毒→穿工作服、工作鞋→缓冲间→实验室→结束实验→缓冲间→脱下工作服、工作鞋→洗手并消毒4.2 物品控制4.2.1实验用器材:统一从传递窗口进、出(注:两侧窗口不可同时打开),物品进传递窗时可开启传递窗紫外灯30min。
4.2.2操作台面:操作区域内不允许存放不必要的物品,保持工作区的洁净气流流型不受干扰。
4.2.3实验用工作服、工作鞋:工作服、工作鞋消毒并清洗后封存于袋内放置二更。
4.3 一般清洁4.3.1清洁部位:实验设备、操作台面4.3.2清洁方法:先用消毒液由上往下,由内而外的擦拭两遍,再开启净化系统及紫外灯30min。
4.3.3清洁周期:每次实验后4.4 彻底清洁4.4.1清洁部位:顶棚、墙面、生物安全柜、灭菌高压锅、试验设备、操作台面、日光灯、地面、插座电线、凳子、紫外灯4.4.2清洁方法:先用纯化水由上往下、由内而外的擦拭两遍后,再用消毒液按上述顺序擦拭一遍;之后再开启净化系统及紫外灯30min。
4.4.3清洁周期:每月一次5.清洁用消毒剂5.175%酒精5.1.1配置方法:量取95%浓度的酒精,用纯化水稀释至75%浓度,混匀。
5.1.2使用期限:7天5.284消毒液5.2.1配置方法:将0.7%的84消毒液按瓶身标签的稀释方法配置所需量,混匀。
5.2.2使用期限:一个月6.消毒剂更换周期:6个月7.卫生安排:参加实验的人员在实验过程中,要注意保持室内卫生。
实验结束后,必须及时做好清洁整理工作,实验人员必须将工作台、仪器设备、器皿等清洁干净,并将仪器设备和器皿按规定归类放好。
无菌室操作规程
操作程序1、微生物检验的准备工作1.2操作前的准备:1.2.1无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟以上，并且同时打开超净台进行吹风。
以保证无菌室的洁净度符合要求。
1.2.2微生物检验玻璃仪器的清洗1.2.2.1按技术要求将各种玻璃仪器进行清洗，可用瓶刷或海绵沾上肥皂或洗衣粉或去污粉等洗涤剂刷洗，然后用自来水充分冲洗干净。
热的肥皂水去污能力更强，可有效地洗去器皿上的油污。
洗衣粉和去污粉较难冲洗干净而常在器壁上附有一层微小粒子，故要用水多次甚至10次以上充分冲洗，或可用稀盐酸摇洗一次，再用水冲洗，然后倒置于磁盘或木架上，在室内晾干，放烘箱烘干。
1.2.2.2玻璃器皿经洗涤后，若内壁的水是均匀分布成一薄层，表示油垢完全洗净，若挂有水珠，则还需用洗涤液浸泡数小时，然后再用自来水充分冲洗。
1.2.2.3装有固体培养基的器皿应先将其弃去，然后洗涤。
带菌的器皿在洗涤前先浸在2％煤酚皂溶液（来苏尔）或0.25％新洁尔灭消毒液内24小时或煮沸半小时，再用上法洗涤。
带病原菌的培养物最好先行高压蒸汽灭菌，然后将培养物倒去，再进行洗涤。
1.2.2.4盛放一般培养基用的器皿经上法洗涤后，即可使用，若需精确配制化学药品，或做科研用的精确实验，要求自来水冲洗干净后，再用蒸馏水淋洗三次，晾干或烘干后备用。
1.2.2.5准备好所用的各种试剂，做好普通营养琼脂或其他选择的培养基。
1.3消毒、灭菌微生物检验用器材及场所必须进行灭菌或消毒处理，不同的对象采用不同的处理方法。
1.3.1．高压蒸汽灭菌:工作服、口罩、稀释液等，置高压杀菌锅内，一般采用121℃灭菌半小时,当然不同的培养基有不同的要求,应分别处理1.3.2．火焰灭菌：接种针、接种环等可直接火焰灭菌1.3.3．高温干燥灭菌：各种玻璃器皿、注射器、吸管等，置于燥箱中160℃灭菌2小时。
1.3.4．一般消毒:无菌室内的凳、工作台、试管架、天平、待检物容器或包装均无法进行灭菌，必须用其他方法进行消毒处理，采用2%石炭酸或来苏儿水溶液擦拭消毒，工作人员的手也用此法进行消毒。
微生物实验室使用规程
目的：为了实现微生物实验室的规范化、标准化操作，指导使用人员的实际工作。
适用范围：本所微生物实验室从事药品检验的相关人员。
责任：生测室使用人员对本项细则实施负责，科室主任、业务管理科对本细则的有效执行承担监督检查责任。
内容：进行药品、保健食品、医疗器械、药用辅料等的无菌、微生物限度、控制菌检查时，应在洁净室中进行，试验中应按照以下指导进行操作。
1 开启空气净化和灭菌系统1.1 合上洁净室电源总开关，依次接通风机、空调、照明、洁净室、排风开关，然后合上灭菌开关。
1.2 洁净室采用紫外灯、臭氧灭菌。
在风机开启的状态下至少灭菌40分钟，灭菌完成后关闭灭菌开关，至少15分钟后才能使用。
2 实验前准备工作2.1 实验操作中所用的培养基、物品、试剂均需要提前灭菌，检品应采用0.2％的新洁尔灭和酒精棉球清洗。
并准备0.2％的新洁尔灭和无菌纱布备用。
2.2 实验操作中所用的物品、试剂和检品均需要经过专门的物流通道，放入传递窗中，并打开传递舱中的紫外灯。
2.3 实验人员应从专门的人流通道进入，并在一更室换无菌服和洁净拖鞋，进入洗手间用消毒水洗手，经缓冲间进入二更室后再换一次无菌服和洁净拖鞋，并佩戴专门的无菌口罩、帽子、手套、鞋套，穿戴整齐方可进入无菌室。
3 试验流程3.1 进入洁净室后，首先关闭传递窗中的紫外灯，打开传递窗，取出实验所用的培养基、物品、试剂和检品，并放置在合理的位置上。
3.2 用准备好的0.2％的新洁尔灭和纱布对洁净台面再一次消毒，检品用0.2％的新洁尔灭和酒精棉球清洗外包装，置于洁净台面上。
