自然沉淀法

一、自然沉淀法

取被检粪便5-10克，加清水100毫升彻底混合使成悬浊液，用40-60目粪筛过滤，弃去粪渣，将滤液收集于烧杯中，静置沉淀15分钟，倾去上层液，保留沉渣，再加水混合，再沉淀，如此反复操作直至上层液透明为止，把上清液倒掉，置沉淀物于载玻片上，加盖玻片，置显微镜下检查。

此法所用粪量少，一次粪检须连看2-3片。

二、饱和盐水漂浮法

（1）饱和盐水的制备

将热开水倒入容器内，加入食盐，直到不再溶解生成沉淀为止（1升水中约加入400g食盐），凉后使用。

（2）操作方法

取5-10g新鲜粪便放入200ml烧杯中，边用玻璃棒搅拌边加入10倍量的饱和盐水，并搅拌均匀，将杯内的混合液用250-260微米（40-60目）铜筛或纱布过滤于另一洁净的烧杯中，弃去筛子或纱布上的粪渣，静置40-45分钟，用直径5-8mm的铁丝圈与液面平行接触沾取表面液膜，抖落在载玻片上加盖片镜检。

（3）注意事项

a．盐水必须饱和

b．40-45分钟必须检查，时间不够漂浮不完全，时间过长（超过1h）易造成虫卵变形、破裂。

c．用铁丝圈沾取液面后，如再沾取另一例时，应先在酒精灯上烧过后再用，以免混合影响检查结果。

三、虫卵计数

麦克马斯特氏法：取粪便2g，放于乳钵中，先加水10ml搅匀，再加饱和盐水50ml。混匀后吸取粪液注入计数室，置显微镜台上，静置1-2min。而后在镜下计数1平方厘米刻度内的虫卵总数；求两个刻室中虫卵数的平均数，（该小室容积为0.15立方厘米），乘以200即为每克粪便中的虫卵数。本法适用于可被饱和盐水浮起的各种虫卵。

四、虫体检查（适用于虫体较小的毛细线虫）

将嗉囊或食道或肠道内容物收集于盆或桶内，加入5-10倍的清水，搅拌均匀，静置待自然沉淀，倾去上层液，保留沉渣，再加水混合，再沉淀，如此反复操作直至上层液透明为止，把上清液倒掉，取沉渣置大玻皿内，先后在白色和黑色背景上，以肉眼或借助于放大镜寻找虫体。

本试验规程包括鸡蛔虫、球虫、异刺线虫、毛细线虫的实验室检测方法，一般情况下仅进行虫卵检测，必要时可进行虫体检测。

1.0 虫卵的检测

1.1 材料

1.1.1 新鲜被检鸡粪鸡粪收集人员于送样前的2-3小时内戴一次性PE手套在鸡舍5-7个不同的点收集新鲜鸡粪（粪便尽可能不沾有垫料等杂物），每个点收集3-5个新鲜鸡粪放入一次性塑料自封袋中，做好标记被检（收集粪便时每一舍都需要更换PE手套）。

1.1.2 饱和盐水将热开水倒入容器内，加入食盐，直到不再溶解生成沉淀为止（1升水中约加入400g食盐），凉后使用。

1.1.3 显微镜、40-60目粪筛或纱布、烧杯、盖玻片、载玻片、试管、吸管、玻璃棒、烘干箱、高压锅、锥形瓶、塑料桶等。

1.2 方法

1.2.1 自然沉淀法

取新鲜被检粪便称重后放入烧杯中，加清水10-20倍量彻底混合使成悬浊液，用40-60目粪筛或纱布过滤，弃去粪渣，将滤液收集于烧杯中，静置沉淀15分钟，倾去上层液，保留沉渣，再加水混合，再沉淀，如此反复操作直至上层液透明为止，把上清液倒掉，置沉淀物于载玻片上，加盖玻片，置显微镜下检查。此法一次粪检须连看2-3片。

1.2.2饱和盐水漂浮法

取新鲜被检粪便称重后放入烧杯中，边用玻璃棒搅拌边加入10倍量的饱和盐水，并搅拌均匀，将杯内的混合液用250-260微米（40-60目）铜筛或纱布过滤于另一洁净的烧杯中，弃去筛子或纱布上的粪渣，静置40-45分钟，用直径5-8mm的铁丝圈与液面平行接触沾取表面液膜，抖落在载玻片上加盖片镜检。

注意事项:

a 盐水必须饱和

b 40-45分钟必须检查，时间不够漂浮不完全，时间过长（超过1h）易造成虫卵变形、破裂。

C 用铁丝圈沾取液面后，如再沾取另一例时，应先在酒精灯上烧过后再用，以免混合影响检查结果。

1.2.3 麦克马斯特氏法

取取新鲜被检粪便称重后放入烧杯中，边用玻璃棒搅拌边加入10倍量的饱和盐水，并搅拌均匀。混匀后吸取粪液注入计数室，置显微镜台上，静置1-2min。而后在镜下计数1平方厘米刻度内的虫卵总数；求两个刻室中虫卵数的平均数，（该小室容积为0.15立方厘米），乘以200即为每克粪便中的虫卵数。本法适用于可被饱和盐水浮起的各种虫卵计数。

1.2.4 虫体检查（适用于虫体较小的毛细线虫）

将嗉囊或食道或肠道内容物收集于盆或桶内，加入5-10倍的清水，搅拌均匀，静置待自然沉淀，倾去上层液，保留沉渣，再加水混合，再沉淀，如此反复操作直至上层液透明为止，把上清液倒掉，取沉渣置大玻皿内，先后在白色和黑色背景上，以肉眼或借助于放大镜寻找虫体。

1.3 器皿灭菌

检测结束后应尽快将与虫卵接触的烧杯玻璃棒塑料桶等放入烘箱内50-60℃烘烤1小时杀死虫卵。