交叉配血图示(3)
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交叉配血知识ppt课件
3
三 四 四
2018/11/23
标本的采集与要求
2018/11/23
4
1.标本要新鲜:
标本要具有代表性， 能代表患者目前状况
前三个月内输血或妊娠:配血试验标本抽取<48h,
避免因回忆反应产生的抗体漏检。 新近的输血或妊娠：可引起意外抗体迅速出现,如 果对病人的输血史或人身史不明,使用的标本必须是 输血前48h内抽取的。 血量约为5ml 。
1)重新抽样，纠正因污染或搞错标本造成的不符。 2)将红细胞洗涤数次，配成5%盐水细胞悬液，用抗A、抗B、抗A+B做实验， 可得到其他有用信息。有条件加做抗H试验 3)对受检者作直接抗人球蛋白试验，看RBC有没有被致敏 4)如疑为A抗原或B抗原减弱，可将受检红细胞与抗A或抗B血清作吸收放散 试验。 5)如试验结果红细胞成缗钱状排列，加等渗盐水1滴混匀，往往可使缗钱现 象消失。 6)做反定型试验时需要加做O细胞。
被检血清 + 抗体筛选细胞 → 盐水介质或非盐水介质（凝聚胺、抗球蛋白、酶）
对Kell系统抗体不理想，阴性结果 需做抗球。中国人群几乎100%为 筛选III 病人红细胞 kk型，具有K抗原的几乎为0，至今 未发现Kell系统抗体
1.
筛选细胞I
筛选II
病人血清
凝聚胺含多价阳 离子，中和RBC 表面负电荷，减 少RBC间距离
要是经输血或妊娠等免疫刺激产生。
血型抗体是体内免疫系统所产生的针对血型抗原发生特
异性反应的一类免疫球蛋白类物质。人类血清中有5种类 型：G、M、A、D、E，其中IgM、G是最重要的2种抗体 。
RBC血型抗体分为：
完全抗体：能在盐水中凝集相应RBC，
又称盐水抗体。 主要是分子量较大的IgM
三 四 四
2018/11/23
标本的采集与要求
2018/11/23
4
1.标本要新鲜:
标本要具有代表性， 能代表患者目前状况
前三个月内输血或妊娠:配血试验标本抽取<48h,
避免因回忆反应产生的抗体漏检。 新近的输血或妊娠：可引起意外抗体迅速出现,如 果对病人的输血史或人身史不明,使用的标本必须是 输血前48h内抽取的。 血量约为5ml 。
1)重新抽样，纠正因污染或搞错标本造成的不符。 2)将红细胞洗涤数次，配成5%盐水细胞悬液，用抗A、抗B、抗A+B做实验， 可得到其他有用信息。有条件加做抗H试验 3)对受检者作直接抗人球蛋白试验，看RBC有没有被致敏 4)如疑为A抗原或B抗原减弱，可将受检红细胞与抗A或抗B血清作吸收放散 试验。 5)如试验结果红细胞成缗钱状排列，加等渗盐水1滴混匀，往往可使缗钱现 象消失。 6)做反定型试验时需要加做O细胞。
被检血清 + 抗体筛选细胞 → 盐水介质或非盐水介质（凝聚胺、抗球蛋白、酶）
对Kell系统抗体不理想，阴性结果 需做抗球。中国人群几乎100%为 筛选III 病人红细胞 kk型，具有K抗原的几乎为0，至今 未发现Kell系统抗体
1.
