医学免疫学实验课件-实验三 细菌的人工培养
《医学免疫学与微生物学》实验报告
《医学免疫学与微生物学》实验报告实验一【实验名称】：沉淀反应［实验目的］：通过单向琼脂扩散测定待测血清ig含量【实验材料】：1%离子琼脂、白喉类毒素、白喉抗毒素、玻片、毛细管移液管打孔器【试验步骤】：（1）将溶解的离子琼脂冷却至450℃，加入适当浓度的抗原混合均匀，吸取３－４毫升加在载玻片上，使其均匀布满载玻片而又不流失。
（2）琼脂被固化并制成凝胶板，然后在适当的距离穿孔。
（3）将待测可溶性抗体滴入孔中。
（４）将凝胶平板放入带盖瓷盘中，下面垫一湿纱布以保持湿度，置于在370C培养箱中观察沉淀环24小时。
［实验结果］：（沉淀环直径）测量沉淀环直径：mm。
［实验分析］单向琼脂扩散是一种定量试验，主要用来测定标本中各种免疫球蛋白色或补体成分的含量。
在孔中加入待测抗体使其向四周扩散，经一定时间后抗体与琼脂中当抗原相遇时，以适当的比例形成白色沉淀环。
沉淀环直径与抗体浓度成正比。
根据测试样品沉淀环直径的大小，可从已知的标准曲线中查出样品中抗体的含量。
第1页，共6页实验二【实验名称】：间接凝集抑制试验（妊娠试验）［实验目的］：测定待检尿液中是否含ｈｃｇ（绒毛膜促性腺激素）以诊断妊娠［实验材料］：孕妇尿液、非孕妇尿液、ｈｃｇ致敏乳胶抗原、抗ｈｃｇ血清、载玻电影等［试验步骤］：（1）做一张幻灯片，在左右两边做标记。
（２）在载玻片左侧加一滴待检尿液，右侧加一滴非孕妇尿液。
（３）在两侧尿液中分别加一滴抗ｈｃｇ血清，摇动混匀２－３分钟。
（４）在两侧液滴中分别再加一滴ｈｃｇ致敏乳胶抗原，摇动混匀２－３分钟。
（５）观察判定结果。
[实验结果]（关于凝集和非凝集的描述）左侧（待检尿液侧）呈现均匀的乳状液状态，无凝集颗粒。
间接凝集抑制阳性。
右测（非孕妇尿液侧）出现明显的凝集颗粒。
间接凝集抑制阴性。
［实验分析］：（结合实验原理）孕妇尿液中hCG含量显著升高。
尿液中的hCG与添加的抗hCG结合，消耗抗hCG，使添加的hCG乳胶抗原不再与抗hCG结合，乳胶抗原无间接凝集反应（凝集被抑制）。
微生物实验细菌的人工培养及形态学检查 ppt课件
微生物实验细菌的人工培养及形态学
36
检查
3、抗生素 青霉素 链霉素 庆大霉素
密集划线法 操作同化学消毒剂
青 霉 素
链
庆
霉
大 霉
素
素
微生物实验细菌的人工培养及形态学
37
检查
三、细菌的生化实验：
1.葡萄糖发酵试验：蓝色半固体培养基 对面两 小组，一组大肠杆菌，一组葡萄球菌
2. 吲哚试验：液体培养基，三菌均可。 3. 硫化氢试验：半固体无色培养基。
1）蓝色半固体培养基（溴麝香草酚蓝）
2）无色半固体培养基（醋酸铅）
3 ）基础液体培养基
微生物实验细菌的人工培养及形态学
16
检查
细菌动力鉴别
细菌生化反应鉴别
鉴别培养基
微生物实验细菌的人工培养及形态学
17
检查
三、各种培养基的接种
一）无菌操作
在医疗实践中或微生物试验中防止周围环 境中的微生物污染操作对象，同时防止操作对 象的微生物污染周围环境。
微生物实验细菌的人工培养及形态学
40
检查
2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后 再进行划线？
答：以免接种环温度太高，杀死菌种。
3.接种操作为什么一定要在火焰旁边进行？
答：空气中存在有大量的微生物，而接种灯 的火焰旁能形成一个无菌区域，在这里操作，可 以避免杂菌污染。
微生物实验细菌的人工培养及形态学
2.调配PH：加入缓冲剂，保持PH稳定。
3. 消毒灭菌。
满足a充足的营养物质
b合适的PH值
就可制成基础培养基
c无菌
微生物实验细菌的人工培养及形态学
10
检查
（三）分类：1、按物理性状
