芍药苷

芍药苷提取及结构鉴定

一.文献综述:

赤芍为毛茛科植物芍药(paeonia lactiflora Pall．)或川赤芍(P．veitchii lynch)的干燥根。赤芍有免疫调节作用，临床常用于肿瘤和血瘀症的治疗，尤以肝病常见【1】。国内外研究表明，其主要有效部位为赤芍总苷【1,2】，赤芍总苷中的主要成分为芍药苷，芍药苷具有扩张血管、镇痛镇静、抗炎抗溃疡、解热解痉、利尿、抗应激性溃疡病、扩张冠脉血管、对抗急性心肌缺血以及抑制血小板凝聚等多方面作用，而且毒性小，临床已用于治疗冠心病。

国内外对赤芍的化学成分进行了较多的研究但对从赤芍中提取主成分芍药苷工艺过程,可包括超声波提取【3】、水煎煮【4】、微波提取【5】等，使用的提取溶剂包括水、乙醇、甲醇等【6】。提取成分中主要有芍药苷亚硫酸酯、芍药苷、芍药内酯苷、苯甲酰芍药苷、五没食子酰基葡萄糖、儿茶素、没食子酸、没食子酸甲酯、没食子酸乙酯和蔗糖。在纯化过程多为用液液分配法，硅胶或树脂柱法，来除去非芍药苷成分。而结构鉴定现在多为核磁共振。

芍药苷的化学式：

理化性质：

酸性下稳定，碱性下不稳定

吸湿性无定形棕褐色粉末

熔点：196℃

芍药苷为水溶性的有效成分【7】

参考文献：

【1】许惠玉．赤芍总甙对荷瘤鼠细胞因子及诱导

细胞凋亡影响因素的实验研究[D]．黑龙江医药大学硕士学位论文，2005：22．

【2】刘超，王静，杨军．赤芍总甙活血化瘀作用的研究[J]．中药材，2000，23(9)：557．

【3】陈赞，瞿海斌．超声强化水提赤芍中芍药苷的工艺研究[J]．中国现代应用药学杂志，2005，22(7)：607．

【4】蒋宇利．正交试验优选赤芍水煎煮工艺[J].现代中药研究与实践，2003，17(5)：48．

【5】范文成，叶晓红，李向军，等．微波提取赤芍中芍药苷的实验研究[J]．中成药，2008，30(1)：137

【6】路小平．赤芍中芍药苷提取溶剂的选择[J]．时珍国医国药，2006，17(6)：1017．【7】汤羽，梁海燕. 赤芍中芍药苷的提取方法研究文章编号：1006—2882(2007)02—137—02

二.实验目的和意义：

目的:从赤芍中提取芍药苷和对其进行结构鉴定。

意义:因为芍药苷有很好的药理活性，例如具有镇静、镇痛、解痉、解毒、抗炎、抗过敏、血管扩张等药理活性，并有活血、化瘀、补阴等功效。所以我们需要将它从中药材中提取纯化出来，做跟详细的研究。例如从赤芍中提取。

国内外对赤芍的化学成分进行了较多的研究，但对从赤芍中提取主成分芍药苷工艺过程的研究报道却很少，现本文就基于我们有机化学,天然药化,分析化学,等知识和通过文献检索得到的资料探究一种适于实验室提取芍药苷的方法。并在实验室进行提取纯化及对提取物进行结构鉴定。

三：主要内容与实施方案：

A芍药苷的提取及纯化：

结合文献工艺，采用的工艺路线如图所示，本工艺主要包括醇水溶液回流提取、液液分配、硅胶柱层析等工序。

工艺流程图：

赤芍饮片300g

70%乙醇索氏连续回

流提取

真空浓缩（T≤60℃）

糖浆状浸膏

用水溶解后

石油醚萃取三次

水相真空浓缩（T≤60℃）

膏状物

用洗脱剂（氯仿—甲醇8：1）

溶解过硅胶柱

真空浓缩放置结晶

粗品

重结晶

晶体

注：

1 醇水溶液回流提取

由于乙醇—水体系价廉、无毒，故选用乙醇一水体系作为浸取的溶剂。采用如下操作条件：赤芍饮片300 g研磨后用70％乙醇索氏回流提取。

提取液过滤，滤液在60℃以下真空浓缩至糖浆状浸膏。

2 液液分配

液液分配的目的是将浸膏中的杂质(脂类等)除去，以利于下一步硅胶柱层析的操作。采用石油醚萃取。具体操作条件为：浸取得到的浸膏用250 mL水溶解，用石油醚萃取3次，每次250mL。水相在60℃以下真空浓缩得膏状物。

3 硅胶柱层析

硅胶柱层析是本工艺的关键步骤。采用内径30 mm的层析柱，操作过程如下：硅胶用氯仿充分浸泡，脱气后，用湿法装柱。每克正丁醇萃取所得的膏状物用洗脱剂溶解后上柱，再用洗脱剂洗脱(氯仿—甲醇8:1混合溶液)，洗脱流速约3ml／min，分瓶收集流出液，用TLC定性，合并含芍药苷的部分，用旋转蒸发仪减压浓缩。所得浓缩液放置结晶并经过重结晶纯化。

B 结构鉴定

1 采用TLC进行纯度鉴定。

用两种以上展开剂和显色剂，展开显色观察是否只有一个色斑。如果仅为一个色斑可证明提取物为单体。

例如：采用GF254硅胶板，展开剂为：氯仿—甲醇(5：1)，紫外显色(254nm)。

或采用硅胶G薄层板，展开剂：氯仿—甲醇—乙酸乙酯（8:4:1）,10%硫酸乙

醇溶液，105℃烘10min，日光下观察。

2 采用UV确定其结构

0H，0.5 mg／mL)：应显示该化合物在230nm有最大吸收（含有杂原子不UV光谱图(CH

3

饱和基团），且与芍药苷的标准紫外光谱吸收图谱进行对照。

四进度计划

五参考文献：

1.国家药典委员会中国药典(一部) 2000

2.潘浪胜，吕秀阳，吴平东赤芍中芍药苷提取工艺的优化文章编号：

1001．6880(2006)01．0105．

3.路小平．赤芍中芍药苷提取溶剂的选择[J]．时珍国医国药，2006，17(6)：1017．六预算：

药品：

赤芍饮片300g

70％乙醇2400ml（即绝对乙醇1680ml）

去离子水若干

石油醚750ml

洗脱剂：氯仿一甲醇8：1混合溶液（即大概氯仿2400ml，甲醇300ml）

GF254硅胶和普通硅胶若干

展开剂：氯仿-甲醇5：1 （即大概氯仿200ml，甲醇40ml）

氯仿—甲醇—乙酸乙酯8:4:1 （大概氯仿160ml，甲醇80ml，乙酸乙酯20ml）显色剂：10%硫酸乙醇溶液（10ml硫盐酸，90ml绝对乙醇）

cmcna若干

仪器：

锥形瓶大小烧杯试管青霉素注射液小瓶若干

索氏提取器一个

加热套

分液漏斗

内径30mm的层析柱

旋转蒸发仪一个

真空泵和抽滤瓶

展开缸研钵

UV分析仪

紫外灯