脱细胞软骨生物支架材料与大鼠骨髓间充质干细胞共培养及体内埋植后的降解
兔脱细胞软骨基质颗粒复合SD大鼠脂肪干细胞对软骨内成骨的促进作用
兔脱细胞软骨基质颗粒复合SD大鼠脂肪干细胞对软骨内成骨的促进作用边东潇;包幸福;胡敏【期刊名称】《吉林大学学报:医学版》【年(卷),期】2022(48)4【摘要】目的:探讨兔脱细胞软骨基质颗粒(ACM)的生物相容性,阐明其对SD大鼠脂肪干细胞(ADSCs)软骨内成骨的促进作用。
方法:提取原代SD大鼠ADSCs进行三向分化实验,流式细胞术检测细胞干性。
采集3月龄新西兰白兔耳软骨,采用研磨浸泡法制备ACM备用。
实验分为ACM组和ADSCs+ACM共培养组,在扫描电镜下观察ACM和ACM上ADSCs的超微形态表现,采用钙黄绿素/碘化丙啶(Calcein-AM/PI)荧光染色法观察ADSCs+ACM共培养组中ADSCs的生长情况。
将ADSCs分为对照组和实验组(ADSCs与ACM共培养),采用CCK-8法检测2组细胞增殖活性,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测成软骨诱导7和14 d时2组细胞中Ⅱ型胶原(COL-Ⅱ)、Ⅹ型胶原(COL-Ⅹ)、SOX转录因子9(SOX-9)、血管内皮生长因子(VEGF)、碱性磷酸酶(ALP)和Runt相关转录因子2(RUNX-2)mRNA 表达水平。
结果:成功制备兔ACM,提取的SD大鼠ADSCs可以进行三向分化且表达干细胞特异性表面标志物。
ADSCs可以在ACM上黏附生长。
与对照组比较,实验组ADSCs增殖活性明显升高(P<0.05)。
软骨诱导7 d时,与对照组比较,实验组ADSCs中VEGF、ALP和RUNX-2 mRNA表达水平明显升高(P<0.05),COL-Ⅱ、SOX-9和COL-ⅩmRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05);软骨诱导14 d时,与对照组比较,实验组ADSCs中VEGF、ALP和RUNX-2 mRNA表达水平明显升高(P<0.05),COL-Ⅹ mRNA表达水平明显降低(P<0.05),COL-Ⅱ和SOX-9 mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05);与软骨诱导7 d时比较,软骨诱导14 d时对照组ADSCs中VEGF、ALP和RUNX-2 mRNA表达水平明显降低(P<0.05),COL-Ⅱ和COL-ⅩmRNA表达水平明显升高(P<0.05);与软骨诱导7 d时比较,软骨诱导14 d时实验组ADSCs中COL-Ⅱ和COL-Ⅹ mRNA表达水平明显升高(P<0.05),VEGF、ALP和RUNX-2 mRNA表达水平明显降低(P<0.05)。
骨髓间充质干细胞与脱细胞脑组织支架的生物相容性
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骨髓间充质干细胞与脱细胞脑组织支架的生物相容性术 ★
丁 明祥 ’ ，林 少华 ’ ，李 亮 明’ ，侯 博 ，梁 朝 峰 ，龚 瑾 ，何 海勇 ，郭 英
１中 山市人 民 医院神 经外 科 ，广 东省 中山 市 ５ ２ ８ ４ ０ ０ ２中 山大学 附属 三院神 经 外科 ，广 东省 广 州市 ５ １ ０ ６ ３ ０
中 国组织工程研究
１ ７誊
７ ４期
２ ０ １ ３— ０ ４—０ ２出版
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骨髓间充质干细胞复合生物支架材料修复关节软骨缺损实验研究的开题报告
骨髓间充质干细胞复合生物支架材料修复关节软骨缺损实验研究的开题报告一、研究背景关节软骨缺损是一种常见病，尤其在运动员和老年人中较多见。
由于软骨缺乏自愈能力，缺损很容易扩大并进一步损伤关节。
传统治疗方法包括自体软骨移植和人工关节置换等方法，但治疗效果有限。
骨髓间充质干细胞（BMSCs）具有成骨、软骨形成和自我更新等能力，因此被广泛用于关节软骨缺损的修复。
但单纯应用BMSCs存在以下问题：一是难以定位和固定在缺损部位，二是BMSCs对生长因子等刺激因素的依赖性较大，成分不稳定且活性易受影响。
复合生物支架材料是一种结构稳定的二级生物材料，能够提供生长因子等刺激因子和细胞黏附基底，促进细胞生长和分化，并可以为细胞提供载体。
此外，生物支架材料可以模拟真实环境中的生理条件，使细胞得到最佳生长环境。
因此，我们计划利用BMSCs和复合生物支架材料开发一种新的修复关节软骨缺损的方法，解决目前关节软骨缺损治疗的困难。
二、研究目的本研究旨在探讨骨髓间充质干细胞复合生物支架材料修复关节软骨缺损的安全性和有效性。
三、研究方法1. 实验动物的选取和组建本实验选用SD大鼠为实验对象，用简单随机法分为实验组和对照组，每组10只。
用ISO-10993标准进行主要器官和系统损伤测定。
2. 处理方法实验组大鼠关节软骨缺损后，将BMSCs与复合生物支架材料复合后移植至软骨缺损处，对照组大鼠不进行处理。