细菌的培养及鉴定ppt课件
膜炎球菌和淋球菌用
• 中国蓝/麦康凯平板—G-杆菌用 • SS平板—沙门氏菌和志贺氏菌用 • M-H平板—细菌药敏用 • TCBS平板—弧菌科细菌用 • 沙包氏平板—真菌培养用
• 真菌显色平板—真菌培养用 • 罗氏培养基—分枝杆菌用
奈瑟氏菌属有11个种，临床就淋病奈 菌和脑膜炎奈瑟菌 最为重要
奈瑟氏菌属鉴定流程
菌落观察：灰色、湿润、透明或半透明、不溶血
涂片染色：G-双球菌，呈肾形或咖啡豆状
氧化酶试验+ 触酶+
+
麦芽糖 --
脑膜炎奈瑟菌
淋病奈瑟菌
细菌的鉴定与药敏
卫生部重点监控的6种MDRO
MASA:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 —判断标准：对苯唑西林耐药或头孢西丁诱导实验阳性 CRAB：耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌 —判断标准：对亚胺培南或美罗培南耐药 VER：耐万古霉素肠球菌 —判断标准：对万古霉素耐药
菌
嗜血杆菌的鉴定途径
• 只能在营养条件高的巧克力平板上生长，菌落为中等大小、圆形、灰白色、 透明
• 革兰染色：G-小杆菌 • 卫星实验就可以帮助初步鉴定
嗜血杆菌
2021/6/16
48
奈瑟氏菌属鉴定
• 在血平板和巧克力平板上生长，mac上不生长 • 血平板形成灰色、湿润、透明或半透明、不溶血的菌落 • 巧克力平板上形成圆形、灰蓝色的似露滴状菌落 • 革兰染色： G-双球菌，呈肾形或咖啡豆形，凹面相对 • 氧化酶和触酶都均为阳性
革兰染色
甲菌
紫紫色色（（GG＋＋））
初染
媒染
脱色
复染
革结兰晶紫氏染碘色液 步骤乙醇示意图稀释复红
细菌的培养及鉴定 ppt课件
抗酸染色步骤
1、涂片包括涂片、干燥、固定三步。
涂片
干燥
固定
细菌的培养及鉴定
抗酸染色步骤
2、染色包括初染、脱色、复染三步。
初染
脱色
复染
冲洗
冲洗
石炭酸复红维持 3-5’ 3%盐酸酒精30 ’’ ~1’
冲洗
干燥 油镜观察
细菌的培养及鉴定
美蓝复染1 ’
抗酸染色结果
抗酸菌呈红色， 常堆积成团， 排列无序， 偶呈分枝状生长。 背景及非抗酸性细菌呈兰色。
细菌培养及鉴定
细菌的培养及鉴定
标本采集原则
1.及时采集微生物标本作病原学检查 2.在抗菌药物使用前采集标本 3.采样时严格执行无菌操作 4.标本容器须无菌，但不得有消毒剂 5.采样后立即送检 6.送检标本应注明细菌来的培源养及和鉴定检验目的
咳痰方法
病人先漱口，清洁口腔，去除表面的菌群 病人深咳，收集从下呼吸道咳出的痰液 无痰可用3％～5％NaCl 5ml雾吸约5min导痰 以清晨第二口痰为佳 标本采集后放置时间不超过2小时
细菌的培养及鉴定
清洁中段尿液
尽量取早晨第一次尿液 嘱患者留取标本的前一天晚上少饮水 女性病人 ➢收集标本前用肥皂水冲洗外阴，再以灭菌清水
冲洗尿道口 ➢排出几毫升后，不停止尿流，采集中段尿 男性病人 ➢翻转包皮，清洗尿道口 ➢排出几毫升后，不停止尿流,采集中段尿
采集标本后立即送检！
细菌的培养及鉴定
常用的培养基种类和用途
细菌的培养及鉴定
革兰染色步骤
涂片包括涂片、干燥、固定三步。
涂片
干燥
固定
细菌的培养及鉴定
固定的目的：
使细菌的细胞凝固，使菌体与玻片粘 得更牢固； 可改变菌体对染料的通透性； 加热固定可杀死细菌，比较安全。
医学免疫学ppt课件
免疫学（immunology） 研究机体免疫系统结构和功能，以及有关疾病的免
疫学发病机制、诊断和防治的一门学科。
.
3
二、免疫学基本内容
（一）免疫系统的组成与结构 （二）免疫系统的功能 （三）免疫应答的类型 （四）特异性免疫应答及其特点
.
