血清酸化溶血试验

血清酸化溶血试验(Ham试验)

1原理

阵发性睡眠性血红蛋白尿症的患者，因其红细胞本身有缺陷，故对补体敏感性增高，在酸化的自身血清中，经37℃孵育，易破坏产生溶血。此法比较敏感，特异性也高。

2.标本采集

2.1 早晨空腹采血，静脉采血。

2.2

3.8％(w/v)枸椽酸钠0.2ml+静脉血1.8ml，混匀。

2.3 另抽取患者静脉血3-5ml，注入促凝管中.

3试剂

3.1 0.2mol/L盐酸(盐酸1.4m1，蒸馏水加至100m1即成，应新鲜配制)。

3.2 8.5g/L氯化钠溶液。

3.3 50％红细胞悬液制备，用10ml离心管1支，加入8.5g／L氯化钠溶液4-5ml，再直接加入患者抗凝血3-4滴，混匀(用吸管轻轻吹打,防止用力过度导致溶血)后离心，弃去上清液。如此反复洗涤红细胞2次，最后一次加入等量生理盐水,配成50％红细胞悬液。

3.4促凝管中静脉血离心,分离出血清。

4操作

4.1取2支清洁干燥小试管，编号,按表2步骤进行操作。

表2 酸化血清溶血试验操作

4.2轻轻混匀，加塞，置于37℃水浴中1小时。

5结果观察

第1管溶血，第2管不溶血者为阳性。

6临床意义

阳性见于阵发性睡眠性血红蛋白尿症和某些严重发作的自身免疫性溶血性贫血。

7 注意事项

7.1所用器皿必须清洁干燥，操作过程要避免发生溶血，否则可导致假阳性。

7.2血清酸化后，试管必须塞紧，否则二氧化碳逸出，可使血清酸度下降。