3.3 点燃酒精灯，按照无菌、微生物限度、控制菌检查操作规范进行试验，应在酒精灯火焰周围进行实验操作。
4 实验完毕后打扫洁净室卫生4.1 实验完毕后应熄灭酒精灯，将使用的实验器具放回原处。
4.2 将培养物和剩余的物品、试剂、检品等放入传递窗中，关闭内侧窗门。
4.3 用0.2％的新洁尔灭对洁净台面、试验用器具、仪器等进行清扫和消毒，必要时对整个房间进行清扫和消毒。
微生物实验室无菌操作技术规范
微生物实验室无菌操作技术规范目的：规范无菌操作流程，减少及避免染菌现象出现。
使用范围：无菌室及洁净区的操作。
无菌操作技术原则：1.环境要清洁，每次无菌操作结束后都需要对环境进行清理、清洗，避免操作前进行清扫。
2.做好个人卫生，进入无菌室前需修剪指甲、洗手，穿好无菌服，帽子需遮住所有头发，口罩遮住口鼻。
3.在无菌操作时，不可讲话、打喷嚏，对怀疑染菌的无菌物品不可使用。
内容：1.1 准备：工作人员着装整洁，洗手、戴口罩、修剪指甲，备齐用物（如接种针、接种环、酒精灯、斜面、平皿、摇瓶、75%酒精棉、无菌水等），核对无菌用品、接种菌种的种类、型号。
1.2 所有实验使用的物品都需要进行消毒、灭杀，在进入洁净区前需要经传递窗进行紫外表面消毒30分钟以上。
1.3 开始实验前需要打开超净台的紫外灯，消毒半个小时以上。
超净台避免放入过多的物品，一般只放入当次实验所有的物品。
所使用的试剂和耗材都需事先进行灭菌，灭菌日期超过4天的需重新消毒。
1.4 进入洁净区前关闭紫外灯，并打开风机，等待半个小时以上，使臭氧尽量排放干净。
1.5 除去手腕等部位的饰品，穿好无菌服，戴好头套、口罩，做到“三不漏”：不暴漏头发、不暴漏口鼻、不暴漏躯干皮肤和衣物。
1.6 双手要进行清洗、消毒。
1.7 要经风淋室风淋30秒后再进入洁净室。
1.8 在局部百级区域操作要戴一次性无菌手套。
1.9 实验操作过程中应尽量减少进入洁净区的人员（不超过4人/间），并尽量减少人员走动。
1.10 所有要放入超净工作台的物品都需经过消毒液喷洒擦拭消毒。
1.11 无菌物品若取离超净台则视为已污染，不得放回再用。
无菌液体在取离超净台前必须密封其开口。
密封的无菌液体在放入超净台后，对其开口前须对开口在酒精灯火焰上烧烤。
1.12 在拆开任何一次性无菌使用耗材的包装时都要在超净台内完成，并须同时保证与细菌直接接触的使用端/面不得与超净台内的任何物品发生触碰。
1.13 工作台面上的用品要放置有序、布局合理，一般说酒精灯（当工作不需要时也可不用）在中间，右手使用的物品在右侧，左手使用的物品在左侧。
微生物实验室生物安全操作规程
微生物实验室生物安全操作规程微生物实验室生物安全操作规程一、目的本规程旨在保障微生物实验室工作人员的健康安全、实验设备的安全卫生，以及防止对外界环境造成污染。
二、适用范围本规程适用于微生物实验室人员的人身安全、卫生健康安全管理及设备安全。
三、职责实验室工作人员必须严格遵守安全操作规程。
四、安全操作规程：1.员工安全操作规程1.1实验室入口处必须贴上生物危险标志，注明危险因子、生物安全级别、负责人姓名和电话、进入实验室的特殊要求及离开实验室的程序。
1.2禁止非工作人员进入实验室。
参观实验室等特殊情况必须经实验室负责人批准后方可进入，做好卫生防护，并在有关人员陪同下方可进入，同时注意做好环境维护及保密工作。
1.3进行感染性实验时，禁止他人进入实验室，或必须经实验室负责人同意后方可进入。
免疫耐受或正在使用免疫抑制剂的工作人员必须经实验室负责人同意方可在实验室工作。
1.4接触微生物或含有微生物的物品后，脱掉手套后和离开实验室前要洗手。
1.5禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及储存食物。
1.6尽量以移液器吸取液体，禁止口吸。
1.7实验过程中，严格按有关操作规程操作，降低溅出和气溶胶的产生。
1.8每天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出后要随时用75%乙醇或巴氏消毒液消毒。
1.9工作人员应接受必要的免疫接种和检测，如乙型肝炎疫苗、卡介苗等。
工作人员要接受有关的潜在危险知识的培训，掌握预防暴露以及暴露后的处理程序。
每年要接受一次最新的培训。
人员暴露于感染性物质时，及时向实验室负责人汇报，并记录事故经过和处理方案。
1.10禁止将无关动物带入实验室。
2.无菌室安全操作规程2.1无菌培养室每天都要用0.2%的新洁尔灭拖洗地面一次(拖布专用)，紫外线照射消毒30分钟以上，超净工作台台面每次实验前要用75％酒精擦洗。
然后紫外线消毒30分钟。
操作用具如移液器、废液缸、污物盒、试管架等用75%酒精擦洗后置于台内同时紫外线消毒。
灭菌的操作规程(一)2024
灭菌的操作规程（一）引言概述：灭菌的操作规程是一项非常重要的工作，它对于保障产品质量和消除病原微生物起着至关重要的作用。
本文将介绍灭菌的操作规程（一）的详细步骤和注意事项。
正文：一、灭菌前的准备工作1.检查灭菌设备的完整性和性能，确保其正常运行。
2.准备好所有需要灭菌的器具、仪器和材料，确保其清洁并处于完好状态。