筛选细胞I
筛选II
病人血清
凝聚胺含多价阳 离子，中和RBC 表面负电荷，减 少RBC间距离
要是经输血或妊娠等免疫刺激产生。
血型抗体是体内免疫系统所产生的针对血型抗原发生特
异性反应的一类免疫球蛋白类物质。人类血清中有5种类 型：G、M、A、D、E，其中IgM、G是最重要的2种抗体 。
RBC血型抗体分为：
完全抗体：能在盐水中凝集相应RBC，
又称盐水抗体。 主要是分子量较大的IgM
交叉配血(聚凝胺法、微柱凝胶法)PPT课件
5
注意事项：
实验结果必须在3分钟内判读
在冬天气温较低时，某些病人血清中含有冷
凝集素而导致交叉配血假阳性;遇此现象可用 37℃-40℃生理盐水洗涤红细胞并置37℃水 溶中轻轻摇动，观察结果。
精选PPT课件
6
LIM:降低 溶液的离子强度,减少红细胞周围的阳离子云，
可促进抗体和红细胞膜血型抗精原选PP结T课件合。
取洁净小试管2支，1支标记为主侧管，另1支标为次 侧管；
主侧管内加受血者血清2滴、献血者红细胞悬液1滴； 次侧管加献血者血清2滴、受血者红细胞悬液1滴；
每管各加LIM溶液0.6ml，混匀，室温孵育1min;
每管各加2滴聚凝胺溶液，混合后静置15s;
1300g离心15s，倾去上清液；
轻轻摇动试管，目测细胞有无凝集，如无凝集，必须 重做；
7
聚凝胺:集。
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8
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9
重悬液:电荷中精选和PPT课。件
10
精选PPT课件
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12
微柱凝胶卡交叉配血试验
原理：
将受血者、献血者的血清和红细胞，放置主侧和 次侧管的反应室中，放置37℃孵育器中孵育， 如果血清中存在针对红细胞抗原的血型抗体 （lgM型或IgG型）时，红细胞发生凝集，离心 后留在微柱的表面，为阳性；如果血清中不含有 针对红细胞膜上血型抗原的抗体，红细胞下沉到 微柱管的底部，为阴性。
加入2滴重新悬浮液，并轻轻转动试管混合，肉眼观察
结果，必要时用显微镜观察结果。
精选PPT课件
4
结果判断：
主侧管和次侧管内红细胞凝集在1min散开， 则为聚凝胺引起的非特异性凝集，表示受血者 和献血者配血相容。
交叉配血图示(3)
聚凝胺
枸橼酸钠
3 加入枸橼酸钠中和聚凝胺
4 由于不完全抗体的 结合，红细胞的特异 性凝集不消失
不完全抗体
IgG凝集红细胞示意图
IgG 在盐水介质中一般不产生凝集
IgM抗体凝集红细胞示意图
IgGM在盐水介质中产生凝集
抗球蛋白试验
抗球蛋白
红细胞间的距离缩短， IgG产生凝集
酶处理、凝聚胺
IgG凝集红细胞示意图
聚凝胺交叉配血技术示意图1
1 红细胞间有一定间距
聚凝胺
枸橼酸钠
2 加入聚凝胺后，可以 缩短红细胞之间的距离， 使其非特异性凝集
3 加入枸橼酸钠，可以 中和胺交叉配血技术示意图2
1 红细胞上已有不完全 抗体致敏
2 加入聚凝胺后，缩短红 细胞之间的距离，让不完 全抗体可以同时与两个红 细胞结合使其特异性凝集
IgG 在盐水介质中凝集抗原位点多的红细胞
没有血是最不安全的 不输血是最安全的
感谢聆听
1红细胞间有一定间距2加入聚凝胺后可以缩短红细胞之间的距离使其非特异性凝集3加入枸橼酸钠可以中和聚凝胺4红细胞的非特异性凝集消失聚凝胺交叉配血技术示意图1聚凝胺枸橼酸钠1红细胞上已有不完全抗体致敏2加入聚凝胺后缩短红细胞之间的距离让不完全抗体可以同时与两个红细胞结合使其特异性凝集3加入枸橼酸钠中和聚凝胺4由于不完全抗体的结合红细胞的特异性凝集不消失聚凝胺交叉配血技术示意图2聚凝胺枸橼酸钠不完全抗体igg凝集红细胞示意图igg在盐水介质中一般不产生凝集igm抗体凝集红细胞示意图iggm在盐水介质中产生凝集抗球蛋白试验抗球蛋白红细胞间的距离缩短igg产生凝集酶处理凝聚胺igg凝集红细胞示意图igg在盐水介质中凝集抗原位点多的红细胞没有血是最不安全的不输血是最安全的感谢聆听
交叉配血试验课件
实验二 交叉配血试验
一、凝聚胺配血法
目的 掌握凝聚胺交叉配血法的原理、方法。 原理 红细胞表面带有大量的负电荷，凝聚胺 溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞 表面的负电荷，缩短红细胞之间的距离，使 红细胞产生非特异性的集聚。悬浮液具有中 和凝聚胺的作用，使正常的红细胞非特异性 凝集散开，试验结果为阴性；如果红细胞被 相应的抗体致敏，则凝集就不会散开，试验 结果为阳性。
