骨髓造血细胞形态学检查(贺)

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免疫组化的应用
1、白血病的免疫分型
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2、用于AL微小残留病灶的检测
白血病病人完全缓解后骨髓细胞 中出现 CD19、CD22、CD10、 CD7、CD5、CD34、CD37等单 抗阳性细胞伴有TbT+则可认定微 小残留病灶存在。
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弱阳性反应（+）： 胞浆有淡灰色，无或有细小颗粒沉淀
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阳性反应（++）：
阳性反应（+）：
胞浆灰黑色，并有较粗的宗黑色颗粒
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强阳性反应（+++）：
胞浆宗黑色颗粒，但颗粒间清晰可辩。
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超强阳性反应（++++）：
胞浆充满黑色颗粒，
病 骨髓转移癌
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典型骨髓报告单举例
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第三讲 组织化学染色
临床意义
铁染色
中性粒细胞碱性磷酸酶染色。
有关白血病的组织化学染色
免疫组化染色
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一、临床意义
了解细胞功能 铁染色 中性粒细胞碱性磷酸酶染色（NAP）
别 积分方式； 阳性率：计数100个中性粒细胞，计算其阳性 细胞百分比，即为阳性率。 积分：所有阳性细胞的“+”号之和即为NAP积 分。 临床意义 ↑：细菌感染、再障、淋巴细胞白血病、慢中 粒白血病。 ↓：病毒感染、MDS、PNH、髓性白血病
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阴性反应（ － ）：胞浆淡红色
分布
缺铁贫：中晚幼增多 巨幼贫：早中幼增多
形态
缺铁贫：胞体小，浆量少，边缘不整，浆发育落后于核发
育，成熟细胞体积小，中央淡染区扩大。 巨幼贫：胞体大，浆量多，核染色质疏松，核发育落后于 浆发育，成熟细胞体积增大，中央淡染区消失。 MDS：胞体偏大，核浆发育不平衡，呈类巨幼样变。核畸 形，偏位，或脱核障碍。
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五、淋巴细胞
数量：约20%
分布：全部为成熟淋巴细胞，婴幼
儿偶可见到幼稚淋巴细胞。 形态：正常。
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六、单核细胞
正常不超过5%，全部为成熟 型，原虫感染、粒细胞缺乏恢复期， 单核细胞增多，单核细胞白血病和 MDS时单核细胞增多并且有大量原 始、幼稚单核细胞出现。
一、骨髓增生程度划分
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骨髓增生程度划分（目测法）
增生程度 极度活跃 明显活跃 活跃 低下 重度低下 有核细胞数
＞200个/高倍视野 100～200个/高倍视野 50 ～ 100个/高倍视野 10 ～ 50个/高倍视野 ＜10个/高倍视野
临床意义
白血病、溶贫等 溶贫、大出血等 正常、增生性贫 血等 再障、骨髓抑制 重症再障、骨髓 严重受抑制
八、巨核细胞
巨核细胞胞体大，涂片中多位于片
尾，检查时以绝对值计数，通常每 张涂片7～35个巨核细胞，成熟型约 占50%，血小板呈簇分布。
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九、寄生虫与其他细胞
疟原虫、利多氏小体、高雪氏细胞、
尼曼皮克氏细胞，成骨细胞，破骨 细胞，里斯氏细胞，转移癌细胞等。
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血象
大细胞贫血 巨椭圆型红细胞
骨髓象
增生活跃或明显活
全血细胞减少
幼红幼粒细胞出现
跃 三系巨幼样改变 红系增多，以原、 早为主 核浆发育不平衡， 核发育落后于浆发 育。
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四、急性白血病
血象
贫血、血小板减
骨髓象
增生极度活跃 白血病细胞恶性
颗粒密不可分。
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四、有关白血病的标记酶染色
过氧化物酶染色
糖原染色
非特异性脂酶染色
氟化钠抑制
氟化钠不抑制
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（一）过氧化物酶染色POX
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（二）糖原染色PAS
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四、各系造血细胞的形态学特点
粒系 红系
淋巴
单核 Байду номын сангаас核细胞
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五、骨髓造血细胞形态学检查的应用
血液病的诊断与鉴别诊断
血液病的疗效观察
非血液病的辅助诊断 脂质代谢病的诊断 查找某些感染性疾病的病原体 提高某些疾病的诊断率
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骨髓造血细胞 形态学检查
主讲人 贺立山
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第一讲 概论
血细胞的生成
造血细胞的命名
造血细胞发育的一般规律
各系造血细胞的形态学特点
造血细胞形态学检查的临床应用
骨髓穿刺的适应症与禁忌症
骨髓涂片检查的基本步骤和内容
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一、血细胞的生成
（三）非特异性脂酶染色NAE
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急性单核细胞白血病NAE染色
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（四）NAE染色氟化钠抑制试验
单核细胞阳性程度强，但被氟化钠
抑制。 原粒细胞阳性程度较弱，但不被氟 化钠抑制。
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ALL与ANLL的鉴别
ALL POX （—） ANLL （+）
减低：粒系减少和/或红系增多
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总数：约60% 分布：从原始到成熟呈塔形分布。 原始+早幼粒＜5%。 以下每阶段以5%递增。 干状、分叶核粒细胞各占20%左右。 嗜酸＜5%，嗜碱＜2%。 形态 ：正常。
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三、粒系（正常）
数量： 增多；粒系白血病、感染、炎症、中毒等。 减少：非粒系白血病、白细胞减少症、粒细胞缺乏症、
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Thanks!
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二、造血细胞的命名
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一般
三、造血细胞发育的一般规律
特殊
胞体
大→小 巨核细胞胞体小→大 胞浆 少→多 胞核 大→小 染色质 疏松→密集 核仁 清楚 → 模糊 → 消失 核浆比 大→小
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四、红系（正常）
总数：约20％
分布
原始＋早幼＜5%
中幼＜10%
晚幼＜15%
形态：圆形，单核，位于中央。
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四、红系（异常）
数量
增多：增生性贫血、MDS、红白血病、真红 减少：白血病、纯红再障、MDS、感染、类白反应等
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第二讲 正常骨髓象分析

