三种去污剂
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Tween
吐温为一类非离子型去污剂,溶于水、乙醇、油脂。
生物学实验中乳化蛋白,在使用时,Tween 和同类型的Triton X-1OO(聚乙二醇辛基苯基醚)非离子型去污剂不破坏蛋白的结构,可减少对蛋白质之间原有的相互作用的破坏。离子型去污剂如SDS则破坏蛋白的结构。
Triton X-1OO
可溶解于: 水、乙烷基异丙醇、甲苯、二甲苯和多数含氯溶液。Triton X-100是一种非离子型表面活性剂(或称去污剂),它能溶解脂质,以增加抗体对细胞膜的通透性。
考虑某一去垢剂的特殊性质.如triton X-100在280nm处有吸收,如果某蛋白质的测试与280nm处的吸收有关,就应避免使用这类去垢剂.
SDS(十二烷基磺酸钠)
易溶于热水,溶于热乙醇,不溶于石油醚。属阴离子表面活性剂,具有优异的渗透、洗涤、润湿、去污和乳化作用。
一般有去垢剂(如SDS)溶解膜蛋白后形成SDS-融膜蛋白,并由羟基磷灰石为固定相的柱子分离纯化。羟基磷灰石柱具有阴离子磷酸基团(P-端),又具有阳离子钙(C-端),与固定相结合主要决定于膜蛋白的大小、SDS结合量有关。利用原子散射法研究cAMP的分离机制发现,样品与SDS结合后在离子交换柱上存在SDS分子、带电荷氨基酸与固定相中带电离子间的交换,从而达到分级分离的目的。