注意事项
1.肝素治疗患者，多加几滴聚凝胺以中 和肝素。 2.试剂使用前请放置至室温平衡后再行 操作。
3.天冷时，冷凝集素会干扰交叉配血。 4.按说明书操作。 5.先盐水观察，再做聚凝胺法。
二、抗人球蛋白法配血试验
目的 掌握抗人球法原理、方法 原理 检查有无IgG抗体 器材 小试管、滴管、试管架、记号笔、显微
镜、离心机、37℃水浴箱。
试剂 抗人球试剂（多抗）、生理盐水。 标本 静脉血。
操 作
1.标记试管，标明主侧、次侧 2.加样 主侧管：供血者3～5%悬红1滴+受血者血清2滴 次侧管：受血者3～5%悬红1滴+供血者血清2滴 3.离心15秒,观察是否凝集 4.混匀，37℃水浴30min，盐水洗涤3次（快）， 扣干。 5.加抗人球蛋白试剂1滴，混匀，离心15秒。 6.轻摇，观察结果。
注 意 事 项
1.洗涤要迅速，中途不能停，洗彻底。 2.严格把握离心速度和时间。 3.观察结果时，须轻摇。 4.冷凝集素、脐血有网织红细胞、洗涤不充分、抗人球 蛋白血清中含有抗运铁蛋白，可使红细胞凝集。 5.先盐水观察，有溶血标本弃用。 6.加阳性、阴性对照。主侧次侧交叉结束后，加1滴阳性 对照细胞，离心后应有红细胞凝集，若不凝需重做。 7.抗人球试验费时、繁琐，但灵敏度好、特异性强。
一、凝聚胺配血法
目的 掌握凝聚胺交叉配血法的原理、方法。 原理 红细胞表面带有大量的负电荷，凝聚胺 溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞 表面的负电荷，缩短红细胞之间的距离，使 红细胞产生非特异性的集聚。悬浮液具有中 和凝聚胺的作用，使正常的红细胞非特异性 凝集散开，试验结果为阴性；如果红细胞被 相应的抗体致敏，则凝集就不会散开，试验 结果为阳性。
注意事项
1.肝素治疗患者，多加几滴聚凝胺以中 和肝素。 2.试剂使用前请放置至室温平衡后再行 操作。
3.天冷时，冷凝集素会干扰交叉配血。 4.按说明书操作。 5.先盐水观察，再做聚凝胺法。
二、抗人球蛋白法配血试验
目的 掌握抗人球法原理、方法 原理 检查有无IgG抗体 器材 小试管、滴管、试管架、记号笔、显微
镜、离心机、37℃水浴箱。
试剂 抗人球试剂（多抗）、生理盐水。 标本 静脉血。
操 作
1.标记试管，标明主侧、次侧 2.加样 主侧管：供血者3～5%悬红1滴+受血者血清2滴 次侧管：受血者3～5%悬红1滴+供血者血清2滴 3.离心15秒,观察是否凝集 4.混匀，37℃水浴30min，盐水洗涤3次（快）， 扣干。 5.加抗人球蛋白试剂1滴，混匀，离心15秒。 6.轻摇，观察结果。
注 意 事 项
1.洗涤要迅速，中途不能停，洗彻底。 2.严格把握离心速度和时间。 3.观察结果时，须轻摇。 4.冷凝集素、脐血有网织红细胞、洗涤不充分、抗人球 蛋白血清中含有抗运铁蛋白，可使红细胞凝集。 5.先盐水观察，有溶血标本弃用。 6.加阳性、阴性对照。主侧次侧交叉结束后，加1滴阳性 对照细胞，离心后应有红细胞凝集，若不凝需重做。 7.抗人球试验费时、繁琐，但灵敏度好、特异性强。
凝聚胺交叉配血试验 ppt课件
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操作
❖ 1. 取试管两支，标明主侧次侧，主侧管加受 血者血清(血浆)1滴，和供血者3～5％红细胞 悬液(洗涤或不洗涤均可)1滴，次侧管受血者 3～5％红细胞悬液(洗涤或不洗涤均可)l滴， 加供血者血清(血浆)1滴。
❖ 2. 各加LIM溶液3滴，混合均匀后，再各加 Polybrene溶液1滴，并混合均匀，置室温1分钟或 参照说明书。
11
【注意事项】
❖ 1.可以用含EDTA抗凝血浆代替血清使用。 ❖ 2.若受血者血清(血浆)含肝素，如洗肾患者，
须多加4～6滴Po1ybrene溶液以中和肝素。 ❖ 3.试剂使用前请放置至室温平衡后再行操
作。
12
❖ 4.在冬天室温极低的情况下进行交叉配血试 验操作，由于某些受血者血清中可能含有寒 冷凝集素等因素，而导致假阳性的结果出现， 建议进行交叉配血试验操作时室温保持在 22℃左右，最后滴加Resuspending时，将 试管立即置入37℃水浴中，轻轻转动试管混 合，并在30秒内观察结果。
实验三 凝聚胺法交叉配血
医学检验系 张晨光
1