4
（一） 免疫系统（immune system, IS）的组成
3.耐受性
免疫细胞接受抗原（决定基）刺激
→对特定抗原（决定基）产生特异性不应答
→免疫耐受
.
13
三、免疫学发展简史
1．经验免疫学时期（16世纪~17世纪）
* 中国医学家用人痘苗预防天花
在明代隆庆年间（1567 ～ 1572），人痘苗已在我国广 泛应用；至 17 世纪，人痘苗接种预防天花的方法引起邻国 的注意，先后传入俄国、朝鲜、日本、土耳其、英国等地， 进而使人痘苗预防天花的方法得以推广和验证。此即经验 免疫学时期。它是人类认识机体免疫性的开端，为以后英 国医生 Jenner （琴纳）发明牛痘苗奠定了基础。
.
14
天花病人局部痂皮 鼻 儿童
中国古代“种人痘”
.
15
2.经典免疫学时期 （ 18－20世纪中叶）
这一时期，人们对免疫功能的认识由人体现象的观察进入 了科学实验时期。
*牛痘苗的发明（Jenner,1798)
Edward Jenner (1749-1823)
.
Jenner种牛痘图
16
*减毒疫苗的发明
1879 Louis Pasteur
19 世纪末，随着微生物学的发 展，法国免疫学家巴斯德 （Pasteur）和德国细菌学家郭 霍（Koch）在创立了细菌分离 培养技术的基础上，通过系统 地科学研究，利用物理、化学， 以及生物学方法获得了减毒菌 苗，并用于疾病的预防和治疗。 Pasteur 以高温培养法制备了炭 疽疫苗，用狂犬病毒在兔体内 经连续传代制备了狂犬病疫苗。 这些减毒疫苗的发明不但为实 验免疫学打下了基础，也为疫 苗的发展开辟了新局面。
《医学免疫学与微生物学》实验报告
实验一［实验名称］：沉淀反应［实验目的］：通过单向琼脂扩散测定待测血清Ig含量［实验材料］：１％离子琼脂、白喉类毒素、白喉抗毒素、载玻片、毛细吸管打孔器［试验步骤］：（１）将溶解后的离子琼脂冷却到４５０Ｃ，加入适当浓度的抗原混合均匀，吸取３－４毫升加在载玻片上，使其均匀布满载玻片而又不流失。
（２）琼脂凝固后制成凝胶板，然后隔适当距离打孔。
（３）在孔内滴加待测可溶性抗体。
（４）将凝胶平板放入带盖瓷盘中，下面垫一湿纱布以保持湿度，置于３７０Ｃ恒温箱中２４小时，观察沉淀环。
［实验结果］：（沉淀环直径）测量沉淀环直径：毫米。
［实验分析］单向琼脂扩散是一种定量试验，主要用来测定标本中各种免疫球蛋白或补体成分的含量。
在孔中加入待测抗体使其向四周扩散，经一定时间后抗体与琼脂中抗原相遇，在比例适宜处生成白色沉淀环。
沉淀环直径与抗体浓度成正比。
根据测试样品沉淀环直径的大小，可从已知的标准曲线中查出样品中抗体的含量。
实验二［实验名称］：间接凝集抑制试验（妊娠试验）［实验目的］：测定待检尿液中是否含ＨＣＧ（绒毛膜促性腺激素）以诊断妊娠［实验材料］：孕妇尿液、非孕妇尿液、ＨＣＧ致敏乳胶抗原、抗ＨＣＧ血清、载玻片等［试验步骤］：（１）取一片载玻片，标记出左右。
（２）在载玻片左侧加一滴待检尿液，右侧加一滴非孕妇尿液。
（３）在两侧尿液中分别加一滴抗ＨＣＧ血清，摇动混匀２－３分钟。
（４）在两侧液滴中分别再加一滴ＨＣＧ致敏乳胶抗原，摇动混匀２－３分钟。
（５）观察判定结果。
［实验结果］：（凝集和非凝集的描述）左侧（待检尿液侧）呈现均匀的乳状液状态，无凝集颗粒。
间接凝集抑制阳性。
右测（非孕妇尿液侧）出现明显的凝集颗粒。
间接凝集抑制阴性。
［实验分析］：（结合实验原理）孕妇尿液中的ＨＣＧ含量显著增高。
尿液中的ＨＣＧ与加入的抗ＨＣＧ结合，抗ＨＣＧ被消耗，使得加入的ＨＣＧ乳胶抗原不能再与抗ＨＣＧ结合，不出现乳胶抗原间接凝集反应（凝集被抑制），所以液滴呈现均匀乳状液，为乳胶间接凝集抑制阳性反应。