3.制定灭菌方案，根据不同的操作需求选择合适的灭菌方法。
二、灭菌方法的选择1.根据器械和材料的性质选择合适的灭菌方法，常用的方法包括高温蒸汽灭菌、化学物质灭菌和电离辐射灭菌等。
2.考虑灭菌方法对产品质量的影响，确保灭菌后产品的性能和效果符合要求。
3.特殊情况下可进行生物指示器的使用，验证灭菌效果。
三、灭菌操作的步骤1.对器械和材料进行清洗和预处理，去除表面污物，使其达到灭菌的要求。
2.将待灭菌物放置在灭菌容器中，并按照灭菌方法和设备要求设置相应参数。
3.打开灭菌设备，启动相关程序，开始进行灭菌操作。
4.在灭菌过程中，注意观察设备运行状态和指示器的变化，确保灭菌过程正常进行。
5.灭菌结束后，关闭设备，取出灭菌物，并进行必要的记录和标识。
四、灭菌后的复核和验证1.对灭菌后的物品进行目测和触感检查，确认灭菌效果。
2.使用无菌技术将灭菌后的物品进行取样和培养，进行微生物检验，确保灭菌效果符合要求。
3.记录灭菌的时间、温度、压力等操作参数，并归档保存。
五、灭菌操作的注意事项1.根据不同的物品和需求，灭菌条件要进行合理的调整和设置。
2.严格按照操作规程和灭菌方案进行操作，确保操作可靠且一致性。
3.灭菌设备要定期进行检验和维护，确保其正常运行。
4.灭菌操作人员要接受专业培训，并掌握相关技能和知识。
5.灭菌过程中要注意个人防护，避免受伤或污染。
总结：灭菌的操作规程（一）是一项关系到产品质量和消除病原微生物的重要工作。
通过灭菌前的准备工作、灭菌方法的选择、灭菌操作的步骤、灭菌后的复核和验证以及注意事项的遵守，可以确保灭菌操作的可靠性和有效性。
微生物实验室设计方案
微生物实验室设计方案！微生物实验室功能分区3.无菌室的灭菌消毒（1）薰蒸：这是无菌室彻底灭菌的措施。
无菌室使用了较长时间，污染比较严重时，应进行薰蒸灭菌。
可用甲醛、乳酸或硫磺薰蒸。
（2）喷雾：在每次使用无菌室前进行。
喷雾可促使空气中微粒及微生物沉降，防止桌面、地面上的微尘飞场，并有杀菌作用。
可用5%石炭酸喷雾。
（3）紫外线照射：在每次使用无菌室前进行。
紫外线有较好的杀菌效果。
通常应开启紫外线灯照射30～60min。
4.无菌室工作规程（1）无菌室灭菌。
每次使用前开启紫外线灯照射30min 以上，或在使用前30min，对内外室用5%石炭酸喷雾。
（2）用肥皂洗手后，把所需器材搬入外室；在外室换上已灭菌的工作服、工作帽和工作鞋，戴好口罩，然后用2%煤酚皂液将手浸洗2分钟。
（3）将各种需用物品搬进内室清点、就位，用5%石炭酸在工作台面上方和操作员站位空间喷雾，返回外室，5～10min后再进内室工作。
（4）接种操作前，用70%酒精棉球擦手；进行无菌操作时，动作要轻缓，尽量减少空气波动和地面扬尘。
（5）工作中应注意安全。
如遇棉塞着火，用手紧握或用湿布包裹熄灭，切勿用嘴吹，以免扩大燃烧；如遇有菌培养物洒落或打碎有菌容器时，应用浸润5%石炭酸的抹布包裹后，并用浸润5%石炭酸的抹布擦拭台面或地面，用酒精棉球擦手后再继续操作。
（6）工作结束，立即将台面收拾干净，将不应在无菌室存放的物品和废弃物全部拿出无菌室后，对无菌室用5%石炭酸喷雾，或开紫外线灯照射30min。
（五）恒温培养室1.培养室的设置（1）培养室应有内、外两间，内室是培养室，外室是缓冲室。
房间容积不宜大，以利于空气灭菌，内室面积在3.2×4.4＝14m2左右，外室面积在3.2×1.8＝6m2左右，高以2.5m左右为宜，都应有天花板。
（2）分隔内室与外室的墙壁上部应设带空气过滤装置的通风口。
（3）为满足微生物对温度的需要，需安装恒温恒湿机。
无菌室消毒灭菌操作规程
文件制修订记录1、目的：规范无菌室中检验工作的质量控制，确保检测结果准确可靠。
2、适用范围：无菌室3、操作规范：3.1 无菌室日常消毒灭菌无菌室无固定程序，但按一般操作应遵循如下规程：3.1.1 操作间和缓冲室使用打开紫外线灯，照射杀菌。
3.1.2 穿上工作服及无菌工作帽、鞋，然后用消毒液洗手。
3.1.3每次无菌操作前，均用用75％的酒精棉球擦拭操作台及可能污染的死角，每次实验前应开启净化系统使运转至少1h以上，开启净化台，用紫外灯照射30分钟以上。
3.1.4如有菌液洒在桌上或地上，立即用5%石碳酸溶液或3％的来苏尔倾覆在被污染处至少30分钟，再进行高压蒸汽灭菌。
工作衣帽等受到菌液污染时，立即脱去，高压蒸汽灭菌后洗涤。
3.1.5每次工作完毕，生物安全柜或超净台内用75%酒精擦拭台面后，开启紫外线灯照射30min。
对用过的污染物品进行高压灭菌。
然后逐一关闭实验室送风和通风设备。
3.2无菌室定期消毒灭菌3.2.1每两周用经过0.1%新洁尔灭或84消毒液（1:50）浸泡的纱布擦拭工作台、门、窗、桌、椅及地面等，两种消毒剂相互交替使用，然后用5%石炭酸水溶液喷雾消毒空气，最后用紫外灯杀菌半小时。
3.2.2如果无菌室长期不用，再使用前需用乳酸熏蒸1～2小时消毒，最后紫外灯杀菌半小时。
3.3无菌室的消毒灭菌，可采取以下几种方法：3. 3.1用甲醛和高锰酸钾混合熏蒸：一般每平方米需40％甲醛10毫升、高锰酸钾8毫升，进行熏蒸。
使用时，先密闭门窗，量甲醛溶液盛入容器中、然后倒入量好的高锰酸钾，人员随之离开无菌室，关紧房门，熏蒸20—30分钟即可。
