第05章 免疫凝集试验

清中特异性抗体的效价，判定抗体生成情况。
二、间接免疫凝集试验的临床应用
抗原的检测： 用于病原体可溶性抗原的检测：如乙型肝炎病毒表面 抗原，细菌、腺病毒及流感病毒等的抗原鉴定和细菌可溶 性产物如外毒素等。 用于检测各种蛋白质成分：如尿液绒毛膜促性腺激素、纤 维蛋白原等血浆蛋白成分等。
间接免疫凝集试验的临床应用
间接免疫凝集试验的概念
间接免疫凝集试验（indirect agglutination）：将 可溶性抗原（或抗体）预先吸附或偶联于与免疫无关、大 小适当的颗粒性载体表面，使之成为抗原（或抗体）
致敏颗粒，然后与相应抗体（或抗原）作用，在适宜
电解质存在的条件下，可出现肉眼可见特异性凝集现 象。
一、间接免疫凝集试验的类型
（一）正向间接免疫凝集试验：测抗体
间接免疫凝集试验的类型
（二）反向间接免疫凝集试验：测抗原
间接免疫凝集试验的类型
（三）间接免疫凝集抑制试验：可测抗原，也可测抗体
间接免疫凝集试验的类型
（四）协同免疫凝集试验：测抗原，原理与反 向间接免疫凝集试验相似。 所用载体是细胞壁含有A蛋白（SPA）的金黄色 葡萄球菌，SPA具有与IgG（IgG3除外）的Fc段结合 的特性。
抗原、抗血清、致敏颗粒试剂和血清标本
抗原的种类、数量、共同抗原决定簇、浓度、稀释剂 、温育时间等。 抗体的浓度以及非特异性凝集抗体的干扰。 未致敏的颗粒不应与实验血清起反应，致敏所用的抗 原或抗体要求纯度高，并具有良好的免疫活性。 血清标本宜新鲜、无污染、无溶血。
试验条件
反应时间：不得少于10分钟 温度：室温(23℃～29℃) 酸碱度：一般为6～8 离子强度： 生理盐水 振荡：混匀后应静置 质量控制措施：必须严格按照相应的标准操作程序操
颗粒 明胶颗粒凝集试验(GAT)：载体为明胶颗粒 炭颗粒凝集试验(CAT)：载体为炭粉微粒 甲苯胺红颗粒凝集试验：载体为甲苯胺红颗粒
第四节 抗球蛋白红细胞免疫凝集试验
重点提示
又称为Coombs试验： 直接Coombs试验 间接Coombs试验
一、直接Coombs试验
用于检测结合于红细胞表面的不完全抗体。
性能稳定，保存期长。 炭粉粒子 甲苯胺红颗粒 ......
三、其他
质控物：标准血清、阳性对照血清、阴性对照血 清等 试剂盒应2℃～8℃保存，切勿冻存，使用前使试 剂接近室温(23℃～29℃)，摇匀后使用。
第八节
影响免疫凝集试验的主要因素
重点提示
抗原因素 抗血清因素 致敏颗粒试剂 血清标本 试验条件
抗人O型红细胞的单克隆抗体。
将之与特异性抗原连接，可用于检测标本中的相应抗
体。
注：待检标本采用受检者的全血
第六节
免疫凝集试验的临床应用
重点提示
直接免疫凝集试验的临床应用 间接免疫凝集试验的临床应用 抗原的检测 抗体的检测
一、直接免疫凝集试验的临床应用
玻片凝集试验：常作定性检测。用已知抗体检测未知 的颗粒性抗原，主要用于细菌菌种的鉴定及分型、ABO血型 鉴定等。 试管凝集试验：可作为半定量检测。多用于测定血清 中某种特异性抗体的效价，以协助临床诊断或供流行病学 调查；在用颗粒性抗原免疫动物后，可用该法测定免疫血
凝集素
agglutinin
玻片凝集试验：定性
试管凝集试验：半定量
第三节
间接免疫凝集试验
重点提示
