免疫标记电镜技术
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免疫标记电镜技术
(1)原理:是利用电镜下可见的示踪标记物标记特异性抗体(或抗原),使之与组织超薄切片中的相应抗原(或抗体)反应,形成不溶
性免疫复合物,用电镜观察可见的标记物,间接证实免疫反应的发生。
(2)常用的免疫标记电镜技术:
①铁蛋白标记免疫电镜技术:抗体与铁蛋白通过低分子量的双功
能试剂结合为一种双分子复合物。
②酶标记免疫电镜技术:是以酶作为抗原抗体反应的标记物,与
相应的酶底物作用,形成一种不溶性的反应产物。包括酶标记抗体法、非标记抗体酶法和非标记的过氧化物酶-抗过氧化物酶技术(即PAP 法)。
③胶体金标记免疫电镜技术:是利用胶体金在碱性环境中带有负
电的性质,使其与抗体相吸附,从而将抗体标记。当用金标记的抗体
与抗原反应时,在光镜水平胶金液呈现鲜艳的樱红色,不需外加染色。