3. 3.2 乳酸熏蒸：乳酸4～5ml加等量水，使用酒精灯加热蒸发，密闭2～3h。
消毒时最适相对湿度60～80%，低于60%效果下降。
3.3.3 0.1％升汞水消毒：用0.1％升汞水浸过的纱布或海绵进行擦拭，或用喷雾器喷雾灭菌，使箱内的上下左右都沾上升汞水，手也可用升汞水消毒，并把袖子卷起来。
无菌技术操作规程
无菌技术操作规程无菌技术操作规程是一种用于保证实验室操作无菌环境的操作规范。
无菌室是一个特殊的实验室环境，要求实验人员必须掌握一系列的无菌技术，以防止细菌、真菌和其他微生物的污染。
下面是一份1200字以上的无菌技术操作规程。
一、无菌室和设备的准备1.确保无菌室的良好通风和负压环境，控制细菌和其他微生物的污染。
在进入无菌室前，必须经过灭菌门。
2.在实验开始之前，使用75%乙醇或其他合适的消毒剂对实验台面、手套和空间进行彻底的消毒。
3.按照无菌技术要求检查设备，包括培养皿、试管、移液器、镊子等，确保其干净且无细菌污染。
二、实验人员的准备1.洗手后，必须佩戴手套和实验服。
手套必须在洗手并彻底干燥后穿戴，避免手套上的粉尘和细菌污染。
2.进入无菌室前，必须戴上帽子、口罩和鞋套，并确保它们完全覆盖头发、口腔和鞋子。
3.实验人员进入无菌室后，要经过芳香消毒剂的喷洒，对实验服进行表面消毒。
三、培养物的准备1.准备培养基时，必须使用无菌设备和无菌培养物。
培养基瓶口必须经过芳香消毒剂的喷洒，使用烧杯和无菌滤器纸覆盖瓶口。
2.使用无菌的移液器和试管，将合适体积的培养基放入培养皿或试管中。
3.在进行细胞培养时，必须使用无菌的组织培养器皿，并避免培养皿的接触和暴露在无菌环境之外。
四、无菌操作1.打开无菌试验台，将需要操作的器具放在台面上。
注意杂质和细菌的污染。
2.在无菌操作台上进行实验时，必须注意防止衣物或其他物品的触摸和污染。
3.使用灭菌的镊子、移液器和试管盖，在无菌条件下进行培养物的转移和操作。
4.操作时必须保持手的稳定，避免手的运动导致细菌的扩散。
五、实验后的处理1.实验结束后，关闭无菌试验台，将无菌设备和培养皿装入塑料袋中。
2.用75%乙醇或其他合适的消毒剂清洁无菌试验台，确保消毒效果。
3.拆卸和处理使用过的无菌设备时，必须注意防止细菌和其他微生物的释放和扩散。
六、培养基的质控1.在进行培养基配置的过程中，必须注意培养基成分的准确性和无菌化的有效性。
微生物学实验室规则
微生物学实验室规则医学微生物学实验的对象大多为病原微生物，具有传染性，因此要求进入实验室后必须严格遵守以下实验室规则：1．进入实验室应穿白大衣，离室时脱下，反折放回原处，不必要的物品不得带入实验室，必须带入的书籍和文具等应放在指定的非操作区，以免受到污染。
无菌操作时必须戴口罩，并不得开电风扇。
2．实验室内禁止饮食、抽烟，不得高声谈笑或随便走动。
3．各种实验物品应按指定地点存放，用过的器材必须放入消毒缸内，禁止随意放于桌上及冲入水槽。
4．须送温箱培养的物品，应做好标记后送到指定地点。
5．实验过程中发生差错或意外事故时，禁止隐瞒或自作主张不按规定处理，应立即报告老师进行正确的处理。
如有传染性的材料污染桌面、地面等，应立即用0. 2%~0. 5% “84”消毒液浸泡污染部位，作用5～10min后方可抹去。
如手被活菌污染也应使用上述消毒液浸泡5～10min后，再以自来水反复冲洗干净。
6．爱护室内仪器设备，严格按操作规则使用。
节约使用实验材料，不慎损坏了器材等，应主动报告老师进行处理。
7．实验完毕，应物归原处并将桌面整理清洁，实验室打扫干净。
最后以0.2%~0. 5% “84”消毒液浸泡手5min，洗净后方可离开实验室。
第一篇微生物学实验基本技术第一章常用仪器及无菌室简介实验1常用仪器及无菌室简介微生物学是一门实验性很强的医学基础学科，微生物学实验教学在整个微生物学的教学过程中占有很大的比重。
所以有必要加强微生物学的实验教学工作。
而要搞好微生物学的实验教学，必需具备一些基本实验条件。
本部分简要介绍微生物学实验的一些常用仪器和其它基本实验条件。
一、灭菌器（一）高压蒸气灭菌器1．构造及原理：此种灭菌器为一个双层的金属圆筒，两层之间盛水。
外层为坚厚的金属板，其上有金属厚盖，盖旁有螺旋，借以扣紧厚盖，厚盖与锅体之间为密封圈，使蒸气不能外溢。
加热后，随着锅内蒸气压力的升高，其温度也相应增高，从而达到使待灭菌物品灭菌的目的。
细菌室无菌操作流程
细菌室无菌操作流程一般来说细菌实验室是进行细菌学实验的场所。
细菌实验室一般用于标本的接种、培养、分离、鉴定及药敏试验等工作都要在细菌实验室完成。
细菌室实验室的建设要求有以下几个方面：1、细菌实验室必须安装严密的门窗，以防室内环境受到外界的污染。
且室内禁用风扇，避免细菌的播散。
2、细菌实验室室必须安装供空气消毒的紫外线灯，置于操作台上面lm处，每天开始工作前照射20min。
对其消毒效果要定期检查，及时更换失效的灯管。
3、细菌实验室内应备有消毒医学教育网整理剂，用于试验中发生菌液洒溅时的及时消毒处理。
同时还应备有供工作人员浸手用的盛有消毒剂的水盆、肥皂及自来水源等。
4、细胞实验室内操作台须每日用消毒剂擦洗，地面至少一周用消毒剂擦洗1次。
5、对接收的标本、无菌器具、用过的物品等应明显分开并放在指定位置。
同时要对用过的物品及时进行灭菌处理。