目的：掌握凝聚胺交叉配血法的原理、方法。
原理：聚凝胺分子是带高价阳离子多聚季铵盐，溶
解后带有很多正电荷可以中和红细胞表面负电荷， 有利于红细胞凝聚，低离子强度溶液也能降低红 细胞的Zeta电位 ，可进一步增加抗原抗体间的吸 引力。
当血清中存在IgM或IgG类血型抗体时，与红细胞发生 紧密结合，此时加入枸橼酸盐解聚液以消除聚凝胺的正电 荷，使IgM或IgG类血型抗体与红细胞产生的凝集不散开； 如果血清中不存在IgM或IgG类血型抗体，加入解聚液可使 非特异性凝集消失。
灵敏度高；但费时，准确性和稳定性差。
14
❖ 4.卡式配血（微柱凝胶法）已成为国际安
操作
❖ 1. 取试管两支，标明主侧次侧，主侧管加受 血者血清(血浆)1滴，和供血者3～5％红细胞 悬液(洗涤或不洗涤均可)1滴，次侧管受血者 3～5％红细胞悬液(洗涤或不洗涤均可)l滴， 加供血者血清(血浆)1滴。
❖ 2. 各加LIM溶液3滴，混合均匀后，再各加 Polybrene溶液1滴，并混合均匀，置室温1分钟或 参照说明书。
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【注意事项】
❖ 1.可以用含EDTA抗凝血浆代替血清使用。 ❖ 2.若受血者血清(血浆)含肝素，如洗肾患者，
须多加4～6滴Po1ybrene溶液以中和肝素。 ❖ 3.试剂使用前请放置至室温平衡后再行操
作。
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❖ 4.在冬天室温极低的情况下进行交叉配血试 验操作，由于某些受血者血清中可能含有寒 冷凝集素等因素，而导致假阳性的结果出现， 建议进行交叉配血试验操作时室温保持在 22℃左右，最后滴加Resuspending时，将 试管立即置入37℃水浴中，轻轻转动试管混 合，并在30秒内观察结果。
实验三 凝聚胺法交叉配血
医学检验系 张晨光
1
目的：掌握凝聚胺交叉配血法的原理、方法。
原理：聚凝胺分子是带高价阳离子多聚季铵盐，溶
解后带有很多正电荷可以中和红细胞表面负电荷， 有利于红细胞凝聚，低离子强度溶液也能降低红 细胞的Zeta电位 ，可进一步增加抗原抗体间的吸 引力。
当血清中存在IgM或IgG类血型抗体时，与红细胞发生 紧密结合，此时加入枸橼酸盐解聚液以消除聚凝胺的正电 荷，使IgM或IgG类血型抗体与红细胞产生的凝集不散开； 如果血清中不存在IgM或IgG类血型抗体，加入解聚液可使 非特异性凝集消失。
灵敏度高；但费时，准确性和稳定性差。
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❖ 4.卡式配血（微柱凝胶法）已成为国际安
交叉配血试验临床应用PPT课件
交叉配血试验临床应用
4
实验原理
红细胞表面带有大量的负电荷，悬浮在电解 质溶液中，会吸引大量阳离子，红细胞则被扩散 的双层离子云所围绕，形成zeta电位。
交叉配血试验临床应用
5
实验原理
凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM）降低 介质的离子强度，减少红细胞周围的电子云， 如有红细胞抗原相应的血清抗体存在，则可促 进红细胞抗原与血清抗体的特异结合。
交叉配血试验临床应用
21
临床新进展
流式细胞术 基因分ຫໍສະໝຸດ 技术 卡式微柱凝胶法交叉配血试验临床应用
22
卡式微柱凝胶法
交叉配血试验临床应用
23
卡式微柱凝胶法
交叉配血试验临床应用
24
戴安娜全自动配血系统
卡式微柱凝胶法可实现自动检测
交叉配血试验临床应用
25
二 实验原理
谢谢！ 血型就是红细胞膜上特异抗原的类型。在
11
实验步骤
四、剪下供血者血袋上的血辫，将供血者红 细胞1滴加入主侧管，血浆2滴加入次侧管
交叉配血试验临床应用
12
实验步骤
五、在主次侧各加入低离子溶液各0.65毫 升，混合均匀。
交叉配血试验临床应用
13
实验步骤
六、在主、次侧管分别加入2滴凝聚胺溶液， 混匀后3400r/min离心10秒，弃去上清， 观察红细胞的非特异凝集现象。
交叉配血试验临床应用
26
弃 上 清
交叉配血试验临床应用
14
实验步骤
七、最后各加入悬浮液2滴，轻轻转动试管 混匀并观察结果。
交叉配血试验临床应用
15
实验步骤
八、如果在60秒内，主、侧管凝集均散开， 说明是由凝聚胺溶液引起的非特异性凝集， 配血相合。
交叉配血试验50384精编PPT课件
实验原理