3. 结果观察观察两组大鼠的软骨修复情况，包括软骨生长情况、软骨缺损面积缩小情况、软骨样品病理学等评价指标。
四、研究意义本研究将为关节软骨缺损的治疗提供新的治疗手段，尝试改善现有治疗方法的缺点和不足。
同时，本研究也有助于引起更多研究者对BMSCs和复合生物支架材料在临床治疗中的应用进行深入探究。
应用骨髓间充质干细胞复合关节软骨脱细胞基质修复兔软骨缺损的实验研究
色结果可 见关节软骨脱细 胞基质 中存在 很多的软骨陷 窝且 其周围存在 大量的胶 原纤维。扫描 电镜 观察发现脱 细胞基质 中没有残存 的细胞器
或细胞核 ，表 明脱细胞基质 的分离非常干净。
１ ． １ 实验动物 ： 选取３ ６ 只３ 个月龄 的健康新西兰兔 ，体质量约３ ． ０ ｋ ｇ ， 购买 自大连医科大学动 物实验 中心。 １ ． ２实验 试剂及 仪器 ：Ｄ ＭＥ Ｍ培养 液、胰蛋 白酶 、胎 牛血清 、二 氧化 碳 培养箱 。 １ ． ３骨髓 间充质干 细胞的分离 与体外培养 ：Ｂ ＭＳ Ｃ ｓ 的分 离与体外培 养 采用密度梯度离心法 ，具体 参见穆晓红等 研 究方法 。 １ ． ４关节 软骨脱 细胞基质 的制备 ：关节软 骨脱细胞基 质 的制备主要 利
２ ． ２体外 分离及培 养骨髓 间充质干 细胞 ：常规 方法分 离培养兔骨髓 间 充质干细胞 ，并利用免疫染 色的方法鉴 定了骨髓间充质干 细胞 ，发现 Ｂ ＭＳ Ｃ ｓ 特异 性高表达抗原Ｃ Ｄ ，而不表达层粘连蛋 白和Ｃ Ｄ 表 明我 们分离机培养 的骨髓 间充质 干细胞是正确的。
断地进行 自我恢复后 ，其运 动情况逐渐恢 复正常 。步态姿 势正常且术
后２ 周左右基本恢复健康 。
形 态学 观察 ，发 现第 １ 组 新 西兰兔 在移植 手 术后 ，修复 效果 较 好 ，对３ 组 实验观察评分 具体 结果见表 １ 统计学分析发现 ，第 １ 组移 植 骨髓 间充质 干细胞复合 关节软骨脱细胞基 质的修复效果与 第 Ⅱ组单
养约 ３ ｄ 。将 实验 对 象随机 分 为 ３组 ，分别 进 行 ３种不 同的 处理 ，实验 结 果 用关 节软骨 组织 学评 分标 准进行 评 分。结果 移植 手术后 １ ２ 周，
脱细胞基质在软骨及骨组织工程中的应用研究进展
脱细胞基质在软骨及骨组织工程中的应用研究进展作者：田臻林科夫黄奇高峰万莎李浪来源：《青岛大学学报（医学版）》2022年第03期[摘要] 脱细胞基质（AM）是一种利用物理或化学手段去除组织中细胞并保留相关结构及功能性基质蛋白，以用于组织再生修复的生物材料。
AM在软骨及骨组织工程领域有着广泛的应用前景。
本文就AM的制作工艺、支架力学性能以及在软骨与骨组织工程中的应用进行综述。
[关键词]细胞外基质;引导组织再生术;软骨;骨和骨组织;组织工程;综述[中图分类号]R329.24;R329-33 [文献标志码]A [文章编号]2096-5532（2022）03-0462-04doi：10.11712/jms.2096-5532.2022.58.084RESEARCH PROGRESS IN APPLICATION OF ACELLULAR MATRIX IN CARTILAGE AND BONE TISSUE ENGINEERINGTIAN Zhen， LIN Kefu， HUANG Qi， GAO Feng， WAN Sha， LI Lang（Hospital of Chengdu Office of People’s Government of Tibetan Autonomous Region，Chengdu 610041， China）[ABSTRACT] Acellular matrix （AM） is a biological material used for tissue regeneration and repair that is generated by using physical or chemical means to remove cells from tissues and retain original structure and functional matrix proteins. AM shows broad prospects of application in the field of cartilage and bone tissue engineering. This article reviews the fabrication process， mechanical properties of the scaffold， and application of AM in cartilage and bone tissue engineering.[KEY WORDS] extracellular matrix; guided tissue regeneration; cartilage; bone and bones; tissue engineering; review组织工程技术能够通过再生修复重建受损组织的结构和功能，因此得到广泛关注与研究。
脱细胞骨软骨支架复合自体骨髓间充质干细胞修复羊骨软骨缺损的研究