6、细菌实验室根据当地的气温特点，安装空调机，以适合细菌实验工作。
同时室内应设置必要的消防设备。
细菌室无菌操作流程：1、试验前将被检样品及试验用品放入传递窗，关闭外门，打开紫外灯，照射30分钟。
2、打开过滤风机、紫外灯和电源开关，紫外灯照射30分钟。
3、工作人员进入工作室前洗手，在缓冲间内穿戴无菌衣、帽、口罩、更换拖鞋后，通过风淋室，全身各面进行风淋，进入工作室。
4、用消毒剂消毒手和腕部，将所需物品经传递窗传进。
5、工作期间不得进出工作室。
试验结束后，即时清洁台面和地面，室内留用物品摆放整齐，其他物品经传递窗传出。
工作人员关好内门，进入缓冲间，更换拖鞋和无菌衣，离开工作室，打开紫外灯照射30分钟。
6、打开传递窗，取出接种好的培养物送去培养，剩余样品根据试验室有关规定妥善处理。
7、关闭风机和紫外灯电源。
微生物实验室灭菌管理规程
微生物实验室灭菌管理规程1目的建立一个规范的灭菌管理规程，保证灭菌质量，保证检测结果。
2范围适用于本公司的微生物实验室灭菌管理。
3职责3.1文件起草人员：负责确保按照相关规程所规定的格式进行文件的编写，并根据审核人员及批准人员的意见进行修改，直至文件得到批准。
3.2审核人：负责对本部门及与本部门有关的文件进行格式审核，并提出相应的意见。
4含义及定义4.1灭菌系指物理或化学等方法杀灭或去除所有致病和非致病微生物繁殖体和芽孢的手段。
5 内容5.1灭菌操作过程5.1.1使用准备5.1.1.1检测水位，水平面高于水位器2—3毫米即可5.1.1.2将要准备好要灭菌的物品放入锅内，张贴灭菌指示条。
5.1.1.3将容器盖闭合，密封圈贴合，旋紧六个环头螺栓。
5.1.1.4看压力阀是否在关闭状态，如果不在请将其关闭。
5.1.1.5将泄气管放在一个容器里，防止蒸汽乱喷，误伤到人员。
5.1.2接通电源，打开开关。
5.1.3设定参数5.1.3.1按设定键1 次，显示温度代码（SP）设定灭菌温度。
5.1.3.2按设定键2,次，显示时间代码（ST）设定灭菌时间5.1.3.3按设定键3次,显示干燥时间代码（GST）设定干燥时间5.1.3.4按设定键4次，显示灭菌种类代码（JSHS）0为液体类，1为非液体类。
5.1.3.5根据自己所灭菌物品，设定好程序，等待返回主界面（既显示实时温度），按动启动按键开始灭菌工作。
5.2程序的选择5.2.1液体类：根据液体培养基121℃，15分钟，有其他特殊培养基，根据培养基说明，进行修改程序。
5.2.1非液体类：121℃，30分钟，有特殊情况，根据要求进行修改程序。
5.3注意事项5.3.1灭菌结束后，关闭电源，等待压力变指针归零，及时打开容器盖取出灭菌物品。
5.3.2灭菌物品从灭菌器中取出后，应仔细观察包装的完整性，若有破损不可作为无菌使用。
5.3.3检查灭菌指示条颜色是否有变化，诺无变化需要重新灭菌，将以灭好菌的物品和未灭菌的物品单独放置，防止二次污染。
灭菌操作规程(清晰整齐)
灭菌操作规程一、微生物检验器皿的包扎1、目的杀菌前的准备工作2、所用器具(1)、棉花(2)、橡胶塞(3)、牛皮纸或报纸(4)、棉绳3、操作方法(1)、试管：塞上棉塞，然后用牛皮纸或报纸把试管头包扎起来。
做乳糖胆盐培养基时，将试管头塞上专用塑料塞放入铁丝框。
(2)、吸移液管：将吸移液管一头塞上棉塞，然后单支或几只用纸包起来，或用盒装。
(3)、三角瓶、抽滤瓶：将三角瓶（抽滤瓶）口用棉塞塞好，或塞上橡胶塞，然后用牛皮纸把塞头部包起来。
(4)、玻璃洗瓶：将玻璃洗瓶瓶口用棉塞或橡胶塞塞好，用牛皮纸把塞头部包起来。
(5)、磁性漏斗：用牛皮纸或报纸将磁性漏斗整个包扎起来。
(6)、平皿：10 个为一组，用牛皮纸包裹或盒装。
二、高压蒸汽灭菌1、适用范围本法适用耐湿热器具的灭菌如：(1)、易分解的、耐热性的培养基(2)、耐热性好的玻璃器皿(3)、橡胶(4)、耐热性塑料2、原理利用1.5kgf/cm2，121℃的饱和蒸汽，灭菌20分钟。
4、仪器和设备高压灭菌锅5、操作方法(1)、包装a.装入培养基的（箱）瓶用螺旋盖盖上，容器用棉塞塞住，再用牛皮纸包扎。
螺旋盖应微松。
b.在瓶中的培养液不要超过1L，否则灭菌不彻底。
c.容器的上部应留有足够的空间，以便产生气泡。
d.器具用牛皮纸包裹，放入灭菌袋中。
e.器具的组合和包裹应允许灭菌蒸汽接触所用物品。
f.各类器具装入釜内时，相互间要留有空隙以使蒸汽自由流动。
(2)、高压杀菌a.在灭菌器内加入适量的水（不得低于釜底指示横片，露出加热盘管），放入需灭菌物品，盖上内盖，拧紧外盖上的螺栓。
拧紧时要注意对称的进行，否则容易造成漏气。
b.开始加热前，将排气阀打开。
c.待温度上升至100 oC 时（即当所有的冷空气已排出时），关闭放汽阀门，使压力上升至1.05kgf/cm2（15 磅/英吋2），在此压力下维持20 分钟。
注意：加热时间不要过长，但也不要低于指定的20分钟。
(3)、断开电源。
(4)、排气阀关闭的状态下，让釜内压力自然下降。
微生物检验操作规程
微生物检验操作规程
1、实验前用75%酒精擦净台面及四周，放好需用的实验器材及各种溶液，开紫外灯消毒30分钟。
2、进入无菌室前应用肥皂洗手，然后用75%酒精球棉将手擦干净。