天然IGM类血型抗体与对应的红细胞抗原在室温下盐水介质中发生凝集现象。可以检查供、受者血清中是 否存在破坏对方RBC 的IgM抗体(ABO 血型中抗A 抗B抗体以IgM抗体为主)。 实验步骤 取二试管， 分别注明“主”、“次”字样， 主侧滴入供血者红细胞悬液 一滴和受血者血清一滴；次则滴 入受血者红细胞悬液一滴和供血者血清 一滴。混匀后 1000rpm离心1min， 取出观察结果。 如两侧均 无凝集现象，可多量输血；如主侧无凝集而次侧有凝集只可考虑少量输血；如主侧凝集则不能输血。 低离子聚凝胺介质交叉配血试验 实验原理
Байду номын сангаас
实验原理
微柱凝胶介质交叉配血试验 实验原理 利用抗原抗体特异性反应的作用→通过离心技术→利用凝胶的 微孔过滤作用，将发生凝集反应的RBC阻滞于凝胶之内，而未 凝集的单个RBC则穿过微孔运动至柱底→从而区分有无凝集。 实验步骤 见PPT所述。结果判定肉眼直接观察。
实验注意事项
实验注意事项
1.器材、试剂、反应温度、 离心、标本等注意事项同ABO 血型鉴定。 2.血清优于血浆；不用溶血标本；配血后，标本置冰箱内保存至少7天 。 3. RBC要用生理盐水洗干净。 4.溶血现象， 实质是阳性结果， 为配血不合。 5. ABO血型系统同型而不容，应首先排除ABO血型鉴定是否有误。 6.盐水介质法仅能检测 IgM型RBC血型抗体，不能检测 IgG型 RBC抗体。凝聚胺法 可以检查出IgG 型的血型抗体 7.临床输血进行交叉配血试验时，应当首先进行盐水介质法试验，再进行聚凝胺介 质法试验。 8. 聚凝胺介质法试验尽快观察结果(<3min)
交叉配血试验50384精 编PPT课件
演讲人
目录
01
【实验器材和药品】
动物血液学检查—交叉配血
❖ 猫： 第一次接受输血的时候就需要交叉验血，因为 猫会发生异体抗体反应。因为猫能够发生强烈 的抗A异体抗体，因此如果知道捐血猫的血型 ，就可以用交叉验血预测患病猫的血型。
实验报告
❖ 你们的结果是什么，并对结果进行分析，上 传到班级平台。
❖ 对你的结果进行初步的分析。
实验步骤
❖ 采集血液后直接分装在紫色（EDTA康抗凝 ）和红色（非抗凝血）
❖ 将血液1000g-2500g离心5分钟。利用移液枪 去除血浆；吸取捐血和受血者的血清转移到 干净的试管中，标记做备用。
❖ 抗凝管中红细胞用生理盐水清洗3次：将0.25 毫升的红细胞重悬在2-4毫升的生理盐水中。 离心1分钟，移除上清。然后重复2次后，去 上清。
交叉验血
交叉验血，又叫血型匹配检查，主要是检测 供血者和受血者的血清学是否兼容。跟血型 比，这个主要是识别红细胞膜表面的抗原， 交叉验血主要是检查血浆中是否存在抗体。
交叉验血主验项具有重要的临床意义，是检 查异体患者血清抗体对抗捐献者红细胞的现 象。
❖ 次验项主要是看：异体捐血者的血浆（血清 ）对抗患者的红细胞。这是一个次要考虑的 因素，因为捐赠者的血浆量很少，特别是包 装好的RBC产品。在受血者体内被大量稀释 。
❖ 利用贮存捐赠者的细胞常使用柠檬酸磷酸葡萄糖或者柠 檬酸磷酸右旋糖苷-1 抗凝，加入防腐剂。
❖ 在冰箱内可以短期贮存（一般采集血液后直接做交叉配 血实验）。
稳定性
❖ 整个血液在EDTA中：在收集血液后48～72h 内进行交叉配血实验（尽快)；
❖ 合适的贮存捐赠者的血液：收集血液后在4度 冰箱内可以保存，4-5周。
Microscopic examination
Mix the sample and place a drop onto a slide. No agglutination will be seen if animals have compatible blood types. An incompatible sample will have agglutination (Figure 2.21b).
交叉配血试验ppt课件
7
一、 病人的病史和标本等的检查核对及处理
2．标本的要求: 标本必须有正确的标签。如果标本标签上的内 容与血液申请单上的内容不一致或对病人身份 确认有疑问的话，必须重抽一份新的血液标本， 任何人不得对错误的标签进行修改。
所用血标本能代表患者当前的免疫学状态。输 血前检查的各项试验必须使用3天内采集的血 标本，反复输血的患者更应注意抽取新的标本 作配血试验，避免因回忆反应而产生的抗体漏 检。
批号
效期
厂商
试剂质控 批号变化
通过质控 质控失控 失控原因
1
批号: 12345
2
3
…….
