姜黄素固体分散体的制备及脂质体的制备

实验十八固体分散体的制备及体外溶出度考察
一、实验目的
1.掌握熔融法制备固体分散体的工艺流程和操作；
2.熟悉固体分散体的鉴别方法；
3.了解固体分散体常用的载体材料。

二、实验指导
固体分散体是药物与载体形成的以固体形式存在的分散系统，其具有以下优点：（1）提高水难溶性药物的生物利用度；（2）控制药物释放；（3）提高药物稳定性；（4）掩盖药物的不良气味和刺激性；（5）液体药物固体化。

药物制备成固体分散体后可根据需要再制成适宜剂型，如胶囊剂、片剂、软膏剂、栓剂、滴丸剂等。

固体分散体的载体材料可分为水溶性、难溶性和肠溶性三大类。

常用的水溶性载体材料有：聚乙二醇（PEG）、聚乙烯吡咯烷酮（PVP）、泊洛沙姆188（pluronic F68）等，多用于制备速释型固体分散体。

难溶性载体是制备缓释型固体分散体的常用材料，包括乙基纤维素（EC）、含季铵基团的丙烯酸树脂（EudragitE、RL、RS等）棕榈酸甘油酯、巴西棕榈蜡等。

肠溶性载体一般选用醋酸纤维素酞酸酯（CAP）、羟丙甲纤维素酞酸酯（HPMCP）、聚丙烯树脂（Eudragit L、Eudragit S）等。

载体材料在使用时可根据制备目的选择单一载体或混合使用载体。

固体分散体的制备方法有熔融法、溶剂法、溶剂-熔融法、研磨法、溶剂喷雾干燥法或冷冻干燥法。

其中，熔融法是指将载体加热至熔融后加入药物搅匀，迅速冷却成固体，再将该固体在一定温度下放置使成为易碎物，适用于熔点较低的载体材料，如聚乙二醇类。

溶剂法又称共沉淀法，是将药物与载体共同溶解于有机溶剂中，再除去溶剂，使药物与载体材料同时析出，经干燥得到固体分散体，适合于易溶于有机溶剂、熔点较高的载体材料，如PVP、EC等。

药物与载体是否形成固体分散体及药物的分散状态可通过溶出速度、平衡溶解度、熔点的测定、X-射线衍射、差热分析及偏光显微镜等方法验证。

三、实验仪器与材料
1. 仪器与器皿：蒸发皿、培养皿、研钵、不锈钢微量药勺（刮）、玻璃棒、80目筛网、1 mL 移液管、10 mL容量瓶、干燥器、水浴锅、冰箱、电子天平、紫外分光光度计、溶出仪等。

2. 材料与试剂：姜黄素原料、姜黄素对照品、PGE6000、N, N-二甲基甲酰胺（DMF）、十二烷基硫酸钠（SDS）、一次性注射器（5 mL）、一次性针头滤器（水系，0.45 μm，13 mm）、5 mL离心管、无水氯化钙等。

四、实验内容与操作
（一）姜黄素-PEG6000固体分散体的制备
1.处方：
姜黄素0.2 g
PEG6000 2.0 g
2.制备：
①称量：称取处方量姜黄素和PEG6000置于蒸发皿内，混匀；
②加热熔融：将蒸发皿置于65 ℃水浴上加热熔融，搅拌均匀；
③铺板：将熔融液迅速倾倒于预冷的培养皿中，涂成薄层；
④固化：将培养皿置于冰箱冷却一定时间，取出置于干燥器中干燥；
⑤粉碎：取出培养皿，用刮勺刮下固体物，研磨粉碎，过80目筛，即得姜黄素-聚乙二醇
6000固体分散体。

3.物理混合物的制备：
称取处方量姜黄素和PEG6000置于蒸发皿内，混匀即得。

（二）溶出度试验
1. 溶出介质的配制
称取5 g SDS置于烧杯内，加入1Ｌ纯水溶解即得溶出介质。

2. 标准曲线的绘制
①精密称取姜黄素对照品5 mg置于10 mL容量瓶中，用DMF溶解并稀释至刻度，摇匀；
②精密吸取1.0 mL溶液置于10 mL容量瓶中，用5 g/L的SDS水溶液稀释至刻度，作为
储备液；
③分别精密吸取储备液0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0 mL于10 mL容量瓶中，
用5 g/L的SDS水溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液；
④将上述对照品溶液置于紫外分光光度计中，于429 nm 的波长处测定吸光度，以浓度为
横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

3. 溶出度试验
①采用桨法测定，设置转速100 r/min，温度37.0 ℃，加入溶出介质900 mL；
②分别精密称取姜黄素固体分散体和物理混合物，按姜黄素计算每个样品含药30 mg加入
溶出介质中；
③自计时起分别于5、10、30 min时取样5 mL（同时补充同温同体积的新鲜介质），于
0.45μm微孔滤膜过滤后收集滤液；
④将上述滤液放置室温后加入适当溶出介质稀释，置于紫外分光光度计中于429 nm 的波
长处测定吸光度，代入回归方程计算药物浓度及药物溶出百分率。