3、进入无菌间必须穿的专用工作服、帽及拖鞋、口罩，应放在无菌室缓冲间，工作前经紫外线消毒后使用。
4、使用的吸管、平皿及培养基等必须经消毒灭菌，打开包装未使用的器皿，不能放置再用，消毒用器皿放置不得超过一周。
5、从包装中取出吸管时，吸管尖部不能触及外露部位及试管或平皿边。
6、接种样品必须在酒精灯前操作，接种样品时，吸管从包装中取出后及打开试管塞都要通过火焰消毒。
7、实验完毕，清洁瓷砖台面。
8、用过的器材进行整理，污染细菌的器材需经高压灭菌或煮沸消毒。
9、实验者在实验后用肥皂清洗双手或将双手浸泡于0.2%过氧乙酸溶液中3分钟，用清水冲洗，再用肥皂清洗双手。
10、换下的隔离衣、帽等进行紫外线消毒，拖鞋放回原
处。
11、用毕，再开紫外灯消毒30分钟。
12、无菌室和缓冲间每周大扫除一次，保持整洁。
13、每月进行一次紫外线对空气消毒效果测定，如灯管发黑，超过使用期限，及时更换紫外灯管。
微生物实验室操作规范及其仪器的使用
微生物实验室操作规程1.工作人员加强有菌观念，无菌操作。
工作人员加强有菌观念，无菌操作。
2.每日工作前用紫外线照射实验室半小时以上。
3.入室前应穿工作服，并做好实验前的各项准备工作。
4.实验室内应保持肃静，不准吸烟、吃东西及用手触摸面部。
尽量减少室内活动，以免引起风动，无关人员禁入。
5.非必要物品禁止带入实验室，必要资料和书籍带入后，应远离操作台。
6.做好标本的登记、编号及试验记录。
未发出报告前，请勿丢弃标本。
7.标本处理及各项试验应在操作间进行，接种环用完后应立即火焰灭菌，沾菌吸管、玻片等用后应浸泡在消毒液内。
8.实验时手部污染，应立即用过氧乙酸消毒或浸于 3%来苏儿溶液中 5-1010分，再用肥皂洗手并冲洗干净；如误入口内，应立即吐出，并用 1:1000高锰酸钾溶液或 3%双氧水漱口，根据实际情况服用有关药物。
9.实验过程中，如污染了实验台或地面，应用 3%来苏儿覆盖其上半小时，然后清洗；如污染工作服，应立即脱下，高压灭菌。
10.使用后的载玻片、盖片、平皿、试管等用消毒液浸泡，经煮沸后清洗或丢弃。
试管等用消毒液浸泡，经煮沸后清洗或丢弃。
11.所有微生物培养物，不管标本阳性或阴性均用消毒液浸泡后，经煮沸消毒，才能清洗或丢弃。
12.取材、最好采用一次性工具，不能采用一次性工具者，每次取材前均应彻底消毒。
13.若出现着火情况，应沉着处理，切勿慌张，立即关闭电闸，积极灭火。
易燃物品（如酒精、二甲苯、乙醚和丙酮等）必须远离火源，妥善保存。
14.工作结束时检查电器、酒精灯等是否关闭，观察记录培养箱、冰箱温度及工作情况，用浸有消毒液的抹布将操作台擦拭干净，并将试剂、用具等放回原处，清理台面，未污染的废弃物扔进污物桶，有菌废弃物应送高压灭菌后处理。
15.离室前工作人员应将双手用消毒液消毒，并用肥皂和清水洗净。
16.爱护仪器设备，遵守仪器使用规范，经常清洁，注意防尘和防潮。
每天观察培养箱、冰箱、干燥箱的温度，并做好记录。
无菌实验室操作规程
无菌实验室操作规程标题：无菌实验室操作规程引言概述：无菌实验室是进行微生物实验和细胞培养的重要场所，保持实验室内的环境无菌是保证实验结果准确性和可靠性的关键。
因此，制定严格的无菌实验室操作规程对于实验室的正常运行至关重要。
一、实验室准备1.1 清洁实验室环境：在进行任何实验操作之前，需要确保实验室环境处于干净整洁状态，定期进行地面、工作台、设备等物体的清洁消毒。
1.2 检查实验室设备：确保实验室设备正常运转，无菌操作所需的设备如无菌工作台、培养箱、离心机等都应处于正常状态。
1.3 准备实验所需物品：准备好实验所需的培养基、培养皿、试管、移液器等物品，并确保这些物品都是经过灭菌处理的。
二、个人准备2.1 穿戴无菌实验服：进入无菌实验室前，必须穿戴干净的无菌实验服、手套、口罩等防护用具，以防止外界微生物污染实验。
2.2 洗手消毒：进入实验室后，首先要进行手部消毒，使用75%酒精或其他消毒剂进行彻底的手部消毒，保持双手干净。
2.3 保持个人卫生：在实验室内不得吃东西、喝水，避免将细菌带入实验室，保持个人卫生是无菌操作的基本要求。
三、无菌操作3.1 打开无菌工作台：在进行无菌操作时，要先打开无菌工作台，等待工作台内的空气流通，确保工作环境处于无菌状态。
3.2 消毒实验台面：在工作台上进行操作前，先用75%酒精或其他消毒剂对工作台面进行消毒处理，保持工作环境无菌。
3.3 严格遵守操作规程：在进行细胞培养、微生物实验等操作时，要严格按照操作规程进行，避免操作失误导致实验结果不准确。
四、实验后处理4.1 清洁工作环境：实验结束后，要及时清洁工作台、设备等物品，保持实验室环境的整洁和无菌状态。
4.2 处理实验废物：将实验所产生的废物如培养皿、试管等进行分类处理，按规定方式进行消毒处理或丢弃。
4.3 记录实验结果：在实验结束后，要及时记录实验结果，包括实验操作步骤、结果数据等信息，以备后续分析和参考。
五、定期检查和维护5.1 定期检查设备：定期对实验室设备进行检查和维护，确保设备的正常运转，避免设备故障影响实验结果。
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食品卫生微生物检验实验室操作要求食品微生物实验室工作人员，必须有严格的无菌观念，许多试验要求在无菌条件下进行，主要原因：一是防止试验操作中人为污染样品，二是保证工作人员安全，防止检出的致病菌由于操作不当造成个人污染。
