实验 紫外分光光度法测定饮料中的防腐剂

实验 紫外分光光度法测定饮料中的防腐剂

实验目的：

1．掌握蒸馏操作；

2．掌握紫外可见分光光度法测定苯甲酸的方法和原理。

实验原理：

为了防止食品在储存、运输过程中发生腐败、变质，常在食品中添加少量防腐剂。防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一。其使用量一般在0.1%左右。苯甲酸具有芳香结构，在波长225nm和272nm处有K吸收带和B吸收带。

由于食品中苯甲酸用量很少，同时食品中其它成分也可能产生干扰，因此一般需要预先将苯甲酸与其它成分分离。从食品中分离防腐剂常用的方法有蒸馏法和溶剂萃取法等。本实验采用蒸馏法对鲜橙多中的苯甲酸进行了测定，苯甲酸（钠）在225nm处有最大吸收，可在225nm波长处测定标准溶液及样品溶液的吸光度，绘制标准曲线法，可求出样品中苯甲酸的含量。

仪器与试剂：

紫外分光光度计，蒸馏装置；无水硫酸钠，磷酸，硫酸，氢氧化钠，重铬酸钾，苯甲酸；鲜橙多。

操作步骤：

1、 样品前处理：

准确称取10.0g均匀的样品，置于250 mL蒸馏瓶中，加1mL H3PO4，20g无水Na2SO4，70mL水，三粒玻璃珠进行第一次蒸馏。用预先加有5mL 0.1mol﹒L-1 NaOH的50mL容量瓶接收馏出液，当蒸馏液收集到45mL时，停止蒸馏，用少量水洗涤冷凝器，最后用水稀释至刻度。

吸取上述蒸馏液25mL，置于另一个250mL蒸馏瓶中，加入25mL 0.033mol﹒L-1 K2Cr2O7溶液,6.5mL 2mol﹒L-1H2SO4溶液，连接冷凝装置，水浴上加热10min，冷却，取下蒸馏瓶，加入1mL H3PO4、20g无水Na2SO4、40mL水和三颗玻璃珠，进行第二次蒸馏，用预先加有的5mL 0.1mol﹒L-1 NaOH的50mL容量瓶接收蒸馏液，当蒸馏瓶收集到45mL左右时，停止蒸馏，用少量洗涤冷凝器，最后用水稀释至刻度。

根据样品中苯甲酸含量，取第二次蒸馏液5～20mL，置于50mL容量瓶中，用0.01mol﹒L-1 NaOH定容，以0.01mol﹒L-1 NaOH作为对照液，于紫外分光光度计225nm处测定吸光度。

2、标准曲线的制作

取苯甲酸标准溶液2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL，分别置于50mL容量瓶中，用0.01mol﹒L-1 NaOH溶液稀释至刻度。以0.01mol﹒L-1 NaOH溶液为对照液，测定其中5号标准溶液的紫外可见吸收光谱（测定波长范围为200~350nm），找出λ

准溶液的吸光度Ai，绘制标准曲线。

数据及处理

1、记录数据

将标准溶液的质量浓度c和吸光度A数据填入表1中




然后在λmax处测定五个标max，