口 改变 口 改变 ……. 口 未改变 口 未改变
日期 签名
55
ABO/RhD定型质控
检测标本时必须设立阳性和阴性对照试验：对照 试验的频次取决于工作模式、使用的方法和试剂 的使用说明
每一批抗-A，抗-B，都必须与A1，B和O细胞有合 适的反应能力。每一批试剂反定型红细胞都必须 与抗-A，抗-B有合适的反应能力。
包括病人的姓名，年龄，床号、住院号及唯一 性标识码，性别，种族，临床诊断，输血史， 药物史，妊娠史。 凡资料填写不全的输血申请单要退回临床科室 补充，不得迁就，也不能通过电话修改。
6
一、 病人的病史和标本等的检查核对及处理
1．病史资料和信息 如果病人以前有过试验，则要注意核查病人以前
检查的血清学试验记录及以往输血反应的记录等。 把以前的ABO、Rh血型和抗体检测的解释同现在 的解释及任何异常情况的解答进行比较。 如既往曾经检出某种血型抗体，即使目前该抗体 检测阴性，也应选择无相关抗原的血液输注。
35
用于ABO反定型的试剂红细胞
A 细胞- 与抗A，抗A1反应4＋，与抗B无反应 B 细胞- 与抗B反应4＋，但与抗A，抗A1无反
一、 病人的病史和标本等的检查核对及处理
2．标本的要求: 标本必须有正确的标签。如果标本标签上的内 容与血液申请单上的内容不一致或对病人身份 确认有疑问的话，必须重抽一份新的血液标本， 任何人不得对错误的标签进行修改。
所用血标本能代表患者当前的免疫学状态。输 血前检查的各项试验必须使用3天内采集的血 标本，反复输血的患者更应注意抽取新的标本 作配血试验，避免因回忆反应而产生的抗体漏 检。
批号
效期
厂商
试剂质控 批号变化
通过质控 质控失控 失控原因
1
批号: 12345
2
3
…….
口 改变 口 改变 ……. 口 未改变 口 未改变
日期 签名
55
ABO/RhD定型质控
检测标本时必须设立阳性和阴性对照试验：对照 试验的频次取决于工作模式、使用的方法和试剂 的使用说明
每一批抗-A，抗-B，都必须与A1，B和O细胞有合 适的反应能力。每一批试剂反定型红细胞都必须 与抗-A，抗-B有合适的反应能力。
包括病人的姓名，年龄，床号、住院号及唯一 性标识码，性别，种族，临床诊断，输血史， 药物史，妊娠史。 凡资料填写不全的输血申请单要退回临床科室 补充，不得迁就，也不能通过电话修改。
6
一、 病人的病史和标本等的检查核对及处理
1．病史资料和信息 如果病人以前有过试验，则要注意核查病人以前
检查的血清学试验记录及以往输血反应的记录等。 把以前的ABO、Rh血型和抗体检测的解释同现在 的解释及任何异常情况的解答进行比较。 如既往曾经检出某种血型抗体，即使目前该抗体 检测阴性，也应选择无相关抗原的血液输注。
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用于ABO反定型的试剂红细胞
A 细胞- 与抗A，抗A1反应4＋，与抗B无反应 B 细胞- 与抗B反应4＋，但与抗A，抗A1无反
交叉配血检验(临床检验课件)
4.在急诊配血时, 对急需情况可采用试管法配血，在15min内发血。 对特急情况应立即发给O型浓缩红细胞或低凝集价的O型全血。然后 尽快复查血型和配血，如表现有配血禁忌，应立即通知负责医师及 时处理。
血型鉴定与交叉配血的异常 责任性错误
假 阴 性 1.标准血清不符合要求 2.被检红细胞抗原性减弱 3. 红 细 胞 悬 液 浓 度 配 置 不 当 4. 将 溶 血 反 应 误 认 为 不 凝 集
微柱凝胶试验原理
凝胶微柱：试管上端、柱体 过滤介质：颗粒直径26～103 nm的葡聚 糖100凝胶，凝胶间缝隙只允许游离红细胞 通过 缓 冲 液：LISS（加或不加抗血清）
微柱凝胶试验原理
将红细胞和抗血清加在凝胶上部反应，离心 后观察凝集的红细胞，被阻挡在小柱中凝胶的上 部或中央，证明发生凝集反应，判断凝集反应阳 性游离的红细胞，被挤过装有过滤介质的小柱， 而到达小柱的底部，证明未发生凝集判断凝集反 应阴性
报告方式
格式Ⅱ： 受血者
供血者
试验 结果
照
血型 血型
PS+DC PC+DS
盐水介质 酶介质 抗球蛋白介质
名：
反应情况 PS+PC 阳性对照 阴性对