一、无菌操作要求1.接种细菌时必须穿工作服、戴工作帽。
2.进行接种食品样品时，必须穿专用的工作服、帽及拖鞋，应放在无菌室缓冲间，工作前经紫外线消毒后使用。
3.接种食品样品时，应在进无菌室前用肥皂洗手，然后用75％酒精棉球将手擦干净。
4.进行接种所用的吸管，平皿及培养基等必须经消毒灭菌，打开包装未使用完的器皿，不能放置后再使用，金属用具应高压灭菌或用95%酒精点燃烧灼三次后使用。
5.从包装中取出吸管时，吸管尖部不能触及外露部位，使用吸管接种于试管或平皿时，吸管尖不得触及试管或平皿边。
6.接种样品、转种细菌必须在酒精灯前操作，接种细菌或样品时，吸管从包装中取出后及打开试管塞都要通过火焰消毒。
7.接种环和针在接种细菌前应经火焰烧灼全部金属丝，必要时还要烧到环和针与杆的连接处，接种结核菌和烈性菌的接种环应在沸水中煮沸5min，再经火焰烧灼。
8.吸管吸取菌液或样品时，应用相应的橡皮头吸取，不得直接用口吸。
二、无菌间使用要求1.无菌间通向外面的窗户应为双层玻璃，并要密封，不得随意打开，并设有与无菌间大小相应的缓冲间及推拉门，另设有0.5-0.7m2的小窗，以备进入无菌间后传递物品。
2.无菌间内应保持清洁，工作后用2%-3%煤酚皂溶液消毒，擦拭工作台面，不得存放与实验无关的物品。
3.无菌间使用前后应将门关紧，打开紫外灯，如采用室内悬吊紫外灯消毒时，需30W 紫外灯，距离在1.0m处，照射时间不少于30min，使用紫外灯，应注意不得直接在紫外线下操作，以免引起损伤，灯管每隔两周需用酒精棉球轻轻擦拭，除去上面灰尘和油垢，以减少紫外线穿透的影响。
4.处理和接种食品标本时，进入无菌间操作，不得随意出入，如需要传递物品，可通过小窗传递。
5.在无菌间内如需要安装空调时，则应有过滤装置三、消毒灭菌要求微生物检测用的玻璃器皿、金属用具及培养基、被污染和接种的培养物等，必须经灭菌后方能使用。
（一）干热和湿热高压蒸气锅灭菌方法1．灭菌前准备（1）所有需要灭菌的物品首先应清洗晾干，玻璃器皿如吸管、平皿用纸包装严密，如用金属筒应将上面通气孔打开。
（2）装培养基的三角瓶塞，用纸包好，试管盖好盖，注射器须将管芯抽出，用纱布包好。
2．装放（1）干热灭菌器：装放物品不可过挤，且不能接触箱的四壁。
（2）大型高压蒸气锅：放置灭菌物品分别包扎好，直接放入消毒筒内，物品之间不能过挤。
3．设备检查（1）检查门的开关是否灵活，橡皮圈有无损坏，是否平整。
（2）检查压力表蒸气排尽时是否停留在零位，关好门和盖，通蒸气或加热后，观察是否漏气，压力表与温度计所标示的状况是否吻合，管道有无堵塞。
（3）对有自动电子程序控制装置的灭菌器，使用前应检查规定的程序，是否符合于进行灭菌处理的要求。
4．灭菌处理(1)干热灭菌法：此法适应于在干热情况下，不损坏、不变质、不蒸发的物品、较常用于玻璃器皿、金属制品、陶瓷制品等的灭菌。
①器械器皿应清洗后再干烤，以防附着在表面的污物炭化。
②灭菌时安放物品不能过挤，不要直接接触底和箱壁，物品之间留有空隙。
③菌时将箱门关紧，接上电源，先将排气孔打开约30min，排除灭菌器中的冷空气，温度升至160℃调节指示灯，维持1.5–2h。
④灭菌完毕后或温度升温过程中，须在60℃以下才能打开箱门。
(2)手提式高压锅或立式压力蒸气灭菌器的使用应按下列步骤进行：①手提式高压锅在主体内加入3L清水，立式高压锅加水16L（重复使用时应将水量补足，水变混浊需更换）.②手提式压力锅将顶盖上的排气管插入消毒桶内壁的方管中（无软管或软管锈蚀破裂的灭菌器不得使用）。
③盖好顶盖拧紧，勿使漏气；置灭菌器于火源上加热，立式压力锅通上电源，并打开顶盖上的排气阀放了冷气（水沸腾后排气10-15min）。
④关闭排气阀，使蒸气压上升到规定要求，并维持规定时间（按灭菌物品性质与有关情况而定）。
⑤达到规定时间后，对需干燥的物品，立即打开排气阀排出蒸气，待压力恢复到零时，自然冷却至60℃后开盖取物，如为液体物品，不要打开排气阀，而应立即将锅去除热源，待自然冷却，压力恢复至零，温度降到60℃以下再开盖取物，以防突然减压液体剧烈沸腾或容器爆破。
(3)卧式压力锅蒸气灭菌器的使用按下列步骤进行：①关紧锅门，打开进气阀，将蒸气引入夹层进行预热，夹层内冷空气经阻气器自动排出。
②夹层达到预定温度后，打开锅室进气阀，将蒸气引入锅室，锅室内冷空气经锅室阻气器自动排出。
③待锅室达到规定的压力与温度时，调节进气阀，使保持恒定至④自然或人工降温至60℃再开门取物，不得使用快速排出蒸气法，以防突然降压，液体剧烈沸腾或容器爆破。
⑤使用自动程序控制式压力蒸气灭菌器，在放好物品关紧门后，应根据物品类别按动相应开关，以便按要求程序自动进行灭菌，灭菌时必须利用附设仪表记录温度与时间以备查，操作要求应严格按照厂家说明书进行。
5．灭菌温度与时间(1)干热灭菌器灭菌温度160℃，1.5-2h。
(2)压力蒸气灭菌锅灭菌温度与时间（二）间歇灭菌方法1.灭菌方法系利用不加压力的蒸气灭菌，某些物质经高压蒸气灭菌容易破坏，可用此法灭菌。
（1）将欲灭菌物品置于锅内，盖上顶盖，打开排水口，使器内余水排尽。
（2）关闭排水口，打开进气门，根据需要消毒10～20min。