《医学微生物学》细菌的人工培养实验
《医学微生物学》细菌的人工培养实验[目的]1．掌握平板划线法、斜面、液体和半固体培养基等各种接种方法。
2．掌握接种细菌用具、接种细菌的环境要求和无菌操作要领。
3．熟悉常用培养基的原理、种类及其用途。
4．熟悉细菌和二氧化碳培养方法。
5．熟悉常用的厌氧菌培养技术。
6．了解培养基制备的基本过程。
[内容]（一）、培养基制备技术[材料]1．试剂：牛肉膏、氯化钠、蛋白胨、琼脂粉、抗凝绵羊血、磷酸氢二钾、磷酸二氢钠、葡萄糖、乳糖、甘露醇、柠檬酸钠、硫酸镁、磷酸二氢铵、硝酸钾、硫代硫酸钠、柠檬酸铁、硫酸。
亚铁、尿素、溴甲酚紫、溴麝香草酚蓝、中性红、酚红、lmol ／L NaOH、lmol／L HCl。
2．器材：500ml锥形瓶、500ml量筒、10ml、5ml和lml吸管、精密pH试纸、华氏试管、硅胶塞、天平、高压蒸气器、血清凝固器、脱脂棉、滤纸、漏斗、无菌平皿。
[方法]1．培养基制备的基本过程包括调配成分、溶解、矫正pH、过滤澄清、分装、灭菌、质量检查和保存。
（1）调配成分：按培养基组成准确称取各成份用量，放入锥形瓶或大容量烧瓶中，加一定量蒸馏水，使其充分混合。
应注意染料、胆盐和指示剂等应在矫正pH后加入。
（2）溶解：将调配好的混合物在沸水浴或流动蒸气灭菌器中，使其完全溶解。
不可将培养基装在铜铁容器中加热，因培养基中含铜量超过0.3mg／L时，细菌不易生长；含铁量超过0.14mg／L时可抑制细菌毒素的产生。
（3）矫正pH：一般将培养基的pH调至7.2～7.6左右。
经高压灭菌后其pH可发生0.1～0.2变动。
若用NaOH矫正，高压灭菌后pH下降0.1～0.2；若用Na2CO3矫正，高压灭菌后pH升高0.1～0.2。
（4）滤过澄清：自配的培养基通常有一些混浊或沉淀，需滤过澄清后方可使用。
液体或半固体培养基常用滤纸过滤；固体培养基在熔化后趁热以绒布或双层纱布加脱脂棉过滤。
（5）分装：①基础培养基：一般分装于锥形瓶灭菌后备用，以便随时分装倾注平板或配制营养培养基等；②琼脂斜面：通常在熔化后分装于试管，量约为试管高度的1/4～1/3，加塞后灭菌，趁热摆成斜面，斜面长度约为试管长度的2/3，且保持试管下端1cm柱高；③半固体培养基：分装量为试管量的1/4-1/3，加塞灭菌后趁热直立凝固④琼脂高层培养基：分装量为管长的2/3(接种厌氧菌用)，灭菌后趁热直立凝固；⑤琼脂平板无菌分注：先将灭菌琼脂熔化后冷却至50℃左右，以无菌操作倾注于灭菌平皿内(内径90mm的平皿约13～15min)，水平旋转平皿，待琼脂凝固后将平皿翻转，置4℃保存备用。
医学微生物学实验PPT实验三细菌的人工培养
汇报人：可编辑 2024-01-11
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 实验结果与分析 • 实验总结与思考
01 实验目的
掌握细菌的人工培养技术
了解细菌生长所需的 营养条件和环境因素 。
学会接种、培养和观 察细菌的方法。
掌握培养基的制备和 灭菌技术。
落。
稀释分离法
通过将细菌稀释到一定浓度后，均 匀涂布在培养基表面，使细菌在培 养基上独立生长成单菌落。
选择性分离法
利用选择性培养基的特殊成分或抑 制剂，抑制非目标菌的生长，使目 标菌成为优势菌种，便于分离纯化 。
03 实验步骤
培养基的制备与灭菌
培养基制备
根据实验需求，选择适合的培养 基配方，按照比例混合各种成分 ，搅拌均匀后，调节pH值至适宜 范围。
细菌的形态、染色及生化反应结果
01
02
03
04
形态
通过显微观察，我们记录了不 同细菌的形态特征，如球菌、
杆菌、螺旋菌等。
染色
采用革兰氏染色法对细菌进行 染色，观察其染色反应并记录