签
交叉配血试验
同。
聚凝胺配血法 原理与Rh血型鉴定聚凝胺法原理相
交叉配血试验
聚凝胺配血法的结果如果加入解聚液后观察到 凝集散开，则为聚凝胺引起的非特异性凝集，为 配血相容。
第十四讲 交 叉 配 血
交叉配血试验
交叉配血（cross matching）试验是输血前必须做的红细胞系统的 配合性试验，以确保受者或供者血液没有可测的不相配合的抗原和抗体 成分。可分为主侧配血和次侧配血。
主侧： 受血者血浆
血型鉴定与交叉配血的异常 责任性错误
假 阴 性 1.标准血清不符合要求 2.被检红细胞抗原性减弱 3. 红 细 胞 悬 液 浓 度 配 置 不 当 4. 将 溶 血 反 应 误 认 为 不 凝 集
微柱凝胶试验原理
凝胶微柱：试管上端、柱体 过滤介质：颗粒直径26～103 nm的葡聚 糖100凝胶，凝胶间缝隙只允许游离红细胞 通过 缓 冲 液：LISS（加或不加抗血清）
微柱凝胶试验原理
将红细胞和抗血清加在凝胶上部反应，离心 后观察凝集的红细胞，被阻挡在小柱中凝胶的上 部或中央，证明发生凝集反应，判断凝集反应阳 性游离的红细胞，被挤过装有过滤介质的小柱， 而到达小柱的底部，证明未发生凝集判断凝集反 应阴性
报告方式
格式Ⅱ： 受血者
供血者
试验 结果
照
血型 血型
PS+DC PC+DS
盐水介质 酶介质 抗球蛋白介质
名：
反应情况 PS+PC 阳性对照 阴性对
签
交叉配血试验
同。
聚凝胺配血法 原理与Rh血型鉴定聚凝胺法原理相
交叉配血试验
聚凝胺配血法的结果如果加入解聚液后观察到 凝集散开，则为聚凝胺引起的非特异性凝集，为 配血相容。
第十四讲 交 叉 配 血
交叉配血试验
交叉配血（cross matching）试验是输血前必须做的红细胞系统的 配合性试验，以确保受者或供者血液没有可测的不相配合的抗原和抗体 成分。可分为主侧配血和次侧配血。
主侧： 受血者血浆
交叉配血知识ppt课件
2020/8/17
ppt课件.
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5.正反定型结果不一致
原因：技术、受检红细胞或血清本身
（1）技术和管理错误
器材不洁
—— 假阳
试剂污染或不足 —— 假阳
标本和试剂搞错 —— 假阳 、假阴
离心过度或不足 —— 假阳 、假阴
结果记录或判断错误 —— 假阳 、假阴
漏加试剂
——
假阴
阳性反应产生溶血现象未能识别——假阴
- 细胞成细沙状沿试管壁流下 + 细胞成块状或成齿状沿试管壁流下
切不可用力使劲摇试管，那样凝集颗粒会被摇散，
弱凝集则会误判为阴性。
2020/8/17
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常用的记录符号及所示的凝集强度
4 一个大的凝集块,背景透明,无游离细胞 +
3 数个大凝集块,背景透明,无游离细胞 +
2 许多小凝集块,肉眼可见,大小均匀,背景基本 +W 微透小明凝,有集块游,肉离眼细很胞难看清,背景混浊,要用显微镜观察 1+ 很小的凝集块,肉眼可见,背景不透明,游离细 +O 无胞凝较集多,无,需溶血要,全用部显是微游镜离细观胞察,要用显微镜观察
2020/8/17
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2. 离心力的标准
不同规格离心机，力矩不同，统一离心转速，但
没有统一离心力。
离心转速换算公式：
RCF = 1.118 × 10-5 × (rpm) 2× R (cm)
3. 离心后结果观察注意事项
将试管成30-45℃角拿在手上，细胞扣朝上，手腕
轻轻用力，用液体去冲细胞扣。
2020/8/17
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1.红细胞悬液的配制
血型交叉配血PPT课件
聚凝胺试验
原理：聚凝胺是一种高价阳离子季胺盐多聚物，
溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表 面的负电荷，使红细胞之间距离减小，能引起 正常红细胞可逆性的非特异性凝聚。如果是抗 体致敏的红细胞，加入中和液后，凝集不可逆； 无抗体致敏的红细胞，加入中和液后，凝集解 散。