间接免疫凝集试验的类型 正向间接免疫凝集试验 反向间接免疫凝集试验 间接免疫凝集抑制试验 协同免疫凝集试验 间接免疫血凝试验 颗粒免疫凝集试验 胶乳颗粒凝集试验 明胶颗粒凝集试验 炭颗粒凝集试验 甲苯胺红颗粒凝集试验
重点提示
诊断菌液 载体颗粒 其他
一、诊断菌液
菌种应使用标准株，制备菌液时需经无菌试验证 实细菌确已被杀灭，并采用比浊管比浊调整至所需浓 度。
二、载体颗粒
红细胞：最常用绵羊、家兔、鸡的红细胞及O型人红细 胞。醛化红细胞具有较强的吸附蛋白质抗原或抗体的能力，且 可长期保存而不溶血。
胶乳：聚苯乙烯胶乳颗粒或羧化聚苯乙烯胶乳颗粒。
抗体的检测：
用于检测细菌、病毒、螺旋体、寄生虫等感染后产生
的抗体：如抗人类免疫缺陷病毒抗体、抗溶血素O、梅毒螺 旋体抗体等。 用于检测自身免疫性疾病的抗体：如类风湿因子、抗 DNA抗体和抗甲状腺蛋白抗体等。
用于超敏反应患者的抗体测定：如青霉素抗体、某些
花粉抗体等。
第七节 临床常用免疫凝集试验试剂方法特点
二、间接免疫血凝试验
间接免疫血凝试验：以红细胞作为载体的间接
免疫凝集试验。
用已知抗原或抗体致敏红细胞，检测标本中相 应的抗体或抗原。 根据红细胞凝集的程度判断阳性反应的强弱， 以出现明显凝集的孔为滴度终点。
三、颗粒免疫凝集试验
采用不同颗粒作为载体的间接免疫凝集试验。
胶乳颗粒凝集试验(LAT)：载体为聚苯乙烯胶乳
作，同时可利用阴阳对照血清、标准抗原和参考血清设立
试验对照进行室内质量控制。
本章小结
免疫凝集试验是指颗粒性抗原或覆盖了可溶性抗原（或 抗体）的致敏载体颗粒与相应抗体（或抗原）结合后，在适 宜的电解质条件下出现肉眼可见的凝集现象。包括直接免疫 凝集试验、间接免疫凝集试验等。 根据载体不同有多种试验类型，如协同免疫凝集试验、 间接免疫血凝试验、胶乳颗粒凝集试验、明胶颗粒凝集试验 、炭颗粒凝集试验、甲苯胺红颗粒凝集试验等。Coombs试验 也是临床常用的免疫凝集试验之一。 免疫凝集试验可作定性检测，也可进行半定量检测。 适当的室内质量控制措施可保证检测方法的有效性和检 测结果的可靠性。
二、间接Coombs试验
用于检测游离在血清中的不完全抗体。
第五节
自身红细胞免疫凝集试验
重点提示
自身红细胞免疫凝集试验原理
自身红细胞免疫凝集试验原理
抗人O型红细胞的单克隆抗体。 将之与另一种特异性抗体连接成双功能抗体，可用于
检测标本中相应抗原。
注：待检标本采用受检者的全血
自身红细胞免疫凝集试验原理
Thank you !
第一节
免疫凝集试验的基本原理
重点提示
免疫凝集现象的发生分为两个阶段： 抗原抗体特异性结合阶段
可见的凝集反应阶段
第二节
直接免疫凝集试验
重点提示
直接免疫凝集试验的概念
玻片凝集试验
试管凝集试验
直接免疫凝集试验
直接免疫凝集试验（direct agglutination test）： 细菌、螺旋体和红细胞等颗粒抗原，在适当电解质参与下直 接与相应抗体结合出现肉眼可见的凝集现象 凝集原 agglutinogen
第一章 血液标本采集与处理
临床免疫学检验技术
第五章 免Βιβλιοθήκη Baidu凝集试验
蒋红梅
目 录
第一节 免疫凝集试验的基本原理
第二节 直接免疫凝集试验
第三节 间接免疫凝集试验
第四节 抗球蛋白红细胞免疫凝集试验
第五节 自身红细胞免疫凝集试验 第六节 免疫凝集试验的临床应用 第七节 临床常用免疫凝集试验试剂方法特点 第八节 影响免疫凝集试验的主要因素