。
生化反应
通过观察细菌对不同生化底物 的反应，了解其生化特性。
结论
细菌的形态、染色及生化反应 结果对于鉴别和分类细菌具有
02 实验原理
细菌的生长繁殖条件
营养物质
细菌需要从外界环境中获取营 养物质，如碳源、氮源、水、 无机盐等，以支持其生长和繁
殖。
温度
不同种类的细菌对温度的需求 不同，有些细菌在高温下生长 ，有些则喜低温。
酸碱度
细菌对环境的酸碱度也有一定 的要求，通常在pH值6-8之间 较为适宜。
气体环境
医学免疫学与病原生物学3细菌的生长繁殖与人工培养
三、细菌的生长繁殖的规律
（一）细菌繁殖的方式 以二分裂方式进行无性繁殖
（二）繁殖的速度 多数细菌每20～30min分裂一次 个别较慢：结核分枝杆菌 18～20h
10
（三）细菌的繁殖规律 以培养时间为横坐标，培养物中的活
菌数为纵坐标，可绘制出一条生长曲线。
11
细菌的生长曲线可分为四期
迟缓期 对数期 稳定期 衰亡期
（三）温度 大多数病原菌生长最适温度为37℃
7
（四）渗透压 （五）气体
根据对分子氧的需要与否分为四类： a 专性需氧菌 b专性厌氧菌 c微需氧菌 d 兼性厌氧菌
8
专性需氧：必须在有游离氧气的环境生长， 结核分歧杆菌 微需氧：低氧压5%~6%最好，超过10%即有 抑制作用，幽门螺杆菌 兼性厌氧：兼有需氧呼吸和无氧发酵两种功 能，大多数病原菌 专性厌氧：只能在无氧环境中生存，游离氧 的对其有剧毒作用，破伤风梭菌
动 力 试 验
（－）（＋）
20
（三）细菌在固体培养中的生长现象 菌落与菌苔
光滑型菌落
粗糙型菌落
粘液型菌落
粗糙型菌落
21
第三节 细菌的重要代谢产物
一、细菌的分解代谢产物及生化反应
1. 糖发酵试验
大肠杆菌：分解葡萄糖产酸产气（甲酸脱氢 酶），分解乳糖 志贺菌属：分解葡萄糖产酸不产气，不分解 乳糖（除宋内志贺菌迟缓分解乳糖） 沙门菌属：分解葡萄糖产酸产气（除伤寒沙 门菌不产气），不分解乳糖
30
二、细菌的合成代谢产物及意义
（一）与致病性有关的代谢产物 1. 毒素和侵袭性酶 毒素：外毒素和内毒素（LPS） 侵袭性酶：透明质酸酶、血浆凝固酶等
31
2. 热原质 泛指那些能引起机体发热的物质，按其
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
领取菌种及培养基
操
分别进行平板、斜面及半固体培养基接种， 然后贴上标签。
作 流 程
37度恒温箱培养18～24小时后观察结果。
（二）细菌人工培养操作
4. 实验方法及结果
• 平板分区划线法
实 验
方
法
及
结
果
分区划线
结果
（二）细菌人工培养操作
4. 实验方法及结果
• 斜面纯培养
实 验
方
法
及
结
果
（二）细菌人工培养操作 4. 实验方法及结果 • 半固体培养
试
培养基中加入含
验
硫氨基酸、铅离
子、铁离子
（三）实验操作内容 3. 硫化氢试验 （2）结果判断
硫 化 氢 试 验
+
分组
两人一组
操作内容
细菌的人工培养
细菌的生化反应
分
菌种 金葡菌、大肠杆菌各一支 沙门氏菌、大肠杆菌各一支
组 与
材
1块普通平板/人
料 分
培养基
1支斜面培养基/人
7种生化反应管/人
配
1支半固体培养基/人
1. 糖发酵试验
（1）原理
糖\醇类
细菌产生的酶 酸（HCOOH) 脱氢酶
糖 发
酵
（培养基含葡萄糖、
试
乳糖、麦芽糖、甘 露醇或蔗糖等一种
大肠埃希菌：分解乳糖产酸产气
验
糖类，并加酸碱指 示剂，如溴甲酚紫）
致病性肠道细菌：大多数不分解乳糖
（三）实验操作内容
1. 糖发酵试验
（2）方法
大肠埃希菌、沙门氏菌
糖
液体培养基
基
本
知
识
普通平板
血平板
半固体培养基
（一）细菌人工培养的基本知识