程序：按试剂盒说明书操作。
间接抗人球蛋白试验(IAT) 在体外抗体致敏红细胞,用于抗体筛选二醇）是一种水溶性的中性
多聚体，当含有抗原与相应抗体的溶液中加入 PEG时，由于空间排斥效应作用，使溶液中的抗 体饱和度提高，加速溶液中的抗原-抗体复合物 的形成。
程序：2滴血清、1滴2-5%的红细胞，加4滴PEG
溶液后混匀，37℃孵育15分钟，生理盐水洗涤3 遍后倾倒上清液，控干，加2滴抗人球蛋白试剂， 离心后判读结果。
免疫血液学的传统方法
凝集实验和溶血实验 玻片法/试管法/微孔板法 抗人球实验
在抗原抗体反应中的去离子和低离子
盐水凝集法： 例如，ABO血型鉴定试验
包括玻片法、试管 法和微孔法
但灵敏度相对较低，只在 一些基层医院血库使用 低离子强度盐水法：
通过降低介质溶液离子 强度，减少红细胞膜外围的 离子云，促进红细胞凝集， 因而其灵敏度有所提高。
LISS-IAT
原理：通过降低红细胞周围的离子氛，使抗体易于接
近抗原，促进抗体在更短的时间内致敏红细胞，再使用 抗人球蛋白试剂，使被致敏的红细胞产生凝集
程序：2滴血清、1滴2-5%的红细胞，加2-4滴LISS液后
混匀，37℃孵育15分钟，离心观察细胞的凝集情况，用 生理盐水洗涤3遍后倾倒上清液，控干，加2滴抗人球蛋 白试剂，离心后判读结果。
微柱凝胶技术(卡)
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IgG 在盐水介质中凝集抗原位点多的红细胞
没有血是最不安全的 不输血是最安全的
感谢聆听
聚凝胺
枸橼酸钠
3 加入枸橼酸钠中和聚凝胺
4 由于不完全抗体的 结合，红细胞的特异 性凝集不消失
不完全抗体
IgG凝集红细胞示意图
IgG 在盐水介质中一般不产生凝集
IgM抗体凝集红细胞示意图
IgGM在盐水介质中产生凝集
抗球蛋白试验
抗球蛋白
红细胞间的距离缩短， IgG产生凝集
酶处理、凝聚胺
IgG凝集红细胞示意图
聚凝胺交叉配血技术示意图1
1 红细胞间有一定间距
聚凝胺
枸橼酸钠
2 加入聚凝胺后，可以 缩短红细胞之间的距离， 使其非特异Байду номын сангаас凝集
3 加入枸橼酸钠，可以 中和聚凝胺
4 红细胞的非特异性 凝集消失
聚凝胺交叉配血技术示意图2
1 红细胞上已有不完全 抗体致敏
2 加入聚凝胺后，缩短红 细胞之间的距离，让不完 全抗体可以同时与两个红 细胞结合使其特异性凝集
交叉配血示意图
世博高新医院输血科 牛树疆
低离子聚凝胺交叉配血技术
➢ 原理：聚凝胺（Polybrene），一种高价阳 离子季胺盐多聚物，溶解后能产生很多正 电荷，可以中和红细胞表面的负电荷，使 红细胞之间距离减少，能引起正常红细胞 可逆性的非特异性凝集。如果使抗体致敏 的红细胞被聚凝胺凝集，则凝集不可逆。
没有血是最不安全的 不输血是最安全的
感谢聆听
聚凝胺
枸橼酸钠
3 加入枸橼酸钠中和聚凝胺
4 由于不完全抗体的 结合，红细胞的特异 性凝集不消失
不完全抗体
IgG凝集红细胞示意图
IgG 在盐水介质中一般不产生凝集
IgM抗体凝集红细胞示意图
IgGM在盐水介质中产生凝集
抗球蛋白试验
抗球蛋白
红细胞间的距离缩短， IgG产生凝集
酶处理、凝聚胺
IgG凝集红细胞示意图
聚凝胺交叉配血技术示意图1
1 红细胞间有一定间距
聚凝胺
枸橼酸钠
2 加入聚凝胺后，可以 缩短红细胞之间的距离， 使其非特异Байду номын сангаас凝集
3 加入枸橼酸钠，可以 中和聚凝胺
4 红细胞的非特异性 凝集消失
聚凝胺交叉配血技术示意图2
1 红细胞上已有不完全 抗体致敏
2 加入聚凝胺后，缩短红 细胞之间的距离，让不完 全抗体可以同时与两个红 细胞结合使其特异性凝集
交叉配血示意图
世博高新医院输血科 牛树疆
低离子聚凝胺交叉配血技术
➢ 原理：聚凝胺（Polybrene），一种高价阳 离子季胺盐多聚物，溶解后能产生很多正 电荷，可以中和红细胞表面的负电荷，使 红细胞之间距离减少，能引起正常红细胞 可逆性的非特异性凝集。如果使抗体致敏 的红细胞被聚凝胺凝集，则凝集不可逆。