中华关 节 外科 杂志 （ 电子版 ）００年 １ ２１ ２月第 ４卷第 ６期
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损效果 ， 索 骨 软 骨缺 损 新 的修 复 方 式。方 法 制备 直 径 为 ８ｍｍ骨 软 骨 脱 细胞 备 羊负重 区骨软 骨缺 损模 型 ， 空 白、 白支架 及 细胞 支 架复 合 物 制 分 空
３组 ， 组 ４只羊 ， 月 后 处 死 动 物 取 标 本 行 大 体 及 组 织 学 检 测 。结 果 每 ３个 修 复 羊 负重 区 骨 软 骨 缺 损 模 型 实验 结 果 显 示 细胞 支 架 复 合 修 复 组 骨 软 骨有 较 好 修 复 ， 白 支 架 组 软 骨 下 骨 基 本 修 复 、 骨 侧 空 软
人脱细胞真皮复合骨髓间充质干细胞构建组织工程皮肤修复皮肤创面缺损
《中国组织工程研究》 Chinese Journal of Tissue Engineering Research文章编号:2095-4344(2018)26-04179-05 4179www.CRTER .org·研究原著·池凯，男，硕士，主要从事组织修复与创面愈合研究。
通讯作者：李永林，博士，郑州市第一人民医院整形外科，河南省郑州市 450000中图分类号:R318 文献标识码:B稿件接受：2018-05-03Chi Kai, Master, Department of Plastic Surgery, the First People’s Hospital of Zhengzhou, Zhengzhou 450000, Henan Province, ChinaCorresponding author: Li Yong-lin, M.D., Department of Plastic Surgery, the First People’s Hospital of Zhengzhou, Zhengzhou 450000, Henan Province, China人脱细胞真皮复合骨髓间充质干细胞构建组织工程皮肤 修复皮肤创面缺损池 凯，毋 磊，陈龙金，李永林(郑州市第一人民医院整形外科，河南省郑州市 450000) DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.0889 ORCID: 0000-0002-1011-7187(池凯)文章快速阅读：文题释义：脱细胞真皮基质：是由动物或人类皮肤制成的无细胞组织薄片。
它去除了皮肤的全层表皮及真皮层中的全部细胞成分，而保留了真皮的胶原成分和组织基本结构，同时也保留了基底膜成分。
由于皮肤移植中的排斥反应主要是由细胞免疫引起，在去除了具有较强原性的细胞成分后，以胶原蛋白为主要成分的脱细胞真皮基质本身抗原性很低，几乎不引起宿主的排斥反应，可以在宿主体内长期存留并最终被降解和引导正常组织重建。
3D打印脱细胞外基质支架修复软骨缺损的研究进展
3D打印脱细胞外基质支架修复软骨缺损的研究进展王议峰;李松军【摘要】关节软骨缺损是临床上常见的疾病,软骨损伤后,自我修复能力差,影响关节功能,造成长期疼痛.传统的软骨修复方法如微骨折术、软骨下转孔术、骨膜移植术等修复效果不佳.3D打印技术制备的支架在软骨修复领域有巨大发展潜力.脱细胞外基质(DECM)支架具有促进细胞黏附、增殖、分化及低抗原反应等特性,但其生物力学性能不足.通过改善支架制备技术及改变支架构成能提高DECM支架生物力学性能,但支架制备技术的改变使成本增加、打印难度增大;复合支架如聚合物/DECM支架植入机体后,其中的聚合物降解周期长,可能对机体造成不良影响.支架固定方式有多种,如缝合固定、压合固定、针及销固定等,这些方式对支架的生物力学特性要求较高,且固定效果不佳,易使支架损坏、降解、吸收.分析总结DECM支架修复软骨缺损的机制、DECM支架生物力学性能及固定方式存在的问题与不足,可以为今后研究DECM支架修复软骨缺损提供方向.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2019(025)004【总页数】6页(P701-705,710)【关键词】脱细胞外基质;支架;3D打印;软骨缺损;修复;生物力学特性;固定【作者】王议峰;李松军【作者单位】遵义医学院第五附属(珠海)医院骨一科,广东珠海 519100;遵义医学院第五附属(珠海)医院骨一科,广东珠海 519100【正文语种】中文【中图分类】R5681.3关节软骨缺乏营养供应，损伤后自我修复能力差[1]，从而导致长期的关节疼痛和功能障碍，甚至关节废用，给患者带来极大的痛苦和不便。
传统的软骨修复方法，如微骨折术、软骨下钻孔术、骨膜移植等，修复的是纤维软骨，在组织学上纤维软骨与周围正常软骨不同[2]，导致疗效不佳。
近年来，对制备组织工程支架所需的3D 打印材料——生物油墨研究较多，利用该材料制备的3D支架与软骨缺损部位解剖外形吻合，同时具有细胞黏附、增殖所需三维结构以及支架材料所必需的机械强度，这给软骨损伤及缺损的修复带来了希望。