4. 培养基的制备
调配成分
溶解
灭菌
质量检查 和保存
分装
矫正pH
基
本
知
过滤澄清
识
（一）细菌人工培养的基本知识
5. 细菌培养方法
需氧培养法
基
本
知
二氧化碳培养法
识
厌氧培养法
（一）细菌人工培养的基本知识
5. 细菌培养方法
需氧培养法
疫苗、抗毒素等的制备。
（一）细菌人工培养的基本知识 2. 细菌人工培养的基本步骤
基
制备培养基
接种
培养
本
知
识
（一）细菌人工培养的基本知识
3. 细菌培养基的种类
根据营养组成和用途可分为
基
基础、增菌、选择、鉴别、厌氧
鉴别培养基
本 知
识
根据物理状态分为
液体、固体、半固体
（一）细菌人工培养的基本知识 3. 细菌培养基的种类
接种针穿刺接种
发
酵
5种糖生化反应管
试 验
37℃培养18～24h
观察结果
（三）实验操作内容
1. 糖发酵试验
（3）结果判断——观察培养基颜色变化与气体产生情况
糖
溴甲酚紫
发
酵
紫色
中性或碱性
试 验
黄色
酸性
对照 +
+
-
有细菌生长培养基呈混浊，可能出现3种结果。
（三）实验操作内容
2. 靛基质（吲哚）试验
（1）原理
病原生物学实验 实验三
病原生物学与免疫学教研室 授课教师： 联系方式： 时间：2018年1月
教学内容
细菌的人工培养
（一）细菌人工培养的基本知识
1. 细菌人工培养的目的
感染性疾病的病原学诊断
基
鉴定细菌，指导临床用药。
本 知
细菌学研究
识
用于细菌生理、遗传变异、致病性和耐药性等研究。
生物制品的制备
靛 基
质
色氨酸
色氨酸酶
吲哚试剂
（ 吲
哚
培养基中加入
）
色氨酸
试
验
（三）实验操作内容
2. 靛基质（吲哚）试验 （2）结果判断 ——观察培养基与吲哚试剂 交界处颜色变化
靛 基 质 （ 吲 哚 ） 试 验
阳性 (+）
阴性 （-)
（三）实验操作内容
3. 硫化氢试验
（1）原理
硫
含硫氨基酸
酶
+铁离子
化 氢
或+铅离子
基
本
知
二氧化碳培养法
识
厌氧培养法
电热恒温培养箱
二氧化碳培养箱
（一）细菌人工培养的基本知识 5. 细菌培养方法
基 本 知 识
烛缸二氧化碳培养法
厌氧袋
（二）细菌人工培养操作
1. 操作内容
操作内容
目的
操
作
平板分区划线
分离细菌
内 容
斜面纯培养
增菌及菌种保存
半固体培养
观察动力和菌种保存
（二）细菌人工培养操作
穿刺接种
实 验 方 法 及 结 果
结果
细菌的生化反应
（一）生化反应基本原理
不同的细菌
知 ▪ 含有不同的分解代谢的酶
识 ▪ 具有不同的分解代谢途径 点 ▪ 对同一营养物质的分解代谢及其产物有所不同
基 本 原 理
利用生化方法检测代谢产物以判断细菌的分解代谢 特征，从而达到鉴定细菌的目的。
称：细菌的生化反应检测法
2. 材料
工具：接种环、接种针
实
菌种：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌
验 材Leabharlann 培养基：料普通平板培养基、斜面培养基、半固体培养基
（二）细菌人工培养操作 2. 材料
实 验 材 料
普通平板培养基 (2-3%琼脂)
斜面培养基 (2-3%琼脂)
半固体培养基 (0.2-0.5%琼脂)
（二）细菌人工培养操作
3. 操作流程
常见的生化反应
对
VP试验
糖
的
甲基红试验
对 蛋
吲哚试验
发 酵
单糖发酵试验
白 质
基 本
的
原
分
硫化氢试验
理
解
其
尿素酶试验
他
试
验 枸橼酸盐利用试验
（二）实验材料
1.菌种
大肠埃希菌、沙门氏菌
实
2.微量生化反应管
验 材
料
葡萄糖、乳糖、蔗糖、麦芽糖、甘露醇、
蛋白胨水（靛基质）、硫化氢。
3.试剂 吲哚试剂
（三）实验操作内容