（3）灭菌完毕关闭进气门，取出物品待冷至室温温度，放入37℃温箱过夜，次日仍按上述方法消毒，如此三次，即可达到灭菌目的。
2．血清凝固器使用方法，培养基中含有血清或鸡蛋特殊成份时，因高热会破坏其营养成份，故用低温，可使血清凝固，又可达到灭菌目的。
(1)在使用该法灭菌的血清等分装时，需严格遵守无菌操作，试管、平皿也经灭菌后使用。
(2)将培养基按要求使成斜面或高层，加足水后，接上电源，升温75～90℃1h灭菌，放37℃温箱过夜，再如此灭菌三次。
3．煮沸消毒：可用煮锅或煮沸消毒器，水沸腾后再煮5～15min，也可在水中加入2﹪石炭酸煮沸5min，加入0.02﹪甲醛,80℃煮60min均可达到灭菌目的,但选用煮沸消毒的增消剂时,应注意对物品的腐蚀性.4．灭菌处理:灭菌后物品,按正常情况已属无菌,从灭菌器中取出应仔细检查放置,以免再度污染。
(1)物品取出,随即检查包装的完整性,若有破坏或棉塞脱掉,不可作为无菌物品使用。
(2)取出的物品,如为包装有明显的水浸者,不可作为无菌物品使用。
(3)培养基或试剂等,应检查是否符合达到灭菌后的色泽或状态,未达到者应废弃。
(4)启闭式容器,在取出时应将筛孔关闭。
(5)取出的物品掉落在地或误放不洁这处,或沾有水液,均视为受到污染,不可作为无菌物品使用。
(6)取出的合格灭菌物品,应存放于贮藏室或防尘柜内,严禁与未灭菌物品混放。
(7)凡属合格物品,应标有灭菌日期及有效期限。
(8)每批灭菌处理完成后,记录灭菌品名、数量、温度、时间、操作者。
四、有毒有菌污物处理要求微生物实验所用实验器材、培养物等未经消毒处理，一律不得带出实验室。
1.经培养的污染材料及废弃物应放在严密的容器或铁丝筐内，并集中存放在指定地点，待统一进行高压灭菌。
2.经微生物污染的培养物，必须经121℃30min高压灭菌。
3.染菌后的吸管，使用后放入5﹪煤酚皂溶液或石炭酸液中，最少浸泡24h（消毒液体不得低于浸泡的高度）再经121℃30min高压灭菌。
4.涂片染色冲洗片的液体，一般可直接冲入下水道，烈性菌的冲洗液必须冲在烧杯中，经高压灭菌后方可倒入下水道，染色的玻片放入5﹪煤酚皂溶液中浸泡24h后，煮沸洗涤。
做凝集试验用的玻片或平皿，必须高压灭菌后洗涤。
5.打碎的培养物，立即用5﹪煤酚皂溶液或石炭酸液喷洒和浸泡被污染部位，浸泡半小时后再擦拭干净。
污染的工作服或进行烈性试验所穿的工作服、帽、口罩等，应放入专用消毒袋内，经高压灭菌后方能洗涤。
五、培养基制备要求培养基制备的质量将直接影响微生物生长。
因为各种微生物对其营养要求不完全相同，培养目的的不同，各种培养基制备要求如下：1．根据培养基配方的成分按量称取，然后溶于蒸馏水中，在使用前对应用的试剂药品应进行质量检验。
2．PH测定及调节：PH测定要在培养基冷至室温时进行，因在热或冷的情况下，其PH 有一定差异，当测定好时，按计算量加入碱或酸混匀后，应再测试一次。
培养基PH值一定要准确，否则会影响微生物的生长或影响结果的观察。
但需注意因高压灭菌可影响一些培养基的PH降低或升高，故不宜灭菌压力过高或次数太多，以免影响培养基的质量，指示剂、去氧胆酸钠、琼脂等一般在调完PH后再加入。
3．培养基需保持澄清，便于观察细菌的生长情况，培养基加热煮沸后，可用脱脂棉花或绒布过滤，以除去沉淀物，必要时可用鸡蛋白澄清处理，所用琼脂条要预先洗净晾干后使用，避免因琼脂含杂质而影响透明度。
4．盛装培养基不宜用铁、铜等容器，使用洗净的中性硬质玻璃容器为好。
5．培养基的灭菌既要达到完全灭菌目的，又要注意不因加热而降低其营养价值，一般121℃15min即可，如为含有不耐高热物质的培养基如糖类、血清、明胶等，则应采用低温灭菌或间歇法灭菌，一些不能加热的试剂如亚碲酸钾、卵黄、TTC、抗菌素等，待基础琼脂高压灭菌后凉至50℃左右再加入。
6．每批培养基制备好后，应做无菌生长试验及所检菌株生长试验。
如果是生化培养基，使用标准菌株接种培养，观察生化反应结果，应呈正常反应，培养基不应贮存过久，必要时可置4℃冰箱存放。
7．目前各种干燥培养基较多，每批需用标准菌株进行生长试验或生化反应观察，各种培养基用相应菌株生长试验良好后方可应用，新购进的或存放过久的干燥培养基，在配制时也应测PH，使用时需根据产品说明书用量和方法进行。
8．每批制备的培养基所用化学试剂、灭菌情况及菌株生长试验结果、制作人员等应做好记录，以备查询。
六、样品采集及处理要求1．所采集的检验样品一定要具有代表性，采样时应首先对该批食品原料、加工、运输、贮藏方法条件、周围环境卫生状况等进行详细调查，检查是否有污染源存在。
2．根据食品的种类及数量，采样数量及方法应按标准检验方法的要求进行。
3．采样应注意无菌操作，容器必须灭菌，避免环境中微生物污染，容器不得使用煤酚皂溶液，用新洁尔灭、酒精等消毒药物灭菌，更不能含有此类消毒药物或抗生素类药物，以避免杀死样品中的微生物，所用剪、刀、匙用具也需灭菌方可应用。
4．样品采集后应立即送往检验室进行检验，送检过程中一般不超过3h，如路程较远，可保存在1～5℃环境中，如需冷冻者，则在冻存状态下送检。
5．检验室收到样品后，进行登记（样品名称、送检单位、数量、日期、编号等），观察样品的外观，如果发现有下列情况之一者，可拒绝检验。