取材、涂片、染色情况 有核细胞增生程度 粒、红比值 各系细胞数量、分布及 形态。 粒系 红系 淋巴、单核、浆细胞 及其它非造血细胞。
寄生虫及其他特殊细



胞 巨核细胞及血小板 组织化学染色 血象描述 诊断意见
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二、粒系/红系比值
正常参考值 2～4/1
粒、红比值的分析
结合有核细胞增生度综合分析
临床意义
增高：粒系增多和/或红系减少
三、粒系（异常）
再障、MDS、溶贫、大出血等。 分布： 原始+早幼粒↑：急性白血病，MDS， 中、晚幼粒细胞↑：慢粒，重症感染，类白反应等。 干状、分叶核↑：感染，慢中粒，皮质醇↑症等。 形态 ： 感染：颗粒增粗，增多，中毒颗粒，细胞退行性变。 巨幼贫：核过分叶，巨幼样变，退行性变。 NALL：颗粒增粗，auer小体。 MDS：颗粒↑或↓，分布不均， auer小体，核分叶障。
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七、骨髓涂片检查的基本步骤
肉眼观： 油镜观察 涂片情况 细胞形态及分类 骨髓小粒、脂肪滴 造血岛细胞成分 染色 特殊细胞的辨认 瑞氏染色 巨核细胞分类计数 特殊染色 特殊染色的阳性率及积分 低陪镜观察 提出形态学诊断意见 有核细胞增生情况 肯定诊断 巨核细胞计数 符合诊断 寻找特殊细胞或病原体 提示诊断 造血岛数量及分布情况 无诊断
白血病细胞身份鉴定
标记酶染色
标记抗原染色（免疫组化）
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二、铁染色
骨髓中铁的存在形式
幼红细胞外铁
幼红细胞内铁
临床意义
缺铁贫
铁粒幼细胞贫血
慢性炎性贫血
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三、中性粒细胞碱性磷酸酶染色
阳性判断：根据着色深浅的程度判断，有5个级
PAS
（+）
（—）
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急粒与急单的鉴别
POX 急粒白血病 急单白血病 （+） （+） NAE （+） (++）
NAE F Na
（+） （—）
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五、免疫组化染色
利用单克隆和免疫荧光标记 技术，检测白血病细胞表面或细 胞浆的特异性抗原，进而鉴定其 身份，用于白血病的免疫分型。
二、缺铁性贫血
血象 小细胞低色素贫血 红细胞中央淡染区 骨髓象： 增生活跃或明显活
扩大 白细胞、血小板正 常
跃 红系增高，以中晚 幼红细胞为主 幼红细胞核浆发育 不平衡，浆发育落 后于核发育 组化染色：可染铁 减少
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三、巨幼细胞贫血
少 WBC增高 分类见到大量异 常的原始或幼稚 细胞（白血病细 胞）
增殖 正常造血功能受 抑
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五、血小板减少性紫癜
血象
血小板减少 急性型WBC增
骨髓象
增生活跃 粒、红两系正常 巨核细胞增多伴
高 慢性易合并缺铁 性贫血
有成熟障碍 血小板分布减少
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七、其它细胞
浆细胞：＜2%，均为成熟型。再障
时比例增多，多发性骨髓瘤时浆细胞 比例增多并且有幼稚型浆细胞。 网状细胞：＜1%，再障时比例相对 增多。慢性感染时增多但形态正常。 恶组时增多伴有异常网状细胞出现。 组织嗜碱细胞：再障时比例增多。
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第四讲 常见血液病血 液学特点
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一、再生障碍性贫血
血象
全血细胞减少 淋巴细胞比例相
骨髓象
增生低下 造血细胞减少 淋巴细胞、浆细
对增多 网织红细胞减少 正细胞正色素贫 血
胞、组织嗜碱细 胞网状细胞增多 巨核细胞绝对减 少
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特异性标记抗原
髓系有：CD13、CD14、CD15、CD32、
CD33、CD65、CD91、CD156、CD161等 淋巴有： T淋巴：CD2、CD3、CD4、CD7、CD8 B淋巴：CD19、CD20、CD22 NK细胞：CD16、CD56 干细胞：CD34、CD96
十、组织化学染色
后面将作为专题讲授
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十一、诊断意见
可肯定诊断的疾病 白血病 多发性骨髓瘤 支持诊断的疾病 再障 缺铁贫 巨幼贫 MDS ITP 可提供诊断线索的疾病 溶血性贫血 脾功能亢进 MPD 可协助诊断的疾病 疟疾、黑热病 高雪氏病、尼曼皮克氏
六、骨髓穿刺的适应症与禁忌症
适应症

各种血细胞的数量异常。 原因不明的肝、脾、淋巴结肿大。 原因不明的发热、恶病质。 协助查找某些病原体或特殊细胞。 再障、白血病等的疗效观察。 了解淋巴瘤的病变范围，协助分期。
禁忌症
血友病是唯一的绝对禁忌症。 穿刺部位有感染灶。 生命体征不稳定，生命垂危患者。