五、实验结果和讨论
1.描述制得固体分散体的外观性状，计算收率。

2.计算姜黄素固体分散体和物理混合物的药物溶出百分率，比较两者的差异。

六、思考题
1.固体分散体的载体材料有哪几种？有哪些制备方法？
2.固体分散体的速释原理是什么？
实验二十一脂质体的制备及药物含量测定
一、实验目的
1.通过脂质体的制备，掌握薄膜分散法制备脂质体的方法。

2.熟悉脂质体药物含量的测定方法。

3.了解脂质体的结构特点及形成原理。

二、实验指导
脂质体或称类脂小球，系将药物包封于类脂质双分子层而形成的微型泡囊。

按照结构类型，脂质体可分为单室脂质体与多室脂质体。

单室脂质体为含有单一类脂双分子层的脂质体，其中粒径在20–80 nm的称为小单室脂质体，也称纳米脂质体；粒径在0.1–1μm的称为大单室脂质体。

多室脂质体为含有多层类脂质同心双分子层的脂质体，粒径在1–5μm。

此外，某些脂质体没有相同的圆心，其内部是由很多大小、形态不一的小脂质体紧密堆积而成，小脂质体之间被脂质双层膜隔开，结构类似于泡沫，可将该脂质体称为多囊脂质体。

脂质体一般由磷脂和胆固醇制备而得。

磷脂为两性分子，一端为亲水的含氮或磷的头，另一端为疏水（亲油）的长烃基链。

在水中，磷脂分子亲水基团向两侧的水相排列，而亲油基团则向内排列，进而自组装形成脂质双分子层结构。

胆固醇插在脂质双分子层中间，具有调节膜流动性的的作用。

脂溶性药物一般包载在脂质双分子层中，而水溶性药物一般包载在脂质体囊内部或多层脂质体层间的水性介质中。

制备脂质体的方法很多，有薄膜分散法，逆向蒸发法、主动包封法、注入法、复乳法、冷冻干燥法等。

本实验采用薄膜分散法，此法适于实验室小量制备，操作简单。

三、实验仪器与材料
1.仪器与器皿：电子天平、旋转蒸发仪、旋涡混合器、紫外分光光度计、25 mL茄形瓶、1 mL 移液管、5 mL、10 mL和25 mL容量瓶、2 mL离心管和5 mL离心管等。

2.材料与试剂：姜黄素原料药、姜黄素对照品、大豆卵磷脂、胆固醇、氯仿、甲醇、丙酮、N, N-二甲基甲酰胺（DMF）、一次性注射器（5 mL）、一次性针头滤器（水系，0.22 μm、0.45 μm，25 mm）。

四、实验内容与操作
（一）姜黄素脂质体的制备
1.处方：
姜黄素 5 mg
大豆卵磷脂45 mg
胆固醇9 mg
纯水 5 mL
2.制备：
①称取处方量姜黄素于5 mL离心管中，称取处方量大豆卵磷脂和胆固醇于5 mL离心管
中；
②姜黄素采用3 mL丙酮加热溶解，大豆卵磷脂和胆固醇采用3 mL氯仿溶解；
③将上述两种溶液均转移至25 mL茄型瓶中，采用旋转蒸发仪减压旋蒸除去有机溶剂，
温度设置为50 ℃，直至烧瓶内壁形成均匀药/脂薄膜；
④取下茄形瓶，立即加入5 mL 预热的纯水，于旋涡混合器震荡至药/脂膜水化完全；
⑤将水化后的药物溶液经0.45 μm微孔滤膜反复挤出3次，再经0.22 μm微孔滤膜反复挤
出3次后即得姜黄素脂质体溶液。

（二）脂质体中药物含量的测定
1. 标准曲线的绘制
①精密称取姜黄素对照品5 mg置于10 mL容量瓶中，用DMF溶解并稀释至刻度，摇匀；
②精密吸取1.0 mL溶液置于10 mL容量瓶中，用DMF稀释至刻度，作为储备液；
③分别精密吸取储备液0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0 mL于10 mL容量瓶中，
用DMF稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液；
④将上述对照品溶液置于紫外分光光度计中，于423 nm 的波长处测定吸光度，以浓度为
横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线试液。

2. 脂质体中药物含量的测定
①吸取0.1 mL脂质体溶液置于25 mL容量瓶中，加入DMF溶解稀释至刻度；
②将上述溶液置于紫外分光光度计中于429 nm 的波长处测定吸光度，代入回归方程计算
脂质体中药物的浓度。

五、实验结果和讨论
1.描述制备脂质体时过膜挤出前后脂质体溶液的外观。

2. 描述脂质体中药物含量测定的注意事项。

六、思考题
1.脂质体的性状与乳剂有何不同？
2.在脂质体的制备中加入胆固醇的目的是什么？
3.脂质体的结构与表面活性剂在溶液中形成胶团的结构有何不同？。